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大鼠死后脑、心肌和肾组织β-actin mRNA的降解与早期死亡时间的关系 被引量:5
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作者 刘岳霖 马开军 +5 位作者 李文灿 徐红梅 薛爱民 沈忆文 周月琴 赵子琴 《法医学杂志》 CAS CSCD 2011年第1期5-8,共4页
目的研究SD大鼠脑、心肌和肾组织细胞内β-actin mRNA的降解与早期死亡时间的关系,为早期死亡时间的推断寻找新的指标。方法大鼠处死后置于20℃的环境中,分别于死后不同时间点提取脑、心肌、肾的总RNA,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测总... 目的研究SD大鼠脑、心肌和肾组织细胞内β-actin mRNA的降解与早期死亡时间的关系,为早期死亡时间的推断寻找新的指标。方法大鼠处死后置于20℃的环境中,分别于死后不同时间点提取脑、心肌、肾的总RNA,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测总RNA中β-actin mRNA的水平(Ct值),分析死后经过时间与Ct值的线性关系,并建立推断早期死亡时间的线性回归方程。结果随死亡时间的延长,3种组织内β-actin mRNA的水平均发生了显著的下降,心肌和肾组织中β-actin mRNA死后24h内的降解速率更显著,而脑组织中β-actin mRNA的降解速率变化不明显。各组织的Ct值变化与死亡时间之间存在一定的线性关系。结论大鼠死亡早期脑、心肌和肾组织内β-actin mRNA降解明显,可以通过其降解规律来推断早期死亡时间。 展开更多
关键词 法医病理学 聚合酶链反应 心肌 β-actin mrna 死亡时间 大鼠
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实时荧光定量分析SK-N-SH细胞中β-actin mRNA的半衰期 被引量:1
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作者 胡昕 吕建新 《温州医学院学报》 CAS 2006年第4期313-316,共4页
目的:探讨和分析SK-N-SH细胞中β-actinmRNA的半衰期。方法:建立包含β-actin基因片断的pMD-T载体的梯度稀释曲线,应用VIC标记的Taqman-MGB探针进行检测,用Opticon2.02软件分析结果。以不同浓度和不同时间的放线菌素D阻断SK-N-SH细胞转... 目的:探讨和分析SK-N-SH细胞中β-actinmRNA的半衰期。方法:建立包含β-actin基因片断的pMD-T载体的梯度稀释曲线,应用VIC标记的Taqman-MGB探针进行检测,用Opticon2.02软件分析结果。以不同浓度和不同时间的放线菌素D阻断SK-N-SH细胞转录,提取总RNA并予荧光定量RT-PCR检测β-actinmRNA。结果:SK-N-SH细胞中β-actinmRNA的半衰期为4h。与未处理组相比,4h组β-actin的拷贝数差异有显著性(P<0.05),12h和24h组β-actin拷贝数差异有极显著性(P<0.01)。不同浓度之间放线菌素D对β-actin拷贝数的影响差异不大(P>0.05)。结论:应用实时荧光定量RT-PCR,通过比较mRNA与总RNA的拷贝数,建立了一种准确方便地检测mRNA衰减的方法。同时β-actin不适合做放线菌素D处理实验中的内参照。 展开更多
关键词 实时荧光定量 SK-N-SH β-actin mrna 半表期 放线菌素D
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外泌体β-actin mRNA在恶性胸腔积液、结核性胸腔积液鉴别诊断中的应用价值 被引量:4
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作者 农雪萍 黄建华 +1 位作者 冯雅莉 刘翼军 《中国医学创新》 CAS 2019年第29期168-172,共5页
目的:探索外泌体β-actin mRNA作为恶性胸腔积液和结核性胸腔积液鉴别诊断指标的临床价值。方法:收集70例结核性胸腔积液和57例恶性胸腔积液,采用外泌体沉淀试剂沉淀胸腔积液中的外泌体后用Trizol法提取外泌体总RNA,之后通过微滴式数字... 目的:探索外泌体β-actin mRNA作为恶性胸腔积液和结核性胸腔积液鉴别诊断指标的临床价值。方法:收集70例结核性胸腔积液和57例恶性胸腔积液,采用外泌体沉淀试剂沉淀胸腔积液中的外泌体后用Trizol法提取外泌体总RNA,之后通过微滴式数字定量PCR技术检测外泌体中β-actin mRNA的表达。结果:数字定量PCR结果显示,1μg结核性胸腔积液外泌体总RNA中β-actin的拷贝数为75.20(15.15,614.00),1μg恶性胸腔积液外泌体总RNA中β-actin的拷贝数为4.65(1.95,22.40),两组相比差异有统计学意义(P=0.02)。受试者工作特征曲线结果显示,曲线下面积为0.79±0.04(P<0.000 1)。结论:外泌体β-actin mRNA可作为恶性胸腔积液和结核性胸腔积液鉴别诊断的潜在的新指标。 展开更多
关键词 恶性胸腔积液 结核性胸腔积液 外泌体 β-actin mrna
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Human cytomegalovirus induces alteration of β-actin mRNA and microfilaments in human embryo fibroblast cells 被引量:2
