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nm23-H_1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中β-catenin表达的影响 被引量:1
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作者 付军科 周清华 +6 位作者 朱文 王艳萍 刘伦旭 陈晓禾 车国卫 聂强 李定彪 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第6期471-474,共4页
目的 探讨nm2 3 H1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中 β catenin和磷酸化β catenin表达水平的影响 ,为阐明nm2 3 H1基因逆转肺癌转移的分子机制提供实验依据。方法 以原代L9981、转染nm 2 3 H1基因的L9981 nm2 3 H1和... 目的 探讨nm2 3 H1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中 β catenin和磷酸化β catenin表达水平的影响 ,为阐明nm2 3 H1基因逆转肺癌转移的分子机制提供实验依据。方法 以原代L9981、转染nm 2 3 H1基因的L9981 nm2 3 H1和转染空载体的L9981 pLXSN三株肺癌细胞株为研究对象 ,应用WesternBlot检测比较各细胞株胞浆、胞核中 β catenin和磷酸化 β catenin表达水平的变化 ,以确定nm 2 3 H1基因转染是否能调控人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中 β catenin和磷酸化 β catenin表达。 结果 ①β catenin在L9981 nm2 3 H1细胞株胞浆中表达量 (IOD) (3 64 9± 118)显著高于L9981(14 0 1± 3 1)和L9981 pLXSN(13 5 0± 5 5 )细胞株 (P <0 .0 0 1) ;②β catenin在L9981 nm 2 3 H1细胞株胞核中表达量 (2 945± 68)与L9981(2 60 4± 2 3 )和L9981 pLXSN(2 65 2± 5 3 )细胞株比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;③磷酸化β catenin在L9981 nm 2 3 H1细胞株胞浆中表达量 (3 12 3± 10 2 )显著低于L9981(4 3 62± 13 1)和L9981 pLXSN (4 5 0 0±117)细胞株 (P <0 .0 0 1) ;④磷酸化 β catenin在L9981 nm2 3 H1细胞株胞核中表达量 (5 13 6± 112 )显著高于L9981(2 666± 116)和L9981 pLXSN(2 展开更多
关键词 人高转移大细胞肺癌细胞株 “肺癌转移抑制级联” L9981 nm-23-h1 基因 Β-CATENIN WNT信号通路
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转染nm23-H_1基因靶向阻断人大细胞肺癌细胞株L9981 Wnt信号传导通路 被引量:4
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作者 付军科 周清华 +6 位作者 朱文 王艳萍 刘伦旭 陈小禾 聂强 李定彪 李印 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第4期294-297,共4页
目的 探讨nm2 3 H1 基因转染靶向阻断人高转移大细胞肺癌细胞株L9981Wnt信号传导通路的可行性 ,为阐明nm2 3 H1 基因调控肺癌转移抑制的分子机制和靶向治疗提供实验依据。方法 以转染nm 2 3 H1 基因的L9981 nm 2 3 H1 、原代L998... 目的 探讨nm2 3 H1 基因转染靶向阻断人高转移大细胞肺癌细胞株L9981Wnt信号传导通路的可行性 ,为阐明nm2 3 H1 基因调控肺癌转移抑制的分子机制和靶向治疗提供实验依据。方法 以转染nm 2 3 H1 基因的L9981 nm 2 3 H1 、原代L9981、空载L9981 pLXSN三株人高转移大细胞肺癌细胞为研究对象 ,应用Westernblot检测比较各株肺癌细胞胞浆、胞核中Wnt信号传导通路关键激酶GSK 3 β和 β 连环蛋白表达的变化。结果 ①GSK 3 β在L9981 nm 2 3 H1 肺癌细胞胞浆中表达量IOD( 63 41± 5 41)显著高于L9981( 373 6± 2 98)和L9981 pLXSN( 3 613± 3 83 ) (P <0 .0 0 1) ;②GSK 3 β在L9981 nm2 3 H1 肺癌细胞胞核中表达量IOD( 4 3 5 6± 490 )显著高于L9981( 65 7± 5 7)和L9981 pLXSN ( 70 5± 75 ) (P <0 .0 0 1) ;③β 连环蛋白在L9981 nm 2 3 H1 肺癌细胞胞浆中表达量IOD( 3 64 9± 118)显著高于L9981( 14 0 1± 3 1)和L9981 pLXSN ( 13 5 0± 5 5 )(P <0 .0 0 1) ;④β 连环蛋白在L9981 nm 2 3 H1 肺癌细胞胞核中表达量IOD( 2 945± 68)与L9981( 2 60 4± 2 3 )和L9981 pLXSN( 2 65 2± 5 3 )比较无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;⑤L9981与L9981 pLXSN两者间GSK 3 β和β 连环蛋白在肺癌细胞胞浆和胞核的? 展开更多
