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β-Ogg1与H-Ras可溶性原核表达纯化及其相互作用的鉴定
1
作者
张星亮
谭建新
《广东医学院学报》
2015年第4期389-393,共5页
目的获得外源表达的可溶性β-Ogg1和H-Ras蛋白并鉴定其相互作用。方法将β-Ogg1、H-Ras基因构建到含有GST标签的p GEx-4T-2-TEV和6*His标签的p ET-28a-TEV原核表达载体上,转化至大肠杆菌BL21(DE3)。采用SDSPAGE检测表达产物,GST介导的Pu...
目的获得外源表达的可溶性β-Ogg1和H-Ras蛋白并鉴定其相互作用。方法将β-Ogg1、H-Ras基因构建到含有GST标签的p GEx-4T-2-TEV和6*His标签的p ET-28a-TEV原核表达载体上,转化至大肠杆菌BL21(DE3)。采用SDSPAGE检测表达产物,GST介导的Pulldown方法鉴定蛋白相互作用。结果成功构建了β-Ogg1和H-Ras基因原核表达载体并转化大肠杆菌。在8-oxo G小分子作用下,β-Ogg1与H-Ras有直接相互作用。结论采用原核表达和亲和层析纯化得到可溶性GST_β-Ogg1(25-424)和6*His_H-Ras融合蛋白,并初步证实β-Ogg1和H-Ras存在直接相互作用。
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关键词
β-ogg1
H-RAS
原核表达
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职称材料
题名
β-Ogg1与H-Ras可溶性原核表达纯化及其相互作用的鉴定
1
作者
张星亮
谭建新
机构
广东医学院附属医院儿科
出处
《广东医学院学报》
2015年第4期389-393,共5页
基金
国家自然科学青年基金(No.31300602)
广东省医学科研基金(No.B2013307)
+1 种基金
广东省博士启动项目(No.S2013040012902)
广东医学院博士启动项目(No.XB1341)
文摘
目的获得外源表达的可溶性β-Ogg1和H-Ras蛋白并鉴定其相互作用。方法将β-Ogg1、H-Ras基因构建到含有GST标签的p GEx-4T-2-TEV和6*His标签的p ET-28a-TEV原核表达载体上,转化至大肠杆菌BL21(DE3)。采用SDSPAGE检测表达产物,GST介导的Pulldown方法鉴定蛋白相互作用。结果成功构建了β-Ogg1和H-Ras基因原核表达载体并转化大肠杆菌。在8-oxo G小分子作用下,β-Ogg1与H-Ras有直接相互作用。结论采用原核表达和亲和层析纯化得到可溶性GST_β-Ogg1(25-424)和6*His_H-Ras融合蛋白,并初步证实β-Ogg1和H-Ras存在直接相互作用。
关键词
β-ogg1
H-RAS
原核表达
Keywords
β-ogg1
H-Ras
prokaryotic expression
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
β-Ogg1与H-Ras可溶性原核表达纯化及其相互作用的鉴定
张星亮
谭建新
《广东医学院学报》
2015
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