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作者 林茂芳 魏国庆 +1 位作者 黄河 蔡真 《Journal of Zhejiang University Science》 CSCD 2004年第6期733-737,共5页
Objective: To investigate the infection of human embryo fibroblast cell line HF cells by CMV as well as the effects of CMV on β-actin mRNA and microfilaments. Methods: HF cells shape was observed after the infection ... Objective: To investigate the infection of human embryo fibroblast cell line HF cells by CMV as well as the effects of CMV on β-actin mRNA and microfilaments. Methods: HF cells shape was observed after the infection of CMV.RT-PCR assay was used to detect the mRNA expression of CMV immediate early (IE) gene, β-actin and GAPDH genes of HF cells infected by CMV. CMV particles and cell microfilaments were detected with electron microscope. Results: Shape of HF cell changed after the infection by CMV. HF cells infected by CMV could express IE mRNA and the expression of β-actin mRNA decreased in a time-and titer-dependent manner compared with the uninfected HF cells whose expression of GAPDH mRNA did not change much. CMV particles were found with electron microscope in the cells. Microfilaments were ruptured and shortened after the infection of CMV. Conclusion: CMV can not only infect human embryo fibroblast cells line HF cells and replicate in the cells, but can also affect the expression of β-actin mRNA and the microfilaments. 展开更多
关键词 CYTOMEGALOVIRUS Human embryo fibroblast cells INFECTION β-actin MICROFILAMENT
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TCT联合HPV E6/E7 mRNA检测对子宫颈癌前早期病变诊断价值的meta分析 被引量:1
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作者 陈君君 郭培培 +4 位作者 路红春 梁宇鸣 沈婧 刘腾 王润洁 《齐齐哈尔医学院学报》 2024年第2期175-182,共8页
目的系统评价液基薄层细胞学检查(thinprep cytologic test,TCT)联合人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6/E7 mRNA检测对子宫颈癌前早期病变的诊断价值。方法计算机检索CNKI、维普数据库(VIP)、万方数据库、中国生物医学文献数据... 目的系统评价液基薄层细胞学检查(thinprep cytologic test,TCT)联合人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6/E7 mRNA检测对子宫颈癌前早期病变的诊断价值。方法计算机检索CNKI、维普数据库(VIP)、万方数据库、中国生物医学文献数据库(CBM)、PubMed、The Cochrane Library、Embase、Science数据库中关于TCT联合HPV E6/E7 mRNA检测诊断子宫颈癌前早期病变的相关文献,检索时限均为建库至2023年1月。由2位评价员按纳入标准和排除标准各自筛选文献、提取资料和评价质量后,应用RevMan 5.3、Stata 15.0、Meta-Disc 1.4统计软件分析TCT联合HPV E6/E7 mRNA检测对子宫颈癌前早期病变的诊断价值,计算诊断敏感性的Spearman相关系数验证阈值效应,进行异质性检验;计算合并敏感性、特异性、阳性似然比和阴性似然比、诊断比值比、SROC曲线下面积。结果共纳入15篇文献,合计6620例患者。Meta分析显示,合并敏感性、特异性、阳性似然比、阴性似然比、诊断比值比均不存在明显异质性(I^(2)=31.6%、14.2%、10.9%、16.7%、17.2%,P=0.1162、0.2947、0.3311、0.2663、0.2610),采用固定效应模型进行统计分析,其结果分别为0.95(95%CI:0.94~0.96)、0.87(95%CI:0.86~0.88)、6.86(95%CI:6.26~7.51)、0.06(95%CI:0.05~0.07)、113.23(95%CI:86.44~148.31)。SROC曲线下面积为0.9414。结论TCT联合HPV E6/E7 mRNA检测对诊断子宫颈癌前早期病变有重要价值。 展开更多