关键词 L9981 nm-23-h1基因 GSK-3Β Β-连环蛋白 Wnt信号通路 分子靶向阻断
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Chitinolyticbacter meiyuanensis SYBC-H1几丁质酶的性质及在虾皮水解中的作用
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作者 郝之奎 蔡宇杰 +4 位作者 廖祥儒 胡明明 张海蓉 李娇阳 邢玉鹏 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期705-710,共6页
以一株产几丁质酶细菌Chitinolyticbacter meiyuanensisSYBC-H1为材料,对几丁质酶进行了分离纯化及酶学性质研究。通过硫酸铵沉淀、DEAE-cellulose阴离子交换介质和SephadexG-100分子筛层析柱处理其所产几丁质酶,获取纯度为95%以上的几... 以一株产几丁质酶细菌Chitinolyticbacter meiyuanensisSYBC-H1为材料,对几丁质酶进行了分离纯化及酶学性质研究。通过硫酸铵沉淀、DEAE-cellulose阴离子交换介质和SephadexG-100分子筛层析柱处理其所产几丁质酶,获取纯度为95%以上的几丁质酶。酶学性质表明,该酶的最适温度为40℃,最适pH值为6.5,在50℃以下较为稳定,在pH值为5.0时最稳定,β-巯基乙醇有利于防止半胱氨酸氧化而增加几丁质酶稳定性,EDTA可增加该酶稳定性,Na+,K+对几丁质酶有明显的激活作用,Zn2+,Mn2+,Fe2+,Fe3+对几丁质酶有较大的抑制作用。SYBC-H1几丁质酶可把虾皮水解为N-乙酰氨基葡萄糖,水解率为21.8%。 展开更多
关键词 几丁质酶 热稳定性 β-巯基乙醇 EDTA Chitinolyticbacter meiyuanensis SYBC-h1
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nm23-H_1基因点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的GSK-3β激酶活性的影响 被引量:3
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作者 马力 周清华 +7 位作者 朱文 朱大兴 杨雪琴 王艳萍 陈小禾 张敏 高利伟 赵颖 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第1期30-34,共5页
背景与目的我们的前期研究结果表明nm23-H1基因的肺癌转移抑制作用可能与上调Wnt信号通路中关键激酶GSK-3β的活性、进而抑制Wnt信号通路相关。本研究的目的是探讨nm23-H1点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中胞质和胞核的GSK-3β... 背景与目的我们的前期研究结果表明nm23-H1基因的肺癌转移抑制作用可能与上调Wnt信号通路中关键激酶GSK-3β的活性、进而抑制Wnt信号通路相关。本研究的目的是探讨nm23-H1点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中胞质和胞核的GSK-3β激酶活性的影响,为阐明nm23-H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依据。方法将原代人低转移大细胞肺癌细胞株NL9980、原代人高转移大细胞肺癌细胞株L9981、空载体转染细胞株L9981-pEGFP、稳定转染nm23-H1基因的细胞株L9981-nm23-H1-pEGFP以及稳定转染在44、96、118、120号位点发生突变后的nm23-H1基因的转基因肺癌细胞株L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1H118F-pEGFP和L9981-nm23-H1S120G-pEGFP作为研究对象,应用免疫共沉淀同位素闪烁计数法测定上述肺癌细胞株胞质和胞核中的GSK-3β激酶活性。结果nm23-H1基因发生点突变后,所有转基因肺癌细胞株细胞胞质和胞核中的GSK-3β活性均较突变前有所下降。L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1H118F-pEGFP、L9981-nm23-H1S120G-pEGFP分别与L9981-nm23-H1-pEGFP比较,胞质与胞核中GSK-3β激酶活性均存在显著性差异(P<0.05),其中L9981-nm23-H1P96S-pEGFP与L9981-nm23-H1-pEGFP胞质中GSK-3β活性存在极显著差异(P<0.01),L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP和L9981-nm23-H1H118F-pEGFP与L9981-nm23-H1-pEGFP的胞核中GSK-3β活性存在极显著差异(P<0.01)。结论①nm23-H1基因突变能显著影响其对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981胞质和胞核中GSK-3β激酶活性的调控作用;②nm23-H1基因可能通过调控L9981中GSK-3β激酶活性来抑制L9981细胞株中Wnt信号传导。 展开更多
