β-突触核蛋白的分子克隆、鉴定及发育表达

突触核蛋白包括α-突触核蛋白、β-突触核蛋白、γ-突触核蛋白3种。β-突触核蛋白可抑制α-突触核蛋白的聚集,是帕金森症的相关蛋白。本试验运用RT-PCR技术克隆并鉴定了猪小脑β-突触核蛋白(SNCB)的cDNA序列。定量RT-PCR分析结果表明,SNCB转录物在脑组织中高表达;在胚胎发生早期可检测到SNCB mRNA,且胚胎发育期的脑组织中SNCB mRNA的转录水平显著升高。辐射杂交图谱结果表明,猪SNCB定位在2号染色体q21-22。重组猪β-突触核蛋白亚细胞在3个不同细胞类型的细胞质中均可检测到。

β-synuclein对Ⅱ型囊泡单胺转移体表达的促进作用

目的探讨β-突触核蛋白(β-synuclein)对Ⅱ型囊泡单胺转移体(VMAT2)表达的影响。方法通过2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色检测β-synuclein稳定表达对细胞内ROS水平的影响;采用免疫荧光双标法、免疫组织化学法及Western blotting检测VMAT2在稳定转染β-synuclein的SH-SY5Y细胞及正常SH-SY5Y细胞中的表达情况。结果 DCFH-DA荧光染色显示,稳定表达β-synuclein的细胞的荧光强度较正常SH-SY5Y细胞明显减弱。VMAT2在稳定转染β-synuclein的SH-SY5Y细胞中的表达水平较正常SH-SY5Y细胞明显升高。结论β-synuclein能够促进VMAT2的表达,减少胞浆内DA含量,抑制ROS产生,在帕金森病多巴胺神经元变性过程中对其起到保护作用。