关键词 TCT HPV E6/E7 mrna 子宫颈癌前早期病变 诊断
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预防传染病mRNA疫苗原材料、原液质控要点分析
6
作者 孙巍 佟乐 +2 位作者 杨亚莉 王一平 杨振 《中国药事》 CAS 2024年第2期184-188,共5页
目的:梳理归纳预防传染病mRNA疫苗原材料和原液质控要点,为我国此类产品质量控制提供参考。方法:通过梳理世界卫生组织及相关标准和审评机构关于预防传染病mRNA疫苗原材料、原液质控指导文件,以及相关监管指南和文献,总结归纳预防传染病... 目的:梳理归纳预防传染病mRNA疫苗原材料和原液质控要点,为我国此类产品质量控制提供参考。方法:通过梳理世界卫生组织及相关标准和审评机构关于预防传染病mRNA疫苗原材料、原液质控指导文件,以及相关监管指南和文献,总结归纳预防传染病mRNA疫苗原材料和原液关键质量控制属性及相关要求。结果与结论:作为新型生物制品,mRNA疫苗核酸结构和脂质体包裹制剂的特性决定了该类疫苗质控特点,序列和完整性、含量及纯度、加帽率和包封率是mRNA疫苗特有的、决定有效性和安全性的关键质量参数。从原材料和原液制备阶段就建立多个与mRNA特性相关的质控要点及其检测方法,将有助于保障预防传染病mRNA疫苗安全有效、质量可控。 展开更多
关键词 预防传染病 mrna疫苗 世界卫生组织 质量控制 要点分析
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动物mRNA疫苗生产厂房布局与工艺设计要点探究
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作者 刘业兵 吴涛 +3 位作者 夏应菊 陈紫昱 李佳昕 张存帅 《中国兽药杂志》 2024年第2期71-80,共10页
mRNA疫苗技术具备研发周期短、安全性优良、生产技术通用性强的特点,但由于mRNA疫苗的特殊工艺,传统的生物制品厂房设计已不能完全满足其制备要求。科学合理的厂房工艺设计是确保mRNA疫苗产能与质量的主要条件,因此,如何设计既符合工艺... mRNA疫苗技术具备研发周期短、安全性优良、生产技术通用性强的特点,但由于mRNA疫苗的特殊工艺,传统的生物制品厂房设计已不能完全满足其制备要求。科学合理的厂房工艺设计是确保mRNA疫苗产能与质量的主要条件,因此,如何设计既符合工艺要求又满足兽药GMP的动物mRNA疫苗生产厂房成为摆在我们面前急需探究的课题。鉴于不同国家在能源结构、环保要求、设计理念等方面存在差异,在借鉴欧美已有的mRNA疫苗规模化生产设施和我国人用mRNA疫苗厂房设计的基础上,提出了符合我国兽药GMP规范的mRNA疫苗厂房生产设施、工艺关键点和设计方案,以期为国内动物mRNA疫苗车间建设提供参考。 展开更多
关键词 动物 mrna疫苗 生产设施 工艺设计 GMP
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HPV E6/E7 mRNA联合细胞学检查用于子宫颈癌早期筛查的初步评价
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作者 陈琼 涂媛 章培 《西部医学》 2024年第5期755-759,共5页
目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA联合液基薄层细胞学检查(TCT)用于宫颈癌早期筛查的初步评价。方法收集2015年10月—2019年7月在本院进行宫颈癌筛查患者825例,均进行HPV E6/E7 mRNA、TCT检测,以组织病理学为金标准,分析HPV E6/E7 m... 目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA联合液基薄层细胞学检查(TCT)用于宫颈癌早期筛查的初步评价。方法收集2015年10月—2019年7月在本院进行宫颈癌筛查患者825例,均进行HPV E6/E7 mRNA、TCT检测,以组织病理学为金标准,分析HPV E6/E7 mRNA与TCT联合检测用于评估患者宫颈病变风险的诊断效能。结果HPV E6/E7 mRNA检测和TCT检测不同病理分级患者宫颈慢性炎、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)、宫颈癌的阳性率分别为12.17%、39.04%、86.61%、87.88%和36.51%、82.89%、82.14%、81.82%。HPV E6/E7 mRNA检测的敏感性为86.90%,特异性为80.44%,准确性为81.58%。TCT检测的敏感性为82.07%,特异性为50.74%,准确性为56.24%。HPV E6/E7 mRNA联合TCT检测的敏感性为70.34%,特异性为83.68%,准确性为81.33%。HPV E6/E7 mRNA与TCT联合检测特异性高于单一检测,差异有统计学意义(P<0.001)。HPV E6/E7 mRNA与TCT两种检测方法的受试者工作特征曲线(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.837和0.664,两者联合检测的AUC为0.860,差异性显著(P<0.001),提示联合诊断可提高诊断宫颈HSIL的性能。结论HPV E6/E7 mRNA联合TCT能够更好预测宫颈病变的进展,且针对高级别病变的筛查具有更高的特异性,可为临床宫颈癌筛查提供参考。 展开更多
