一种含SNAP-tag TM底物的硫醇荧光探针

合成了一种同时含α,β-不饱和酮活性位点和SNAP-tag TM底物的香豆素母体探针香豆素-烯酮-苯甲氨基鸟嘌呤(CAKBG).通过测试探针CAKBG的紫外-可见吸收光谱和荧光发射光谱,发现探针CAKBG在极性溶剂(例如,甘油、乙二醇、水、DMSO)中有更长的吸收波长,且探针CAKBG对溶液的pH变化不敏感.此外,光谱实验发现生物硫醇Cys和Hcy均能引起探针CAKBG的最大吸收波长发生蓝移,且当激发波长为405 nm时,Cys和Hcy均能导致探针CAKBG在487 nm处的荧光发射峰明显增强.细胞成像结果表明,含有SNAP-tag TM底物的硫醇荧光探针CAKBG在活细胞中可以对Cys、Hcy进行荧光成像.综上,SNAP-Tag TM蛋白标签技术有望今后在硫醇荧光探针的细胞成像中得到推广应用.

重型β-地中海贫血患儿治疗后心肝脾超声影像指标分析

目的探讨规范化输血和祛铁治疗对重型β-地中海贫血(TM)患儿肝脏、脾脏和心脏超声影像指标的影响。方法选取2020年7月—2021年8月在中国人民解放军联勤保障部队第九二三医院检查的136例广西籍TM患儿,男性78例,女性58例,平均年龄(10.5±6.0)岁。以PHILIPS IU22行肝脾超声检查,分别测量肝脏和脾脏大小,以PHILIPS IU33行心脏超声检查,测量左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)、左室短轴缩短率(FS)、左室射血分数(LVEF)、左心室质量指数(LVMI)等指标,检测血清铁蛋白和血红蛋白浓度,获取输血和祛铁治疗信息,按TM诊疗指南标准分组。结果规范输血和祛铁治疗的TM患者心肝脾超声影像指标明显好于非规范化治疗的患者(P<0.05),且非规范输血治疗的患者LVEF显著降低(P<0.05)。结论规范输血和祛铁治疗的患者肝、脾、心超声影像指标显著优于非规范治疗或部分规范治疗的患者。

去铁胺治疗重型β-地中海贫血患儿的疗效及不良反应分析

目的研究去铁胺(DFO)治疗重型β-地中海贫血患儿持续每天使用的祛铁效果及不良反应。方法 2014年1月至2015年1月于广东省惠州市第一人民医院住院治疗的70例重型β-地中海贫血患者,根据随机数表法分为试验组35例,对照组35例。当血清铁蛋白(SF)>1 000μg/L时开始祛铁,所有患儿均给予DFO治疗,实验组患儿每日持续使用去铁胺,对照组每隔1天使用1次去铁胺。对于患者可能出现的眼部不良反应进行评估及眼科专科检查。连续治疗12个月,每12周进行一次血清血蛋白检查、去铁胺剂量的调整及视力评估。比较给药前后的铁负荷变化及眼部不良反应情况。结果治疗前两组SF、尿铁排泄量(UIE)水平差异均无统计学意义(P>0.05);两组治疗3个月、6个月、9个月及12个月的SF相比,试验组明显低于对照组(t值分别为4.357、6.183、5.146、6.002,均P<0.05);UIE相比,试验组明显高于对照组,且差异均具有统计学意义(t值分别为3.713、4.262、6.113、4.002,均P<0.05)。不良反应情况:治疗组治疗6个月出现3例视力模糊,治疗后12个月其中1例颜色视力受损(色觉障碍),1例视野缺损伴有盲点,1例角膜浊斑,另有5例出现视力下降,无视力丧失情况;不良反应率达22.9%;对照组治疗12个月出现2例视力下降,不良反应率为8.6%,两组眼睛不良反应差异具有统计学意义(χ2=4.20,P<0.05)。结论去铁胺对重型β-地中海贫血患儿的持续治疗优于间歇治疗,并且有显著的祛铁效果,其眼部不良反应较高,需要得到临床医生的注意,适时适当服药或停药,改善患者的生存质量。

β-榄香烯对RNA聚合酶活性的抑制及与DNA的结合

β-榄香烯是中药温莪术中的一种有效成分,它能抑制某些肿瘤的增长。我们的实验表明,β-榄香烯浓度为0.0074mol/L至0.0172mol/L时对RNA聚合酶有明显的抑制作用;加入β-榄香烯后DNA融点下降,吸收光谱移位及荧光强度增加,表明本品与DNA相结合。

