试管扩散法检测牛乳中β-酰胺类抗生素残留研究

试管扩散法是以微生物受阻法为基本原理,用嗜热脂肪芽孢杆菌作为指示菌,在培养基中加入指示剂,根据嗜热脂肪芽孢杆菌在牛乳中生长产酸使指示剂变色现象,确定牛乳中β-内酰胺类抗生素残留量,比较试管扩散法和TTC法检测牛乳中6种β-内酰胺类抗生素残留得到的检测限和检测时间等指标。结果表明,试管扩散法比TTC法更适合国内牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的检测。

高效液相色谱法测定β-内酰胺抗生素中残留乙酸的含量

目的建立测定β-内酰胺类抗生素原料中乙酸残留量的HPLC方法。方法采用多因素组内设计方法,确定色谱流动相的组成、比例和pH值。参考ICH Q2,从专属性、检出限和定量限、线性、准确度、精密度和耐用性等6个方面对方法进行验证。用所建立的方法对19种β-内酰胺类抗生素原料进行了测定。结果采用C_(18)色谱柱,流动相:甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾,梯度洗脱;柱温25℃;检测波长220 nm。供试品、溶剂和流动相对乙酸测定没有明显干扰;乙酸的最低检出限约为0.029μg,最低定量限约0.12μg;从定量限到限度2倍浓度范围内,方法的线性关系良好,拟合直线方程为y=388866.7186x-177.5720,r2=0.9999;低中高浓度加样回收率平均分别为93%,96%和99%;方法的重复性和中间精密度分别为2.37%和2.11%;在3根不同C_(18)色谱柱上的耐用性良好。19种β-内酰胺抗生素原料中有3种筛查出残留乙酸。结论所建方法可以实现对β-内酰胺类抗生素原料中残留乙酸的准确定量,为该类原料的生产过程控制和标准物质研制提供了依据。

β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂点评标准的建立及应用分析

目的建立β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的点评标准,结合临床应用情况,分析其应用效果,促进临床合理使用β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂。方法参照相关指南及专家共识,制订β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的药物利用评价(DUE)标准。通过建立的DUE标准,采用回顾性研究方法,评价2019年7—12月南华大学附属第二医院使用头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦的894例病例的用药合理性。结果894例病例中,适应证合理率为93.62%,给药剂量合理率为90.49%,用药疗程合理率为89.37%,微生物送检合理率为75.84%。结论建立的头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦DUE标准能够作为临床合理用药的重要参考,该院头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦使用基本合理。

猪源链球菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性研究进展

猪链球菌病是生猪养殖中比较常见且危害较大的动物疫病,该病的病原是球菌科链球菌属的多种链球菌,其中猪链球菌2型是重要的人畜共患病原菌。β-内酰胺类抗生素一直是治疗猪链球菌病的首选药物,但受长期选用的影响,猪源链球菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性逐渐增强,给猪链球菌病的临床治疗带来威胁。文章对猪链球菌病的流行性及病原特点、猪源链球菌对β-内酰胺类抗生素的耐药机制和耐药现状进行概述,以期为指导临床用药和新药研发提供参考。

液相色谱-质谱法测定孕妇尿液中3种残留的氯霉素类抗生素

目的建立液相色谱-质谱法测定孕妇尿液中3种残留的氯霉素类抗生素,并进行方法学验证。方法尿液利用Oasis HLB固相萃取小柱进行净化和富集,液相分离采用SHISEIDO MG-C_(18)(100 mm×3.0 mm,3.0μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子源,选择离子监测模式检测[M-H]-:氯霉素m/z 320.8、氟苯尼考m/z 355.8、甲砜霉素m/z 353.8、甲苯磺丁脲(内标)m/z 268.9。结果尿液中3种残留的氯霉素类抗生素在5~500 ng/mL范围内呈良好的线性关系(均r>0.999);批内和批间的精密度及准确度良好(RSD<8.9%,∣相对误差(RE)∣<9.3%);提取回收率为71.4%~108.5%,稳定性良好(∣RE∣<11.8%);几乎没有残留;稀释不影响测定的精密度和准确度。共检测了18份不同孕期(孕早期、孕中期和孕晚期)孕妇的尿样,大部分样品能检测到氯霉素(但浓度低于最低定量限5 ng/mL),其中少量样品能测出氟苯尼考,完全没有检测到甲砜霉素残留。结论该方法操作简便、重现性好,适用于尿液中3种氯霉素类抗生素的测定,可为氯霉素类抗生素的残留与孕妇不良妊娠结局的相关性研究提供方法学基础。