关键词 宫颈癌 筛查 人乳头瘤病毒 E6/E7 mrna 液基薄层细胞学检查
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TLR9 mRNA在巨细胞病毒感染儿童外周血中的表达
9
作者 张双红 胡清华 +3 位作者 李璟 康春枝 吴蔚 罗丽娟 《云南医药》 CAS 2024年第3期40-43,共4页
目的 探讨HCMV感染患儿外周血中TLR9 mRNA的表达。方法 选择2019年1月-2019年12月江西省儿童医院收治HCMV感染88例为研究对象,其中未给予更昔洛韦治疗23例为治疗前组,给予更昔洛韦治疗27例为治疗后组;同期未感染HCMV健康儿童38例为正常... 目的 探讨HCMV感染患儿外周血中TLR9 mRNA的表达。方法 选择2019年1月-2019年12月江西省儿童医院收治HCMV感染88例为研究对象,其中未给予更昔洛韦治疗23例为治疗前组,给予更昔洛韦治疗27例为治疗后组;同期未感染HCMV健康儿童38例为正常组。采用RT-PCR检测TLR9 mRNA表达,以2^(-△△Ct)方法对mRNA表达进行相对定量,对比分析各组指标的变化。结果 HCMV感染组和正常组外周血中TLR9 mRNA表达量平均值分别为1.986±0.306和3.001±0.543,2组间差异无统计学意义(t=1.724,P=0.088)。HCMV感染治疗前组和治疗后组外周血中TLR9 mRNA表达量平均值分别为1.778±0.312和2.163±0.504,2组间差异无统计学意义(t=0.624,P=0.536)。结论 TLR9 mRNA在HCMV感染儿童外周血中的表达降低,但其表达水平与不同治疗时期无相关性。 展开更多
关键词 儿童 巨细胞病毒 TLR9 mrna 外周血
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参芪复方对糖尿病GK大鼠肝脏组织mRNA、lncRNA表达谱的影响
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作者 刘桠 张翕宇 +2 位作者 谢春光 徐刚 彭思涵 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第1期46-51,I0008-I0012,共11页
目的应用全转录组测序与实时聚合酶链锁反应(Real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术,探索参芪复方调控糖尿病GK大鼠肝脏信使RNA(messenger RNA,mRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)表达谱的机制研究。方法采... 目的应用全转录组测序与实时聚合酶链锁反应(Real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术,探索参芪复方调控糖尿病GK大鼠肝脏信使RNA(messenger RNA,mRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)表达谱的机制研究。方法采用高脂高糖饲料建立2型糖尿病模型,将GK大鼠随机分为模型组、参芪复方组和西药组。另将10只Wistar大鼠设为空白组,予普通饲料喂养。参芪复方组大鼠予参芪复方浸膏灌胃,西药组予西格列汀混悬液灌胃,模型组及空白组灌服生理盐水。干预12周,每周检测空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)。运用HE染色法观察大鼠肝脏组织病理形态,在空白组、模型组和参芪复方组中每组随机选取4只大鼠进行全转录组测序,构建mRNA、lncRNA差异表达谱,分析差异基因生物学功能,并进行RT-qPCR验证。结果与空白组相比,糖尿病GK大鼠FBG显著升高(P<0.05),模型组大鼠肝脏可见肝细胞排列紊乱,边界模糊,出现弥漫空泡状改变,呈中度脂肪变性,伴见炎性浸润、弥漫水肿;与模型组相比,参芪复方组大鼠FBG在12周时明显降低(P<0.05),肝脏组织排列较整齐,脂质沉积、细胞水肿及炎细胞浸润明显减轻。全转录组结果显示,与空白组相比,模型组大鼠mRNA、lncRNA表达谱存在显著差异,决定了糖尿病大鼠生理病理上的差异表现。参芪复方可广泛调控mRNA、lncRNA的差异表达,富集分析显示参芪复方通过调控多条内分泌系统及代谢过程相关信号通路改善糖尿病,包括胰岛素分泌、非酒精性脂肪性肝病、胆固醇代谢、鞘脂代谢、胰岛素抵抗等信号通路。RT-qPCR结果显示,基因Irf1、Trim30、Tmcc3、Insig1与转录组结果一致,转录组准确性较高。结论参芪复方发挥调节血糖及改善肝脏脂质沉积、水肿的作用,可能与广泛调控mRNA、lncRNA的差异表达有关。 展开更多
关键词 参芪复方 2型糖尿病 长链非编码RNA(lncRNA) 信使RNA(mrna)
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假尿苷修饰体外转录mRNA在翻译过程中发生的+1核糖体框架移码
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作者 于永利 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期269-273,共5页
