一株耐高温β-胡萝卜素降解菌的筛选及发酵工艺优化

以提升烟叶香韵为目的,对4株产香酵母菌进行发酵培养,通过产香感官评价、酶活分析、烟叶发酵成分分析(GC-MS法),筛选得到1株β-胡萝卜素降解产香酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)SC35。方法:①4株酵母菌发酵产香效果感官评价;②CS35菌株β-胡萝卜素降解效果分析、样品萃取及GC-MS靶向测试分析;③酶活测定、酶促反应体系研究;④菌株SC35发酵工艺优化及响应面优化。SC35在70℃高温环境下能有效加速β-胡萝卜素的降解,降解产物为1,3-环己二酮、氧化异佛尔酮、β-紫罗兰酮等,通过单因素试验和响应面法优化菌株SC35的最佳培养基配方中各组分添加量依次为葡萄糖2.01%,NaNO20.20%,K2HPO40.10%,MgSO40.05%,FeSO4·7H2O 0.001%,KCl 0.05%;最佳发酵条件为发酵温度27.65℃,发酵时间72 h,接种量0.99%,摇床转速140 r/min,装液量100 mL/250 mL,pH值5.5(自然)。采用优化后发酵工艺SC35粗酶液降解效率可达86%以上。

β-胡萝卜素降解葡萄球菌化学合成培养基营养素的研究

目的:探索适于β-胡萝卜素降解葡萄球菌生长的最佳化学合成培养基配方。方法:先确定培养基成分,再利用单一成分缺失方法确定β-胡萝卜素降解葡萄球菌的必需营养素。结果:K2HPO4、NaNO3、Pro、Arg、Val、Gly、Try等物质是此菌体生长必需的营养素。结论:经筛选合成的完全化学合成培养基可以用于此β-胡萝卜素降解葡萄球菌的培养,培养物具有降解类胡萝卜素能力。

影响β-胡萝卜素降解菌酶活性因素的研究

采用单因素试验和响应面分析法对影响β-胡萝卜素降解菌粗酶液酶活的主要因素进行优化,建立主要试验因素与响应值之间的函数关系,并筛选得到影响酶活性的主要培养基组成及最优培养条件,主要培养基组成为:蔗糖30g/L、酵母浸粉4g/L;培养条件:接种量7%、培养温度36℃、pH7、培养时间36h,此条件下β-胡萝卜素降解菌酶活力达到750.72U/L。