目的探讨头框转录因子O家族4(class O of forkhead box transcriptionfactor 4,FOXO4)对喉癌细胞增殖凋亡能力的影响。方法应用Western blot法检测喉癌组织及对应癌旁组织中FOXO4的表达水平。细胞转染FOXO4过表达载体(p-EGFP-C1/FOXO4组...目的探讨头框转录因子O家族4(class O of forkhead box transcriptionfactor 4,FOXO4)对喉癌细胞增殖凋亡能力的影响。方法应用Western blot法检测喉癌组织及对应癌旁组织中FOXO4的表达水平。细胞转染FOXO4过表达载体(p-EGFP-C1/FOXO4组)和空载体(p-EGFP-C1组),同时设置未转染组,未转染组中只加入转染试剂。Western blot法检测转染后细胞中FOXO4蛋白水平。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Caspase-3、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved Caspase-9)、Caspase-9、β-连环蛋白(β-catenin)、Wnt1表达水平。用Wnt/β-catenin信号通路激活剂作用于转染p-EGFP-C1/FOXO4后的喉癌细胞(激活剂组),检测细胞增殖、凋亡情况。结果 FOXO4在喉癌组织中表达水平明显低于癌旁组织(P=0.000)。p-EGFP-C1/FOXO4组细胞中FOXO4表达水平明显高于未转染组(P=0.000)。p-EGFP-C1/FOXO4组细胞存活率及β-catenin、Wnt1水平明显低于未转染组(P=0.002,P=0.004,P=0.006),细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3、Caspase-3、Cleaved Caspase-9、C a s p a s e-9表达水平均明显高于未转染组(P=0.0 0 2,P=0.001,h P<0.05,P=0.004,j P<0.05)。Wnt/β-catenin信号通路激活剂可以部分逆转FOXO4抑增殖和促凋亡作用。结论 FOXO4能够促进人喉癌细胞凋亡,抑制喉癌细胞增殖,作用机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。展开更多
目的:探讨S100A4在低氧条件下对胃癌细胞SGC-7901迁移及侵袭的作用及其可能的机制。方法:将化学合成的si-S100A4质粒和阴性对照(si-Ctrl)质粒分别转染胃癌细胞株SGC-7901,根据培养条件的不同分为常氧条件(normal,Nor)+si-S100A4组、Nor+...目的:探讨S100A4在低氧条件下对胃癌细胞SGC-7901迁移及侵袭的作用及其可能的机制。方法:将化学合成的si-S100A4质粒和阴性对照(si-Ctrl)质粒分别转染胃癌细胞株SGC-7901,根据培养条件的不同分为常氧条件(normal,Nor)+si-S100A4组、Nor+si-Ctrl组、低氧条件(hypoxia,Hyp)+si-Ctrl)组、Hyp+si-S100A4组。应用Western blotting检测低氧条件下胃癌SGC-7901细胞中HIF-1及S100A4蛋白的表达变化,检测低氧条件下胃癌细胞中抑制S100A4的表达对细胞中S100A4、β-catenin及TCF-4表达的影响,Transwell小室法分别检测低氧及S100A4对胃癌SGC-7901细胞迁移及侵袭能力的影响。结果:低氧条件下:(1)胃癌SGC-7901细胞中HIF-1和S100A4表达水平均明显升高(3.12±0.23 vs 1.02±0.05,P<0.01;2.75±0.32 vs 1.05±0.07,P<0.01),且两者变化明显相关(r=0.67,P<0.01);(2)胃癌SGC-7901细胞的侵袭及迁移能力增加[(223.31±35.12)vs(131.29±26.40)、(142.27±26.37)个,P<0.05]。干扰低氧条件中S100A4的表达:(1)明显减少低氧对细胞中β-catenin及TCF-4的促进作用(均P<0.01);(2)明显减少低氧对SGC-7901细胞的侵袭及迁移能力的促进作用[(161.37±31.02)vs(88.21±22.42)、(95.36±21.29)个,P<0.05]。结论:S100A4能够促进胃癌细胞SGC-7901的迁移和侵袭,该作用可能是通过S100A4协同HIF-1通过Wnt/β-catenin通路的调控实现的。展开更多
文摘目的探讨头框转录因子O家族4(class O of forkhead box transcriptionfactor 4,FOXO4)对喉癌细胞增殖凋亡能力的影响。方法应用Western blot法检测喉癌组织及对应癌旁组织中FOXO4的表达水平。细胞转染FOXO4过表达载体(p-EGFP-C1/FOXO4组)和空载体(p-EGFP-C1组),同时设置未转染组,未转染组中只加入转染试剂。Western blot法检测转染后细胞中FOXO4蛋白水平。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Caspase-3、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved Caspase-9)、Caspase-9、β-连环蛋白(β-catenin)、Wnt1表达水平。用Wnt/β-catenin信号通路激活剂作用于转染p-EGFP-C1/FOXO4后的喉癌细胞(激活剂组),检测细胞增殖、凋亡情况。结果 FOXO4在喉癌组织中表达水平明显低于癌旁组织(P=0.000)。p-EGFP-C1/FOXO4组细胞中FOXO4表达水平明显高于未转染组(P=0.000)。p-EGFP-C1/FOXO4组细胞存活率及β-catenin、Wnt1水平明显低于未转染组(P=0.002,P=0.004,P=0.006),细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3、Caspase-3、Cleaved Caspase-9、C a s p a s e-9表达水平均明显高于未转染组(P=0.0 0 2,P=0.001,h P<0.05,P=0.004,j P<0.05)。Wnt/β-catenin信号通路激活剂可以部分逆转FOXO4抑增殖和促凋亡作用。结论 FOXO4能够促进人喉癌细胞凋亡,抑制喉癌细胞增殖,作用机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。
文摘目的:探讨S100A4在低氧条件下对胃癌细胞SGC-7901迁移及侵袭的作用及其可能的机制。方法:将化学合成的si-S100A4质粒和阴性对照(si-Ctrl)质粒分别转染胃癌细胞株SGC-7901,根据培养条件的不同分为常氧条件(normal,Nor)+si-S100A4组、Nor+si-Ctrl组、低氧条件(hypoxia,Hyp)+si-Ctrl)组、Hyp+si-S100A4组。应用Western blotting检测低氧条件下胃癌SGC-7901细胞中HIF-1及S100A4蛋白的表达变化,检测低氧条件下胃癌细胞中抑制S100A4的表达对细胞中S100A4、β-catenin及TCF-4表达的影响,Transwell小室法分别检测低氧及S100A4对胃癌SGC-7901细胞迁移及侵袭能力的影响。结果:低氧条件下:(1)胃癌SGC-7901细胞中HIF-1和S100A4表达水平均明显升高(3.12±0.23 vs 1.02±0.05,P<0.01;2.75±0.32 vs 1.05±0.07,P<0.01),且两者变化明显相关(r=0.67,P<0.01);(2)胃癌SGC-7901细胞的侵袭及迁移能力增加[(223.31±35.12)vs(131.29±26.40)、(142.27±26.37)个,P<0.05]。干扰低氧条件中S100A4的表达:(1)明显减少低氧对细胞中β-catenin及TCF-4的促进作用(均P<0.01);(2)明显减少低氧对SGC-7901细胞的侵袭及迁移能力的促进作用[(161.37±31.02)vs(88.21±22.42)、(95.36±21.29)个,P<0.05]。结论:S100A4能够促进胃癌细胞SGC-7901的迁移和侵袭,该作用可能是通过S100A4协同HIF-1通过Wnt/β-catenin通路的调控实现的。