为应对世界范围内的COVID-19疫情,假尿苷(Ψ)修饰的体外转录mRNA(Ψ-IVT-mRNA)被授权应用于SARS-Cov-2 mRNA疫苗。最近,Ψ-IVT-mRNA被发现在翻译蛋白质时发生核糖体“滞顿”,导致+1核糖体移码,在体外和体内翻译出异常的蛋白质。在接种SA... 为应对世界范围内的COVID-19疫情,假尿苷(Ψ)修饰的体外转录mRNA(Ψ-IVT-mRNA)被授权应用于SARS-Cov-2 mRNA疫苗。最近,Ψ-IVT-mRNA被发现在翻译蛋白质时发生核糖体“滞顿”,导致+1核糖体移码,在体外和体内翻译出异常的蛋白质。在接种SARS-Cov-2 mRNA疫苗的人群,这种异常蛋白可能激发脱靶T细胞反应或抗体反应或产生其它意想不到的副作用。这一发现对研制有效“安全”的mRNA疫苗/药物有“警示”和指导意义。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2疫苗 体外转录mrna 假尿苷修饰 核糖体框架移码
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人乳头瘤病毒DNA、E6/E7 mRNA及液基薄层细胞学检查对女性宫颈癌的筛查价值
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作者 刘德美 董晓彤 +4 位作者 柳林 李秀凤 王慧 陈国华 张云香 《癌症进展》 2024年第13期1451-1455,1469,共6页
目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA、E6/E7 mRNA及液基薄层细胞学检查(TCT)对女性宫颈癌的筛查价值。方法选取28021例体检女性,均接受HPV DNA、E6/E7 mRNA和TCT单项或多项检测,记录HPV DNA、E6/E7 mRNA、TCT单独及联合检测对宫颈癌的检出情... 目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA、E6/E7 mRNA及液基薄层细胞学检查(TCT)对女性宫颈癌的筛查价值。方法选取28021例体检女性,均接受HPV DNA、E6/E7 mRNA和TCT单项或多项检测,记录HPV DNA、E6/E7 mRNA、TCT单独及联合检测对宫颈癌的检出情况。以组织活检结果为金标准,评估HPV DNA、E6/E7 mRNA、TCT单独或联合检测对宫颈癌的筛查价值。结果TCT、HPV DNA、E6/E7 mRNA对宫颈癌的检出率分别为8.8%、26.9%、29.7%。各方法单独检测时,TCT单独检测筛查宫颈癌的特异度最高(85.53%),但灵敏度最低(28.44%),HPV DNA单独检测筛查宫颈癌的灵敏度最高(60.25%)。两种方法联合检测时,HPV DNA+E6/E7 mRNA联合检测筛查宫颈癌的灵敏度最高(81.75%),特异度最低(26.34%),TCT+HPV DNA联合检测筛查宫颈癌的特异度(61.08%)和阴性预测值(57.11%)最高,任意两种方法联合检测筛查宫颈癌的灵敏度、特异度比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。TCT+HPV DNA+E6/E7 mRNA联合检测筛查宫颈癌的灵敏度、特异度与HPV DNA+E6/E7 mRNA检测比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05),但灵敏度高于TCT+E6/E7 mRNA联合检测,特异度低于TCT+E6/E7 mRNA联合检测,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论HPV DNA检测适合作为女性健康体检者宫颈癌筛查的首选方法,E6/E7 mRNA与TCT检测可作为宫颈癌进一步检查的优选。HPV DNA+E6/E7 mRNA联合检测具有较高的灵敏度和阳性预测值,可作为年轻女性宫颈癌筛查的优选方案,联合检测对提高阳性率及降低假阳性率有帮助。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒DNA E6/E7 mrna 液基薄层细胞学检查 宫颈癌 人乳头瘤病毒
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山东省滨州市不同年龄女性HPV高危型感染率及E6/E7 mRNA表达情况分析
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作者 李娜 杨田田 +1 位作者 司秀文 张海涛 《现代医药卫生》 2024年第22期3815-3820,共6页
目的探讨山东省滨州市不同年龄妇女人乳头瘤病毒(HPV)高危型感染率及HPV E6/E7 mRNA表达情况。方法选取2022年1-10月在该院妇产科就诊行HPV-DNA分型检测的女性患者10887例。按年龄分组(<30岁组2180例,30~<40岁组3222例,40~<50... 目的探讨山东省滨州市不同年龄妇女人乳头瘤病毒(HPV)高危型感染率及HPV E6/E7 mRNA表达情况。方法选取2022年1-10月在该院妇产科就诊行HPV-DNA分型检测的女性患者10887例。按年龄分组(<30岁组2180例,30~<40岁组3222例,40~<50岁组3438例,≥50岁组2047例)并统计HPV-DNA分型检测结果。在入选患者中分层随机选取HPV-DNA 16型阳性女性患者250例,各年龄组50例,统计其HPV E6/E7 mRNA检测结果,比较不同年龄组女性患者HPV-DNA分型及HPV E6/E7 mRNA表达的差异。结果10887例女性患者中阳性1666例,感染率为15.3%,其中高危型阳性1393例,占83.6%(1393/1666),低危型感染273例,占16.4%(273/1666)。HPV高危型阳性分布排前5位者依次为HPV 16、52、58、33、18型。