β-葡聚糖/柠檬酸喷剂与Optimoist^(TM)治疗口干的临床疗效比较

目的 对比 β-1 ,3葡聚糖 /柠檬酸喷剂与OptimoistTM喷剂对口腔粘膜干燥的临床治疗效果。方法选择 53例由于舍格伦综合征或头颈部放射治疗而导致中度或重度口腔粘膜干燥的患者 ,指导其使用 β -1 ,3葡聚糖 /柠檬酸和β -1 ,3葡聚糖以及OptimoistTM喷剂 ,分别记录首次用药和持续用药两周后不同时间点的口腔主观感觉指标和唾液流率 ,对三种不同制剂的效果进行对比分析。结果 主观感觉指标和测定的唾液流率均显示 ,三种喷剂都能较好地缓解口干症状。患者的总体满意度和首次用药后 1 0分钟的唾液流率 ,OptimoistTM 喷剂优于 β -1 ,3葡聚糖 /柠檬酸喷剂及 β -1 ,3葡聚糖喷剂。结论 β-1 ,3葡聚糖 /柠檬酸喷剂可以缓解口干 ,但其对唾液流率的提高和患者使用后的总体满意度均不及OptimoistTM喷剂 ,β -1 ,3葡聚糖在口干喷剂中的应用尚需进一步研究。

小鼠NGF基因真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

目的 :构建小鼠 β NGF基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH 3T3细胞系中NGF的表达情况。方法 :用基因重组技术 ,将小鼠 β NGF的成熟cDNA序列及其前导序列 ,克隆到真核表达载体 pcDNA3.1+中 ,用限制性内切酶酶切鉴定重组体。利用脂质体FuGENETM6方法 ,转染NIH 3T3细胞。转染后 72h ,用G4 18筛选阳性克隆并培养至 2 0d。对阳性克隆培养上清中NGF的表达用Westernblot分析并观察该上清中NGF对PC12细胞突起生长的作用。结果 :β NGF基因在NIH 3T3细胞中获得表达。阳性克隆培养上清能促进PC12细胞突起生长。结论 :重组真核表达载体 pcDNA3.1+/NGF构建成功 ,NGF蛋白在NIH 3T3细胞中表达 ,并具有良好的生物学活性 。

急性脑血管病患者t-PA、β-TG、TM和TSP含量的初步观察

目的 探讨血液凝固系统有关因子 t- PA、β- TG、TM和 TSP在急性脑血管病发病中的意义。方法 应用 Diagnostica Stago公司试剂盒 ,EL ISA法测定上述因子血清中含量。结果 急性脑梗死和脑出血患者血清中t- PA含量较对照组增高 (P<0 .0 5 ) ,脑出血患者较脑梗死患者有升高倾向 ;β- TG、TM和 TSP含量急性脑梗死和脑出血患者与对照组比无明显差异。结论 t- PA血清含量在急性脑梗死和脑出血患者中均增高 ,两者有否差异及β- TG、TM和 TSP在脑血管病中的作用有待进一步研究。

An efficient fluorination of β-ketosulfones promoted by a room-temperature ionic liquid at ambient conditions under ultrasound irradiation using Selectfluor^(TM) F-TEDA-BF_4

The fluorination reaction involving a β-ketosulfones by Selectfluor^TM was efficiently promoted by the ionic liquid, [Hbim]BF4 （IL） as a reaction medium with methanol as co-solvent at room temperature under ultrasonic irradiation to afford the corresponding mono and difluoro-β-ketosulfones in excellent yields. The advantages of this method include among others the use of a recyclable, non-volatile ionic liquid, which promotes this protocol under room temperature without the requirement of any added catalyst under ultrasonic irradiation.

氧氟沙星对映体的高效毛细管电泳法手性拆分

目的建立氧氟沙星对映体高效毛细管电泳拆分的新方法。方法以三甲基-β-环糊精(TM-β-CD)作为手性添加剂,tris-H3PO4作背景电解质,检测波长为282nm,对运行缓冲溶液的pH值和浓度、TM-β-CD的浓度、分离电压、有机改性剂等因素对分离的影响进行了考察,并对拆分机制进行了初步探讨。结果在运行缓冲液为pH2.5的75mmol/L的tris-H3PO4溶液,30mmol/L的TM-β-CD,操作电压为30kV,柱温为20℃的条件下氧氟沙星对映体达到良好分离,分离度为3.5。结论所建立的高效毛细管电泳方法分析时间短,重复性好,灵敏度高,适用于氧氟沙星对映体的分离。

β-NaYF_(4):Yb^(3+),Tm^(3+)/g-C_(3)N_(4)复合水凝胶材料的制备及其应用

为了有效解决日益严重的水污染问题,本文研究了β-NaYF_(4):Yb^(3+),Tm^(3+)/g-C_(3)N_(4)复合材料的制备及其在可见光下催化降解亚甲基蓝模拟废水的最佳工艺条件。首先,利用溶剂热法合成了β-NaYF_(4):Yb^(3+),Tm^(3+),再将煅烧法制备的g-C_(3)N_(4)加入聚丙烯酸/聚乙烯醇水溶液,后滴入饱和硼酸溶液获得β-NaYF_(4):Yb^(3+),Tm^(3+)/g-C_(3)N_(4)/聚丙烯酸/聚乙烯醇复合水凝胶。利用X射线衍射仪、场发射扫描电子显微镜、紫外-可见分光光度计、热重分析仪、全自动比表面积微孔孔隙分析仪等进行表征;利用正交试验L_(16)(4^(5))考察复合材料的投加量、复合材料的比例、温度、亚甲基蓝溶液的pH、光照时间等因素,探索降解亚甲基蓝的最佳工艺条件。正交试验结果表明:光照时间为20.0h、pH为7.00、复合材料的投加量0.25g、温度20.0℃、复合材料活性组分β-NaYF_(4):Yb^(3+),Tm^(3+)与g-C_(3)N_(4)的比例为1∶4,此时对30.0mg/L亚甲基蓝降解率达到94.84%,循环降解亚甲基蓝模拟废水4次后的降解率仍高达为86.22%。