关键词 人高转移大细胞肺癌细胞株L9981 NM23-h1 基因 Wnt信号通路 GSK-3Β 点突变
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子宫内膜异位症中nm23-H1和β-catenin基因表达及意义 被引量:1
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作者 王玮 王玥 +3 位作者 段仁杰 曹慧茹 李铁臣 孙青 《皖南医学院学报》 CAS 2019年第2期152-154,共3页
目的:检测β连环蛋白(β-catenin)、nm23-H1在子宫内膜异位症(EMs)患者异位的间质细胞和正常组的间质细胞中的表达情况,研究其表达的差异,探讨nm23-H1和β-catenin在EMs中的作用以及病理机制。方法:收集10例EMs患者的异位病灶(卵巢)和1... 目的:检测β连环蛋白(β-catenin)、nm23-H1在子宫内膜异位症(EMs)患者异位的间质细胞和正常组的间质细胞中的表达情况,研究其表达的差异,探讨nm23-H1和β-catenin在EMs中的作用以及病理机制。方法:收集10例EMs患者的异位病灶(卵巢)和10例正常对照组子宫内膜组织标本,利用分离法,培养原代间质细胞,通过nm23-H1的siRNA的转染试剂作用24~48 h,采用qRT-PCR方法检测两基因在两组中的表达变化。结果:(1)在EMs的间质细胞中,nm23-H1的表达量较正常组降低,而β-catenin的表达量较正常组增高,差异有统计学意义(P<0.05);(2)在EMs组和正常组的间质细胞中,经转染后nm23-H1基因的表达水平均有所减少,β-catenin的表达水平较前均有所增加,两者的变化也有统计学意义(P<0.05)。结论:nm23-H1、β-catenin相互作用调控EMs的发展,β-catenin可能接受nm23-H1基因的调节在子宫内膜异位症中发挥重要作用。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 原代间质细胞培养 Β-连环蛋白 NM23-h1 SIRNA
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胃癌组织中β-catenin及nm23H_1的表达及其临床意义 被引量:7
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作者 王轶淳 孙明军 傅宝玉 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第19期2144-2147,共4页
目的:探讨β-catenin和nm23H1在胃癌组织中的表达及其与侵袭、转移的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测63例胃癌及30例浅表性胃炎组织中β-catenin及nm23H1的表达情况.结果:胃癌组织中β-catenin阳性表达率为49.2%,nm23H1的阳性表达率... 目的:探讨β-catenin和nm23H1在胃癌组织中的表达及其与侵袭、转移的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测63例胃癌及30例浅表性胃炎组织中β-catenin及nm23H1的表达情况.结果:胃癌组织中β-catenin阳性表达率为49.2%,nm23H1的阳性表达率为55.6%,均明显高于浅表性胃炎,而且低分化组及淋巴结转移阳性组β-catenin阳性率明显高于高分化组及淋巴结转移阴性组(63.3%vs33.3%,P<0.05;60.5%vs32.0%,P<0.05),低分化组及淋巴结转移阳性组nm23H1的阳性率明显低于高分化组及淋巴结转移阴性组(40.0%vs73.3%,P<0.01;42.1%vs76.0%,P<0.01).β-catenin的表达与nm23H1的表达呈负相关(r=-0.2698,P<0.05).结论:β-catenin和nm23H1的表达与胃癌的分化程度及淋巴结转移有关,二者在胃癌的侵袭和转移中发挥重要的作用,nm23H1的表达对于Wnt信号通路有一定的抑制作用. 展开更多
关键词 Β-CATENIN NM23H1 胃癌 免疫组织化学
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硫酸酯化酵母β-葡聚糖对H1N1猪流感病毒血凝作用和mRNA转录的影响 被引量:2
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作者 孙英峰 王利丽 +6 位作者 路超 李秀丽 张莉 杨春蕾 冯婧 任卫科 田向学 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期15-18,共4页