不同年龄组女性患者感染率不同,HPV感染年龄分布曲线呈“V”形。不同年龄HPV-DNA 16型阳性女性患者HPV E6/E7 mRNA阳性率不同,40~<50岁组、≥50岁组女性患者HPV E6/E7 mRNA阳性率均高于30~<40岁组,差异均有统计学意义(P<0.05)。HPV-58型E6/E7 mRNA阳性率、拷贝值均高于HPV 16、18、52型,差异均有统计学意义(P<0.05)。HPV高危型混合感染与单一感染E6/E7 mRNA表达存在差异。结论通过开展HPV-DNA筛查工作及研究了解本地区HPV亚型的分布具有非常重要的价值。年轻妇女和围绝经期及以上妇女HPV感染风险较高。随年龄增加HPV 16型感染人群中HPV E6/E7 mRN阳性率逐渐升高,即发生宫颈病变的风险增加。不同HPV高危型感染E6/E7 mRNA阳性率、拷贝值均存在差异,且HPV高危型混合感染者E6/E7 mRNA阳性率、拷贝值均高于单一感染者。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 HPV-DNA 高危型感染 E6/E7 mrna 宫颈病变 山东
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p16/Ki-67双染检测、HPVE6/E7mRNA检测在宫颈病变诊断中的价值研究
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作者 彭海兰 梁土玉 +1 位作者 黄之文 李德峰 《黑龙江医药》 CAS 2024年第1期41-44,共4页
目的:探讨p16/Ki-67双染检测、HPVE6/E7mRNA检测在宫颈病变诊断中的价值。方法:选择2021年4月至2023年2月我院收治的605例高危型HPV阳性患者为研究对象,所有患者入院后均进行阴道镜检查与病理活检,取患者细胞学样本分别进行p16/Ki-67双... 目的:探讨p16/Ki-67双染检测、HPVE6/E7mRNA检测在宫颈病变诊断中的价值。方法:选择2021年4月至2023年2月我院收治的605例高危型HPV阳性患者为研究对象,所有患者入院后均进行阴道镜检查与病理活检,取患者细胞学样本分别进行p16/Ki-67双染检测、HPVE6/E7mRNA检测。比较两种方法单独检查与联合检测对宫颈病变阳性检出率的差异;比较三种检查方法对宫颈病变诊断效能的差异。结果:联合检测检出CIN1~3阳性率均高于p16/Ki-67双标记、HPVE6/E7mRNA检测(P<0.05);三种检测方式的浸润癌阳性检出率比较无明显差异(P>0.05)。Kappa检验分析结果显示,p16/Ki-67双标记与HPVE6/E7mRNA检查结果与病理诊断结果具有较好的一致性(Kappa值=0.719,P<0.05);联合检测结果与病理诊断结果具有高度的一致性(Kappa值=0.894,P<0.05)。联合检测对宫颈病变的诊断灵敏度、特异性与准确率高于p16/Ki-67双标记与HPVE6/E7mRNA检查(P<0.05)。结论:p16Ki-67双染与HPVE6/E7mRNA联合检测可准确检出宫颈病变程度,对宫颈病变疾病类型的鉴别可提供充足可靠的数据支持,联合检查的诊断效能较好,对患者后续相关治疗开展有积极指导意义。 展开更多
关键词 p16/Ki-67双标记 HHPVE6/E7mrna 宫颈病变 鉴别诊断 人乳头瘤病毒
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mRNA治疗用纳米载体研究新进展 被引量:1
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作者 石立旺 张楠 +3 位作者 祝纶宇 王颖 郭敏 杜超 《中国医药生物技术》 2024年第1期45-51,56,共8页
mRNA是一种单链核糖核酸,由一条DNA转录而成,携带蛋白质合成的编码信息,进一步转录并加工成功能蛋白。在基因工程的协同下,合成的mRNA在结构上类似于天然mRNA,使患者能够在自己的身体中产生治疗性蛋白质,从而达到预防或治疗疾病的目的。... mRNA是一种单链核糖核酸,由一条DNA转录而成,携带蛋白质合成的编码信息,进一步转录并加工成功能蛋白。在基因工程的协同下,合成的mRNA在结构上类似于天然mRNA,使患者能够在自己的身体中产生治疗性蛋白质,从而达到预防或治疗疾病的目的。mRNA治疗避免了其遗传物质整合宿主基因组的风险,也不需要进入细胞核进行转染,它甚至可以在不分裂的细胞中表达。因此,基于mRNA的基因疗法成为极具潜力的临床治疗手段。高效、安全地递送mRNA是其临床应用的两个主要制约因素。目前虽然已有很多报道通过修饰mRNA的结构来提高其稳定性和耐受性,但mRNA的递送效果仍然有待提高。近年来,纳米生物技术取得的重大进展为mRNA纳米载体开发提供了技术支撑。纳米载体能够克服递送过程中的生理障碍,使mRNA到达目标部位。本文介绍了纳米给药系统的设计原则和研究热点。重点聚焦新兴纳米载体在mRNA传递中发挥的作用以及在递送功能研究方面的最新进展;最后,对mRNA的纳米载体递送技术发展前景进行了展望。 展开更多
关键词 外泌体 基因治疗 mrna递送 纳米载体
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肿瘤mRNA疫苗及其递送载体在抗肿瘤免疫治疗中的研究进展 被引量:1
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作者 辛美仪 林玉红 赵凯 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期509-516,共8页
