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Humanβ-defensin-1 affects the mammalian target of rapamycin pathway and autophagy in colon cancer cells through long noncoding RNA TCONS_00014506
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作者 Yu-Xin Zhao Yan Cui +9 位作者 Xin-Hong Li Wen-Hong Yang Shi-Xiang An Jia-Xian Cui Min-Yu Zhang Jing-Kun Lu Xuan Zhang Xiu-Mei Wang Li-Li Bao Peng-Wei Zhao 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 SCIE 2024年第4期1465-1478,共14页
BACKGROUND Colorectal cancer has a low 5-year survival rate and high mortality.Humanβ-defensin-1(hBD-1)may play an integral function in the innate immune system,contributing to the recognition and destruction of canc... BACKGROUND Colorectal cancer has a low 5-year survival rate and high mortality.Humanβ-defensin-1(hBD-1)may play an integral function in the innate immune system,contributing to the recognition and destruction of cancer cells.Long non-coding RNAs(lncRNAs)are involved in the process of cell differentiation and growth.AIM To investigate the effect of hBD-1 on the mammalian target of rapamycin(mTOR)pathway and autophagy in human colon cancer SW620 cells.METHODS CCK8 assay was utilized for the detection of cell proliferation and determination of the optimal drug concentration.Colony formation assay was employed to assess the effect of hBD-1 on SW620 cell proliferation.Bioinformatics was used to screen potentially biologically significant lncRNAs related to the mTOR pathway.Additionally,p-mTOR(Ser2448),Beclin1,and LC3II/I expression levels in SW620 cells were assessed through Western blot analysis.RESULTS hBD-1 inhibited the proliferative ability of SW620 cells,as evidenced by the reduction in the colony formation capacity of SW620 cells upon exposure to hBD-1.hBD-1 decreased the expression of p-mTOR(Ser2448)protein and increased the expression of Beclin1 and LC3II/I protein.Furthermore,bioinformatics analysis identified seven lncRNAs(2 upregulated and 5 downregulated)related to the mTOR pathway.The lncRNA TCONS_00014506 was ultimately selected.Following the inhibition of the lncRNA TCONS_00014506,exposure to hBD-1 inhibited p-mTOR(Ser2448)and promoted Beclin1 and LC3II/I protein expression.CONCLUSION hBD-1 inhibits the mTOR pathway and promotes autophagy by upregulating the expression of the lncRNA TCONS_00014506 in SW620 cells. 展开更多
关键词 Colon cancer Humanβ-defensin-1 LncRNA Mammalian target of rapamycin AUTOPHAGY
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枯草芽孢杆菌肽聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(SBD-1)表达的影响 被引量:1
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作者 齐盟 辛雅明 +2 位作者 白绥明 胡亮 杨银凤 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期52-58,共7页