β-内酰胺类抗生素在儿童呼吸道感染性疾病治疗中的应用价值分析

目的探讨β-内酰胺类抗生素应用在儿童呼吸道感染性疾病治疗中的价值。方法非随机选取2022年3月—2024年1月济宁市第三人民医院收治的76例呼吸道感染性疾病患儿为研究对象,按治疗方法不同分成对照组(38例,头孢噻肟钠治疗)和观察组(38例,头孢噻肟钠联合阿奇霉素治疗)。对比两组炎症因子水平、免疫功能及呼吸功能。结果治疗后观察组白细胞介素6(87.73±11.17)ng/L、C反应蛋白(2.27±0.68)mg/L水平均低于对照组的(106.89±15.74)ng/L、(3.88±0.87)mg/L,差异有统计学意义(t=7.675、12.564,P均<0.05);治疗后观察组T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+高于对照组,而其CD8+水平低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);治疗后观察组呼吸功能各项数值均优于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论将β-内酰胺类抗生素应用在儿童呼吸道感染性疾病治疗中可明显改善其炎症因子水平、免疫功能及呼吸功能。

抗生素的使用与水牛鲜乳中菌落总数及β-内酰胺酶残留关系的研究

为探究抗生素的使用与奶水牛鲜乳中菌落总数及β-内酰胺酶残留的关系,对某奶水牛规模场开展为期2个月的水牛生鲜乳监测工作。试验采用正常奶水牛生鲜奶样作为对照组,注射抗生素奶水牛的生鲜奶样作为试验组,采用平板计数法检测菌落总数、快速检测试剂条检测β-内酰胺酶。试验结果显示使用抗生素的奶水牛生鲜乳易检测出菌落总数超标及β-内酰胺酶阳性,同时奶水牛自身会产生内源性β-内酰胺酶。

牛奶中β-内酰胺类抗生素残留的快速检测方法

将微生物方法与仪器分析方法相结合,用嗜热脂肪芽孢杆菌作为指示菌,通过“阻抗分析仪”的自动检测、分析,根据DT时间的产生,判断牛奶中抗生素的残留情况。结果表明,该方法操作简单、快捷,灵敏度高、结果易判断,全部检测过程可在2～3h内完成。本方法检测牛奶中青霉素G的检测限可达3μg/kg。

β-内酰胺类抗生素残留检测技术研究进展

β-内酰胺类抗生素具有杀菌活性强、毒副作用小等特点,在动物饲养过程中应用非常普遍。随着其在临床上应用研究和毒理学研究的深入,由其残留问题引起的食品安全问题已引起各国食品安全管理部门及国际组织的广泛关注。本文对β-内酰胺类抗生素药物残留的检测方法做了全面的综述。

β-内酰胺类抗生素残留受体分析法的研究进展

β-内酰胺类抗生素广泛用于动物细菌感染性疾病的治疗和预防,然而可食性动物产品中的抗生素残留会增加细菌耐药性的发生,危害人体健康,还会影响乳制品生产,导致经济上遭受巨大损失,因此开发快速可靠的β-内酰胺类抗生素残留检测方法对于食品安全控制非常必要。受体分析方法因其可以对一类药物进行多残留检测,具有专一性较强、灵敏度高、自动化程度高等优点,成为目前β-内酰胺类抗生素残留筛选方法研究的热点。本文将概述β-内酰胺类抗生素的受体及其制备方法,根据标记和检测手段的不同对受体分析法进行分类,包括放射免疫受体分析法、酶标记受体分析法、胶体金标记受体分析法、酶比色法和结合生物传感器的受体分析法,并介绍每类方法在β-内酰胺类抗生素残留检测中的研究进展和应用情况。

微生物法检测牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的对比研究

对牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的三种微生物检测法进行比较,确定三种方法对牛乳中常见β内酰胺类抗生素残留的检测限、检测时间、检测成本、操作难易程度等关键参数,同时指出国标TTC法在检测限方面,AOAC认证的BSDA法在操作难易程度方面的缺陷,建议采用经济省时、简便易行、检测限较低的试管扩散法作为BSDA法及ITC法的补充,应用于牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的检测。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定豆芽中氟喹诺酮类和硝基咪唑类抗生素的残留量

取5 g豆芽样品,加入100μg·L^(-1)混合内标溶液40μL和含1%(体积分数,下同)乙酸的乙腈溶液10 mL,振荡3 min,超声20 min,离心3 min。重复提取一次,合并上清液,用含1%乙酸的乙腈溶液稀释至25 mL。分取10.00 mL,置于装有QuEChERS吸附剂[100 mg N-丙基乙二胺(PSA)、100 mg C18、800 mg无水硫酸镁]的离心管中,离心3 min,静置5 min。分取5.00 mL上清液于40℃氮吹至近干,加入1.00 mL含0.1%(体积分数,下同)甲酸的30%(体积分数)乙腈溶液,复溶后过0.22μm滤膜,滤液进入超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪分析。12种抗生素在ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)上用不同体积比的含2 mmol·L^(-1)甲酸铵的0.1%甲酸溶液和含0.1%甲酸的乙腈溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱分离,以电喷雾离子源正离子(ESI+)模式电离,以多反应监测(MRM)模式检测,内标法定量。结果显示:12种抗生素的质量浓度均在1.0~250.0μg·L^(-1)内和对应的峰面积比呈线性关系,检出限(3S/N)为0.0796~0.494μg·kg^(-1)。按标准加入法进行回收试验,回收率为71.6%~90.9%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.5%~7.6%。方法用于160批豆芽样品(包括黄豆芽、绿豆芽、豆芽苗)的分析,在前二者中检出了恩诺沙星、环丙沙星及甲硝唑,检出量为1.68~992μg·kg^(-1)。