The effect of low frequency electromagnetic field on plasma β-endorphin in human brain

The effect of electromagnetic field on plasma β endorphin in 30 patients with migraine were studied in the experiment. All subjects received a 20 minute repetitive transcranial magnetic stimulation (Frequency 10Hz, Average intensity 8mT) per time, and the total experiment lasted 20 times. Before and after the experiment, the EEG and plasma β endorphin were tested. The results show that the level of plasma β endorphin in patients blood increased significantly from (73.486±26.002)mg/ml to (116.934±67.592)mg/ml (p<0.01), and the EEG average magnitude of the migraine patients were improved obviously from 41.77μV to 47.42μV.

珠海地区重型β-地中海贫血患儿的生存状况

目的从行政区域范围了解珠海地区重型β-地中海贫血(β-TM)患儿生存状况。方法分析2014年1月至2015年12月广东珠海≤14岁β-TM患儿的治疗依从性、生长发育和器官功能状况以及β-TM年出生人数。结果研究期间珠海共62例,57例(91.9%)依从调查和随访。57例并发症发生率:脾大77.2%,肝大61.4%,生长迟缓59.6%,ALT升高22.8%,亚临床甲状腺功能减退14.0%,左心射血分数降低7.0%,胰岛素抵抗5.3%。不规范输血主要影响脾大和心功能,而不规范祛铁则影响血清铁蛋白、生长发育、ALT、内分泌系统和心功能;血清铁蛋白多数未得到良好控制。22.8%和36.2%患儿不规范输血和祛铁治疗,医保覆盖和知识宣教是首位和次位影响因素。新出生β-TM逐年减少。结论珠海的调查结果在一定程度上反映我国中上发达地区β-TM患儿的生存状况;医疗保障、宣教及规范治疗仍是今后工作的重点。

TM-4000磺丁基醚-β-环糊精包合物的制备及增溶效果研究

目的制备TM-4000磺丁基醚-β-环糊精包合物并考察其增溶效果。方法初步考察磺丁基醚-β-环糊精对TM-4000的增溶效果,并测定不同温度下包合反应的表观稳定常数。通过工艺筛选,确定合理的制备方法和最佳的工艺参数,制备TM-4000的磺丁基醚-β-环糊精包合物,并对其进行表征和溶出度测定。结果在pH为2.0的盐酸溶液中,磺丁基醚-β-环糊精对TM-4000的增溶效果较好,采用饱和溶液法,水浴温度为50℃,转速为60 r·min^(-1),反应时间为6 h,TM-4000和磺丁基醚-β-环糊精的重量比为1∶5时,能够制备出稳定性较好的包合物。TM-4000的磺丁基醚-β-环糊精包合物在pH2.0介质中1h内的累积溶出量可以达到80%。结论以简便可行的方法制备的TM-4000磺丁基醚-β-环糊精包合物能够显著提高TM-4000的溶出水平。

蛋白质自组装条件筛选形成的透明液滴中存在的自组装现象

微-纳尺度的蛋白质自组装体具有形貌多样性与良好的生物相容性,因而成为蛋白质自组装领域的研究热点。以蛋白质结晶条件的筛选手段高通量筛选不同类型蛋白质于不同尺度、不同形貌的自组装过程,是一种新兴的研究方法,具有重要研究意义。利用该方法进行蛋白质自组装条件筛选时,常会形成一些表观透明的液滴,其中是否有自组装现象的发生尚不明确。文中以β-乳球蛋白与蛋白质结晶试剂盒Index^(TM) C10相互作用为例进行探索,实验结果表明透明液滴中存在微-纳尺度的蛋白质自组装体。进一步通过扫描电镜观察不同初始浓度β-乳球蛋白与Index^(TM) C10混合形成的透明液滴中微-纳自组装体的形貌有所差别;通过激光共聚焦显微镜连续拍摄添加荧光标签的β-乳球蛋白形成自组装体的过程,可实时观察到液液相分离现象及最终形成的自组装体的形貌;通过原位X-射线衍射手段,可观察到自组装体内部结构随时间推移逐渐有序化的过程。以上研究表明,在以结晶条件筛选手段为基础的蛋白质自组装条件筛选实验中,透明液滴内的自组装现象具有深入探索的必要和价值。