小鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经元样细胞的实验研究

目的:探讨体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞(mouse marrow mesenchymal stem cells,mMSCs)分化为神经元样细胞的条件。方法:密度梯度离心结合差异贴壁法分离、纯化mMSCs,胰蛋白酶消化传代扩增mMSCs。用最适浓度的β-疏基乙醇(BME)+神经生长因子(NGF)、NGF+全反式维甲酸(ATRA)、NGF+BME+ATRA作为诱导剂,观察诱导期间细胞的形态变化,并用免疫细胞化学法鉴定神经元烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)的表达,行甲苯胺蓝染色显示尼氏小体。结果:(1)免疫细胞化学显示NGF+BME+ATRA诱导组诱导效率最高,78%细胞表达NSE,80%细胞表达NF;(2)各诱导组尼氏染色均出现尼氏小体。结论:NGF、BME、ATRA能诱导mMSCs分化为神经元样细胞,其中以NGF(10μg/L)+BME(2.5mM/L)+ATRA(2.5M/L)组效率最高。

β-巯基乙醇的合成及精馏研究

β-巯基乙醇(β-M)是一种重要的化工产品,是燃料和农药的重要中间体。研究了常压条件下β-M的合成工艺,采用环氧乙烷和硫化氢直接合成法,考察了反应物的配比、反应温度、空速、催化剂用量等对产品收率的影响。试验结果表明:β-M的适宜反应条件是环氧乙烷:硫化氢=1.4～1.6:1,反应温度30℃,空速55～70m3/m3·hr,催化剂用量为20mL。同时开发了一种巯基乙醇的精馏工艺,精馏后产品纯度可达99.99%,其纯度符合市场要求,且工艺简单可行。

NGF和BME对小鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的作用(英文)

目的探讨神经生长因子(NGF)β-疏基乙醇(BME)诱导小鼠骨髓间充质干细胞(mouse marrow mesenchymal stem cells, mMSCs)分化为神经元样细胞的作用。方法密度梯度离心结合差异贴壁法分离、纯化mMSCs,用血小板源性生长因子(Platelet Derived Growth Factor, PDGF-BB)和表皮生长因子(Epidermal Growth Facotro, EGF)刺激促进mMSCs分裂增殖。以NGF和BME为诱导剂,观察诱导期间细胞的形态变化,并用免疫细胞化学法鉴定神经元烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,甲苯胺蓝色法显示尼氏小体。结果免疫细胞化学显示:70%细胞表达NSE,74%细胞表达NF;实验组行尼氏染色出现尼氏小体。结论NGF和BME能诱导mMSCs 分化为神经元样细胞,而且具有较高的诱导效率。