为研究硫酸酯化酵母β-葡聚糖对流感病毒血凝抑制作用及对mRNA转录的影响,以猪流感病毒A/tianjin/1/TJ2(H1N1)感染MDCK细胞为模型,采用血凝抑制试验(HI)及SYBR Green Real-time PCR方法,探索硫酸酯化酵母β-葡聚糖对流感病毒血凝抑制作... 为研究硫酸酯化酵母β-葡聚糖对流感病毒血凝抑制作用及对mRNA转录的影响,以猪流感病毒A/tianjin/1/TJ2(H1N1)感染MDCK细胞为模型,采用血凝抑制试验(HI)及SYBR Green Real-time PCR方法,探索硫酸酯化酵母β-葡聚糖对流感病毒血凝抑制作用及其对mRNA转录影响。结果显示,硫酸酯化酵母β-葡聚糖在浓度超过1.25 mg/m L时,能对猪流感病毒血凝产生抑制作用,且在5 mg/m L时对猪流感病毒mRNA转录具有抑制作用。因此,硫酸酯化酵母β-葡聚糖具有抑制流感病毒在MDCK细胞复制的作用,其作用机制可能与抑制流感病毒HA靶点及影响mRNA转录有关。 展开更多
关键词 硫酸酯化酵母β-葡聚糖 H1N1 血凝作用 MRNA转录
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小鼠胚胎干细胞在血管内皮生长因子作用下造血相关基因表达的研究 被引量:9
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作者 李府 沈柏均 +3 位作者 刘星霞 侯怀水 时庆 马秀峰 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期207-209,共3页
目的 研究小鼠胚胎干细胞系ES D3在血管内皮生长因子 (VEGF)的作用下表达造血相关基因的情况。方法 先将ES D3形成拟胚体 ,将拟胚体细胞转入含不同浓度VEGF和VEGF +干细胞因子 (SCF)培养基中。分为VEGF 2 0ng/ml组、VEGF 10ng/ml组、V... 目的 研究小鼠胚胎干细胞系ES D3在血管内皮生长因子 (VEGF)的作用下表达造血相关基因的情况。方法 先将ES D3形成拟胚体 ,将拟胚体细胞转入含不同浓度VEGF和VEGF +干细胞因子 (SCF)培养基中。分为VEGF 2 0ng/ml组、VEGF 10ng/ml组、VEGF 5ng/ml组、VEGF 5ng/ml+SCF组、VEGF 10ng/ml+SCF组、VEGF 2 0ng/ml+SCF组 ;同时设不加因子的自发分化对照组。采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测各组造血转录因子GATA 2和早期造血细胞阶段表达的基因c kit和 β H1表达 ,并进行定量分析。 结果 经 1周诱导培养 ,各实验组均可检测GATA 2表达 ,其中VEGF 2 0ng/ml组和VEGF +SCF组表达较强。未分化胚胎干细胞不表达c kit和 β H1mRNA ,拟胚体细胞开始表达c kit,实验组以VEGF 10ng/ml+SCF组和VEGF 2 0ng/ml +SCF组表达最强。VEGF 10ng/ml组和VEGF 5ng/ml组 ,β H1的表达分别为阴性和弱阳性 ,其他各组可检测到阳性条带 ,以VEGF 10ng/ml +SCF组表达最强 ;而自发分化组未检测到上述mRNA的表达。结论 对造血转录因子和早期造血细胞阶段表达基因的检测可进一步证实胚胎干细胞的成血分化 ,VEGF或VEGF 展开更多
关键词 小鼠 胚胎干细胞 血管内皮生长因子 C-KIT β-h1 造血相关基因 基因表达
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丝氨酸苏氨酸激酶受体相关蛋白在肿瘤发生发展中的作用研究进展 被引量:6
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作者 赵传祥 袁观斗 +1 位作者 陈谦 何松青 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期171-175,共5页
丝氨酸苏氨酸激酶受体相关蛋白(STRAP)由Datta教授最先发现并命名。起初发现STRAP能够与转化生长因子-β(TGF-β)受体和Smads家族蛋白中的Smad7相互作用而负性调节经典的TGF-β信号通路转导。由于Smad依赖的TGF-β信号通路能够抑制... 丝氨酸苏氨酸激酶受体相关蛋白(STRAP)由Datta教授最先发现并命名。起初发现STRAP能够与转化生长因子-β(TGF-β)受体和Smads家族蛋白中的Smad7相互作用而负性调节经典的TGF-β信号通路转导。由于Smad依赖的TGF-β信号通路能够抑制细胞生长,而且许多研究报道STRAP在多肿瘤组织中表达上调,比如结肠癌、肺癌及乳腺癌等。因此,早期的生物学功能研究结果表明STRAP具有促癌基因的特性。随着研究深入,人们发现STRAP作为WD40超家族蛋白成员之一,不仅仅起到促肿瘤生长的作用,而且具有多样化的生物学功能。WD40结构域具有的转角平台结构为STRAP与其他蛋白相互作用提供了作用平台,为STRAP调节多种蛋白的功能提供了结构基础。由于STRAP自身不具有酶活性,使得STRAP调节的生物过程都是通过与其他蛋白相互作用实现的。在本文中我们将对STRAP在肿瘤中的作用研究进展进行系统综述。 展开更多
关键词 丝氨酸苏氨酸激酶受体相关蛋白 转化生长因子-Β Β-连环蛋白 转移抑制因子-h1 凋亡信号调节激酶1 肿瘤形成
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