超高效液相色谱-串联质谱法测定牛羊肉中7种β-内酰胺类抗生素的残留量

建立了牛羊肉中7种β-内酰胺类药物(青霉素G、青霉素V、苯唑西林、氯唑西林、萘夫西林、头孢喹肟、头孢氨苄)残留检测的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法。样品经水和乙腈提取后,用正己烷去除脂肪,再用C18固相萃取柱净化,浓缩定容后,供超高效液色谱-串联质谱法分析。色谱条件:Waters BEH C18色谱柱(50mm×2.1mm,1.7μm);流动相1mL/L甲酸水和乙腈进行梯度洗脱;柱温为40℃;进样量为10μL;流速为0.3 mL/min。质谱条件:电喷雾正离子(ESI+)模式电离,多反应监测(MRM)模式检测,外标法定量。结果表明,在5μg/L^500μg/L的基质匹配标准溶液内7种β-内酰胺类药物均有良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.99;样品中7种β-内酰胺类药物的检出限(LOD)均为1ng/g,定量下限(LOQ)均为2ng/g;7种β-内酰胺类药物的平均回收率为80%~108%,相对标准偏差(RSD)小于10%。本方法能够快速、准确的检测出生鲜牛羊肉中7种β内酰胺类药物,为检测牛羊肉中β内酰胺类药物提供了技术支持。

动物源食品中β-内酰胺类抗生素残留的检测现状

β-内酰胺类抗生素常用于畜牧业预防及控制动物感染性疾病。由于使用方法不当或不遵守休药期规定等原因,造成动物源食品中该类抗生素残留超标,给人类健康带来严重危害,因此需严格控制其在动物源食品中的残留。作者就目前常用的β-内酰胺类抗生素兽药残留的检测方法,包括微生物检测法、理化检测法及免疫分析法等作一简单介绍,分析各种方法的利弊,以期为动物源食品中药物残留检测技术的进一步开发提供参考。

试管扩散法与国标TTC法检测牛乳中β-内酰胺类抗生素残留

以PCA培养基为基础培养基,Bsc953为指示菌,溴甲酚紫为颜色指示剂,对6种β-内酰胺类抗生素残留的不同浓度乳样进行检测,确定了试管扩散法检测指标,并与国标TTC法进行比较,指出试管扩散法经济省时、简便易行,在检测限、检测时间、检测操作方便程度上较国标TTC法具有很强的优越性,可作为国标TTC法的补充,应用于国内牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的检测。

牛乳中β-内酰胺类抗生素残留及检测方法的比较

介绍了牛乳中抗生素残留的原因及危害,描述了β-内酰胺类抗生素在牛乳中的残留特性及残留现状,阐述了不同抗生素残留检测方法的优缺点,为牛乳中抗生素残留的检测提供理论参考。

国标TTC法与AOAC纸片法检测乳中-β内酰胺类抗生素残留对比研究

对乳中抗生素残留的两种微生物检测法进行了比较,确定2种标准方法对6种广谱-β内酰胺类抗生素的检测限,同时指出国标TTC法在检测灵敏度方面的缺陷。建议乳中抗生素残留检测过程中,采用特异性与灵敏度高、经济简便、检测限达到MRLS规定的AOAC纸片法作为国标TTC检测法的补充。

β-内酰胺类抗生素残留免疫分析研究进展

β-内酰胺类抗生素是广谱抗菌药物,具有杀菌活性强、毒副作用小等特点,在兽医临床上应用广泛,其在畜产品中残留也日趋严重。作者对β-内酰胺类抗生素人工抗原合成、抗体制备以及近年来报道的β-内酰胺类抗生素残留免疫分析方法进行了综述。

毛细管气相色谱法测定β-内酰胺类抗生素中2-乙基己酸的残留量

目的建立β-内酰胺类抗生素中2-乙基己酸的测定方法。方法采用毛细管气相色谱法。固定相为聚乙二醇的毛细管色谱柱,氢火焰离子化检测器（FID）温度250℃,进样口温度200℃,柱温为程序升温,内标物为3-环己丙酸。结果2-乙基己酸质量浓度在0.301-3.01 g·L^-1内线性关系良好（r=0.9997）。准确度、精密度及耐用性良好,定量限为16.9 ng,9种抗生素回收率均达到94%以上。结论方法简单,结果准确,可用于β-内酰胺类抗生素中2-乙基己酸检测。

牛乳中β-内酰胺类抗生素残留及其降解规律探讨

β-内酰胺类抗生素作为奶牛疾病治疗应用最广泛的药物,其残留带来的危害受到广泛关注。本文综合分析了牛乳中β-内酰胺类抗生素在奶牛临床的应用、残留、降解规律及其危害性,为进一步了解抗生素残留降解产物污染的循环链、污染防控及环境净化提供参考。