金属蛋白酶组织抑制剂对涎腺腺样囊性癌表达β-肌营养不良蛋白聚糖的影响

目的研究涎腺腺样囊性癌(SACC)中β-肌营养不良蛋白聚糖(β-DG)的表达情况,探讨金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)对SACC细胞表达β-DG的影响。方法采用免疫细胞化学染色法检测经不同浓度(10、15、20、25μmol.L-)1TIMPs作用后SACC肺高转移株ACC-M和肺低转移株ACC-2中β-DG的表达情况,以未经TIMPs作用的ACC-M和ACC-2细胞作为对照。收集7例SACC患者的肿瘤组织样本,以10例正常涎腺组织作为对照,采用免疫组织化学染色法检测β-DG的表达情况。结果未经TIMPs作用前,ACC-2和ACC-M细胞均未见β-DG表达,经不同浓度TIMPs作用后,ACC-2和ACC-M细胞β-DG表达均为阳性。10例正常涎腺组织中,β-DG主要表达于腺泡的基膜上;SACC组织的癌巢周围及癌细胞中β-DG表达阴性。结论 SACC细胞外基质和细胞骨架连接处的β-DG发生了断裂,可能使其更容易发生侵袭和转移,而TIMPs能够逆转β-DG的表达,为治疗SACC提供了新思路。

MMP-2/-9裂解肌营养不良蛋白聚糖在多发性硬化/实验性自身免疫性脑脊髓炎中作用的研究进展

多发性硬化(MS)是中枢神经系统炎性脱髓鞘性疾病。实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)为MS的动物模型,在临床表现、神经电生理和组织病理上与MS极其相似。肌营养不良蛋白聚糖(DG)是一种非整合素家族的黏附分子,包括2个亚基:α-DG和β-DG;基质金属蛋白酶(MMP)是一种锌离子依赖的肽链内切酶。在MS/EAE中,DG的表达变化与病灶中增高的MMPs,尤其MMP-2和MMP-9有关,DG被MMP-2和MMP-9裂解参与病灶髓鞘的脱失、血脑屏障通透性增加等病理过程,文中对MS/EAE中MMP-2和MM-9对DG的作用相关研究进行综述。

TIMPs对舌鳞状细胞癌异常β-DG的作用

目的探讨金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)对舌鳞状细胞癌异常β-肌营养不良蛋白聚糖(β-DG)的调控作用。方法用免疫组化SP和Western Blotting法,检测舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株在MMP Inhibitor或MMP-2/MMP-9 Inhibitor调控前后异常β-DG改变情况。结果未用MMP Inhibitor或MMP-2/MMP-9Inhibitor调控前,舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株无β-DG免疫特染区;调控后,癌细胞出现棕黄色β-DG免疫特染区。舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株有43kDa和30kDa的β-DG蛋白条带;经MMP Inhibitor或MMP-2/MMP-9Inhibitor干预后,30kDa条带消失。结论 MMPs靶向作用Tca8113细胞株于癌细胞β-DG的近C端,使其断裂,从而使细胞与细胞外基质联结体断裂。经MMP Inhibitor或MMP-2/MMP-9 Inhibitor干预后,Tca8113细胞株癌细胞恢复了正常的β-DG;异常30kDa的β-DG消失。因此,MMP Inhibitor或MMP-2/MMP-9 Inhibitor能抑制舌鳞状细胞癌β-DG的断裂。另外,通过TIMPs抑制MMPs,能修复舌鳞状细胞癌断裂的β-DG蛋白,恢复癌细胞与细胞外基质的联结,从而可能会改变舌鳞状细胞癌侵袭和转移的特性。

β-DG过表达对结肠癌细胞系SW620细胞凋亡的影响

目的研究β-肌营养不良蛋白聚糖(β-DG)在HT29、HCT116、SW480、SW620等4种常见的结肠癌细胞系中的表达情况,及其过表达后对SW620结肠癌细胞凋亡及相关蛋白表达变化的影响。方法培养结肠癌细胞系,提取总蛋白进行免疫印迹,检测各细胞中内源性β-DG蛋白的表达情况;构建pcDGFP-β-DG真核表达质粒,瞬时转染至SW620细胞中,提取总蛋白进行免疫印迹或直接进行免疫荧光制片,检测β-DG的过表达和细胞定位情况;过表达β-DG后,利用流式细胞术检测SW620细胞凋亡的变化情况,并进一步检测细胞凋亡标志蛋白聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)的表达变化情况。结果与人胚肾上皮细胞(HEK 293T)相比,结肠癌细胞系中内源性β-DG(43 ku)的表达量均有所降低,以SW620细胞下降更为明显,且都检测到了不同表达程度的β-DG水解片段(31 ku)。成功构建pcDGFP-β-DG真核表达质粒,在SW620细胞中能够有效表达,且主要定位在细胞质中靠近核膜的位置。过表达β-DG后,SW620细胞的凋亡率为0.167±0.014,高于空白组(0.075±0.027)和对照组(0.084±0.023),差异有统计学意义(P<0.05),且过表达β-DG后,完整型PARP(113 ku)的蛋白含量有所降低,而裂解型PARP(89 ku)的蛋白含量有所增高。结论β-DG在结肠癌细胞系中异常表达,主要表现在其异常的水解断裂。过表达β-DG能够促进SW620细胞凋亡及相关凋亡蛋白的表达,为进一步了解β-DG功能,及其与结肠癌之间的关系提供了细胞学基础。

肌营养不良蛋白聚糖的研究现状

肌营养不良蛋白聚糖是一种跨膜糖蛋白,广泛表达于各种组织的基底膜和细胞膜交界面。肌营养不良蛋白聚糖基因在骨骼肌等多种类型的细胞中表达,虽然肌营养不良蛋白聚糖基因突变本身未发现与疾病有关。但是,肌营养不良蛋白聚糖翻译后加工(主要是糖基化)水平的改变会导致肿瘤等疾病。文中对肌营养不良蛋白聚糖的结构和作用、肌营养不良蛋白聚糖与疾病的关系、肌营养不良蛋白聚糖的研究进展进行综述。

肌营养不良蛋白聚糖、明胶酶及其相关性的研究现状

肌营养不良蛋白聚糖是一种与抗肌萎缩相关的糖蛋白复合体,是由α-肌营养不良蛋白聚糖和β-肌营养不良蛋白聚糖两种亚单位组成的跨膜糖蛋白,广泛分布于各种组织,特别是骨骼肌和神经系统。基质金属蛋白酶是细胞外的一大类锌依赖性肽链内切酶家族,其活性与肌营养不良蛋白的裂解密切相关,特别是基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9,又名明胶酶。文中就肌营养不良蛋白聚糖和明胶酶的结构、功能,及其相关性的研究现状进行综述。

舌鳞癌β-DG缺失及意义探讨

目的研究舌鳞癌联结细胞与细胞外基质的关键结构β-DG的变异情况。方法免疫组化SP法,用NCL-b-DGBeta-Dystroglycan鼠单克隆抗体43DAG1/3D5,以正常舌黏膜为对照,研究正常β-DG所在部位,以及舌鳞癌中β-DG的变异特点。结果正常舌黏膜上皮β-DG主要位于其上皮的基底层,以基底膜处最为集中;舌鳞癌组织的癌巢周围及癌细胞膜处β-DG缺失。结论在舌鳞癌中,联接细胞骨架和细胞外基质的结构从β-DG处断裂。细胞内和细胞外联接的断裂,可能会使癌细胞生长的自限性丧失,从而导致癌细胞获得侵袭与转移的能力。