由于传统抗肿瘤手段在临床应用中具有特异度低、不良反应大的缺点,新型的抗肿瘤免疫疗法受到关注并逐渐得以应用。肿瘤免疫疗法通过调节机体免疫系统,增强抗肿瘤免疫应答以实现对肿瘤的控制和杀伤。肿瘤免疫疗法包括免疫检查点阻断疗法... 由于传统抗肿瘤手段在临床应用中具有特异度低、不良反应大的缺点,新型的抗肿瘤免疫疗法受到关注并逐渐得以应用。肿瘤免疫疗法通过调节机体免疫系统,增强抗肿瘤免疫应答以实现对肿瘤的控制和杀伤。肿瘤免疫疗法包括免疫检查点阻断疗法、过继细胞免疫治疗和肿瘤疫苗。其中,肿瘤疫苗通过递送肿瘤细胞特异性抗原刺激免疫系统产生特异性免疫细胞或抗体从而消除肿瘤细胞以达到治疗肿瘤的目的。近年来,mRNA疫苗相关领域迅速发展,所需的mRNA在合成及制备方面的工艺日趋成熟,为肿瘤mRNA疫苗的研究奠定了良好的基础。因mRNA具有易被降解、无法自主进入细胞等特点,此类疫苗需要合适的递送载体才能成功地被细胞摄取并发挥功效。因此,mRNA疫苗递送系统的发展成为其能否被更好地利用的关键,这也是在肿瘤治疗领域里mRNA疫苗能否被开发利用至临床阶段的重要一环。本文简要介绍肿瘤的免疫治疗方法、肿瘤疫苗种类和肿瘤mRNA疫苗的作用机制及制备方法,介绍用于肿瘤治疗的免疫疗法中mRNA疫苗及其常见的递送系统的研究进展和相关应用,并对进入临床试验阶段的肿瘤mRNA疫苗进行归纳和整理,以期为今后针对肿瘤的mRNA疫苗的研究工作提供帮助。 展开更多
关键词 mrna疫苗 递送系统 抗肿瘤治疗 免疫治疗
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HSV-1即刻早期基因的5′UTR对报告基因mRNA翻译的影响
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作者 徐朗希 李丹丹 +7 位作者 李恒 郑惠文 彭沙沙 张莹 于丽 廖芸 刘龙丁 李琦涵 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期980-992,共13页
mRNA疫苗的5′非翻译区(5’untranslated regions,5′UTR)对其表达起着重要作用,报告基因增强绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)用于检测5′UTR调控mRNA表达已经是一个较为成熟的实验方法.为研究单纯疱疹病毒1... mRNA疫苗的5′非翻译区(5’untranslated regions,5′UTR)对其表达起着重要作用,报告基因增强绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)用于检测5′UTR调控mRNA表达已经是一个较为成熟的实验方法.为研究单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus 1,HSV-1)即刻早期基因的5′UTR作为报告基因EGFP mRNA的5′UTR对其翻译的影响,本研究将4个即刻早期基因的5’UTR以及表达能力较强的人β珠蛋白基因(humanβGlobin,hBg)5′UTR插入报告基因EGFP 5’端,通过观察绿色荧光强度研究不同即刻早期基因5′UTR对mRNA翻译的影响.结果表明:经mRNA转染试剂和纳米脂质体颗粒分别递送进293T细胞和小鼠体内;RL2的5′UTR作为报告基因EGFP 5′UTR的表达水平与hBg 5′UTR相近,RS1、US1、US12表达水平明显弱于hBg 5′UTR.因此,RL2基因的5′UTR有潜力作为mRNA疫苗的5′UTR. 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒1型 5′UTR mrna 蛋白表达水平
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冠心病血清外泌体介导的lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA调控网络研究及潜在靶向中药预测及实验验证
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作者 马露 杨雷 +8 位作者 丁煌 李菀榆 谭维 李艳玲 张燕燕 刘晓丹 曾昭文 邓常清 张伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1153-1164,共12页
目的本研究采用生物信息学相关方法对冠心病(coronary heart disease,CHD)患者和正常人的血清外泌体测序数据分析,构建出竞争性内源性lncRNA-miRNA-mRNA(ceRNA)调控网络,并挖掘预测潜在的中药,并对ceRNA网络涉及的生物学过程和核心中药... 目的本研究采用生物信息学相关方法对冠心病(coronary heart disease,CHD)患者和正常人的血清外泌体测序数据分析,构建出竞争性内源性lncRNA-miRNA-mRNA(ceRNA)调控网络,并挖掘预测潜在的中药,并对ceRNA网络涉及的生物学过程和核心中药进行初步验证。方法利用exoRbase数据库获得差异基因的表达矩阵,结合生信方法构建ceRNA网络,并对网络中的差异的mRNA进行GO分析和KEGG分析,利用COREMINE数据库对ceRNA网络涉及的生物学过程及核心靶基因进行预测,筛选具有潜在治疗作用的中药;体外构建AVECs氧化损伤细胞模型,检测细胞骨架、成管功能、细胞增殖、LDH漏出率、ROS水平以及p-AKT、AKT、p-PI3K、PI3K蛋白表达情况,验证核心中药丹参治疗CHD的作用通路及靶点。结果与正常人比,CHD血清外泌体存在395个mRNA,80个miRNA,60个lncRNA差异基因,预测出80个miRNA,所构建ceRNA子网络,主要由21个lncRNA、80个miRNA、82个mRNA组成;AKT1、VEGFA、IL-1β等基因在网络中处于核心地位,异常表达的mRNA涉及细胞的氧化应激反应等生物学过程和PI3K/Akt等信号通路,丹参、川芎、三七等与CHD外泌体介导的生物学过程和核心基因最为密切;药物主要归属于补虚类、清热类和活血化瘀类,五味大多数归属于苦、甘和辛类,归经多集聚于心、肝、肾经;核心中药丹参的有效成分丹参酮IIA可以促进血管内皮细胞增殖、成管、骨架形成及修复,降低细胞LDH漏出率及ROS水平,促进p-AKT、p-PI3K蛋白的表达。结论CHD血清外泌体存在复杂的ceRNA调控网络转导,中药可通过多靶点干预治疗,丹参、川芎、三七等有望成为候选中药来源,其中丹参有效成分丹参酮IIA激活PI3K/Akt信号通路发挥对氧化应激损伤细胞的保护作用,治疗CHD。 展开更多
关键词 冠心病 血清外泌体 ceRNA lncRNA MIRNA mrna 丹参酮IIA
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mRNA疫苗递送系统研究进展
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作者 李紫薇 张磊 +10 位作者 陈峰 郑辉 崔进 曹振山 张慧 戈胜强 魏荣 刘拂晓 南福龙 沙洲 尼博 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4932-4942,共11页
与传统疫苗相比,mRNA疫苗具有易于编译、免疫原性高、安全性强、生产成本低等优点,而将mRNA高效递送至细胞并成功表达,是mRNA疫苗发挥作用的关键环节,也是mRNA疫苗研发的主要瓶颈与痛点。因此筛选经济高效的核酸递送系统对于mRNA疫苗研... 与传统疫苗相比,mRNA疫苗具有易于编译、免疫原性高、安全性强、生产成本低等优点,而将mRNA高效递送至细胞并成功表达,是mRNA疫苗发挥作用的关键环节,也是mRNA疫苗研发的主要瓶颈与痛点。因此筛选经济高效的核酸递送系统对于mRNA疫苗研发至关重要。目前,关注较多的核酸递送系统主要包括物理递送、纳米脂质体递送、聚合物递送、外泌体递送和阳离子乳剂递送等。物理递送主要是通过物理方法使裸mRNA直接穿过细胞膜进入细胞,纳米脂质体、聚合物、外泌体和阳离子乳剂等是以自身作为递送载体保护mRNA,从而提高递送效率、减少免疫反应。笔者基于mRNA疫苗最新研究进展,总结概述了不同递送方法的应用前景和局限性,并对其研究前景进行展望,以期为新型递送系统研发提供理论基础,促进mRNA疗法的临床应用,为更多疾病的预防和治疗提供新的mRNA疫苗解决方案。 展开更多
关键词 mrna疫苗 递送系统 物理递送 纳米脂质体 聚合物
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不同日龄白羽王鸽胸肌中lncRNA和mRNA功能分析
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作者 张弛 刘超 +5 位作者 王一曼 苗冬枝 陈静 王莹 杨海明 王志跃 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1827-1836,共10页
【目的】分析不同日龄乳鸽胸肌发育的差异长链非编码RNA(lncRNA)和mRNA,确定影响乳鸽生长发育的关键候选基因,探究乳鸽生长发育的分子机制,为促进乳鸽生长发育的研究提供理论基础。【方法】乳鸽于1(D1)、7(D7)、14(D14)和25(D25)日龄分... 【目的】分析不同日龄乳鸽胸肌发育的差异长链非编码RNA(lncRNA)和mRNA,确定影响乳鸽生长发育的关键候选基因,探究乳鸽生长发育的分子机制,为促进乳鸽生长发育的研究提供理论基础。【方法】乳鸽于1(D1)、7(D7)、14(D14)和25(D25)日龄分别称重,随后在D7和D25时进行屠宰,利用RNA-Seq技术对所选日龄白羽王鸽胸肌的lncRNA进行测序并预测其靶基因,构建lncRNA-mRNA互作网络,对筛选的差异表达lncRNA进行GO功能和KEGG通路富集分析,并利用实时荧光定量PCR验证测序结果的可靠性。【结果】乳鸽于7~14日龄日增重最快,25日龄乳鸽体重到达上市日龄。从构建的6个文库中共获得56421个lncRNAs和30208个mRNAs,其中2335个lncRNAs差异表达,靶向1553个mRNAs。lncRNA-mRNA调控网络显示,lncRNA与mRNA间存在相互调控。GO与KEGG分析结果显示,差异基因与GTpase活性等相关,差异lncRNAs及其靶基因主要富集在MAPK信号通路、骨骼肌组织发育、TGF-β信号通路、Notch信号通路等信号通路,关键lncRNAs可能通过这些信号通路调控乳鸽胸肌发育。其中LTCONS_00012834、LTCONS_00032767、LTCONS_00045211和LTCONS_00002003分别靶向XIRP 1、PITX 3、BMPR 1 B、MYLK 4基因,发挥关键作用。实时荧光定量结果与高通量测序结果趋势一致,说明测序数据的可靠性。【结论】本研究共获得了2335个差异表达lncRNAs和1553个mRNAs,4个差异表达lncRNAs:LTCONS_00032767、LTCONS_00012834、LTCONS_00002003、LTCONS_00045211分别靶向与骨骼肌发育相关基因PITX 3、XIRP 1、MYLK 4和BMPR 1 B,且这些基因受到多个lncRNA的调控。结果为阐明乳鸽胸肌生长发育的分子机制以及白羽王鸽的分子选育提供了理论基础。 展开更多
关键词 白羽王鸽 胸肌 长链非编码RNA mrna
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