为了探究来源于枯草芽孢杆菌细胞壁的肽聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)中β-防御素-1(SBD-1)表达的影响,本试验使用30μg/mL肽聚糖刺激ORECs不同时间(2、4、6、8、10和12 h),采用荧光定量PCR(qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检... 为了探究来源于枯草芽孢杆菌细胞壁的肽聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)中β-防御素-1(SBD-1)表达的影响,本试验使用30μg/mL肽聚糖刺激ORECs不同时间(2、4、6、8、10和12 h),采用荧光定量PCR(qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测SBD-1的mRNA和蛋白表达量,确定最佳刺激时间;再使用不同浓度的肽聚糖(0、10、20、30、40和50μg/mL)刺激ORECs 2 h,采用qPCR和ELISA方法检测SBD-1的mRNA和蛋白表达量,确定最佳刺激浓度。结果显示:(1)使用30μg/mL肽聚糖刺激ORECs不同时间时,SBD-1的mRNA和蛋白表达量随着时间的增加呈先下降后升高的趋势,2 h时表达量最多并极显著高于对照组(P<0.001)。(2)使用不同浓度肽聚糖刺激ORECs 2 h时,SBD-1的mRNA和蛋白表达量随着肽聚糖浓度的升高呈现先升高后降低的趋势,在20μg/mL时表达量最多并极显著高于对照组(P<0.001)。(3)不同时间刺激试验和不同浓度刺激试验均不会对ORECs产生细胞毒性作用。结果表明,来源于枯草芽孢杆菌的肽聚糖能够诱导ORECs表达SBD-1,最佳刺激条件为20μg/mL枯草芽孢杆菌肽聚糖刺激ORECs 2 h。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌肽聚糖 绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs) β-防御素-1(sbd-1) 荧光定量PCR(qPCR) 酶联免疫吸附试验(ELISA) CCK8
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雌二醇对蒙古绵羊输卵管上皮细胞内β-防御素(sBD-1)表达的影响 被引量:5
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作者 李淑凤 曹贵方 +3 位作者 宋艳华 姜丽萍 郭宏儒 邵艳红 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期41-47,共7页
为了探索雌二醇与β-防御素(sBD-1)表达量的关系,体外模拟蒙古绵羊(Ovis aries)生理周期,用添加雌二醇浓度10-11、10-10、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L的培养液及不添加雌二醇的培养液(即对照组)分别培养蒙古绵羊输卵管上皮细胞,... 为了探索雌二醇与β-防御素(sBD-1)表达量的关系,体外模拟蒙古绵羊(Ovis aries)生理周期,用添加雌二醇浓度10-11、10-10、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L的培养液及不添加雌二醇的培养液(即对照组)分别培养蒙古绵羊输卵管上皮细胞,作用24 h、48 h、72 h后,提取细胞总RNA,应用SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR法进行定量分析。结果显示,添加不同浓度雌二醇培养的输卵管上皮细胞中sBD-1的相对表达量0.000 740~0.001 758,与对照组0.000 190之间差异显著(P〈0.05),且小于10-8mol/L雌二醇添加浓度与sBD-1基因相对表达量变化基本呈正相关。此结果为进一步研究雌激素参与机体防御功能奠定了基础。 展开更多
关键词 雌二醇 绵羊β-防御素-1(sbd-1) 基因表达量 输卵管上皮细胞 蒙古绵羊
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酿酒酵母β-葡聚糖通过膜受体Dectin-1和TLR-2诱导绵羊瘤胃上皮细胞表达SBD-1的机制研究 被引量:2
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作者 张曼 金鑫 +3 位作者 王云鹤 魏方 温婧怡 杨银凤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期781-790,共10页
为了探索酿酒酵母β-葡聚糖诱导绵羊瘤胃上皮细胞(ovine ruminal epithelial cells,ORECs)β-防御素-1(sheepβ-defensin-1,SBD-1)表达过程中膜受体Dectin-1和TLR-2可能存在的作用。本研究首先利用免疫组化、RT-PCR、免疫荧光和Western ... 为了探索酿酒酵母β-葡聚糖诱导绵羊瘤胃上皮细胞(ovine ruminal epithelial cells,ORECs)β-防御素-1(sheepβ-defensin-1,SBD-1)表达过程中膜受体Dectin-1和TLR-2可能存在的作用。本研究首先利用免疫组化、RT-PCR、免疫荧光和Western blot等方法检测Dectin-1是否在ORECs内表达,并且采用qPCR和Western blot方法对β-葡聚糖刺激ORECs后细胞膜受体Dectin-1和TLR-2的表达变化进行检测。而后用不同浓度的Dectin-1阻断剂昆布多糖或TLR-2特异性封闭抗体分别预处理ORECs后,采用qPCR和ELISA方法检测SBD-1的表达变化,以确定β-葡聚糖诱导SBD-1表达过程中Dectin-1和TLR-2的参与情况。结果显示:1)绵羊瘤胃组织及ORECs内存在Dectin-1表达,且β-葡聚糖刺激ORECs后Dectin-1和TLR-2的表达水平显著增加(P<0.05);2)不同浓度的昆布多糖和TLR-2封闭抗体均可以极显著降低β-葡聚糖诱导SBD-1的表达(P<0.01),且随着阻断剂和封闭抗体浓度的增加,其抑制SBD-1表达的作用越明显。结果表明,Dectin-1在绵羊瘤胃组织及ORECs内均表达,并且酿酒酵母β-葡聚糖在ORECs中诱导SBD-1的表达是由Dectin-1和TLR-2介导产生的。 展开更多
关键词 Β-葡聚糖 sbd-1 绵羊瘤胃上皮细胞 DECTIN-1 TLR-2
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17β-雌二醇对诱导绵羊输卵管上皮细胞β-防御素-1(SBD-1)基因表达的影响 被引量:1
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作者 包图雅 白萨日娜 +2 位作者 曹贵方 凃勇 杜晨光 《内蒙古师范大学学报(自然科学汉文版)》 CAS 北大核心 2014年第1期81-85,共5页
研究了17β-雌二醇(E2)对培养的绵羊输卵管上皮细胞内SBD-1基因表达的影响.将不同剂量的17β-雌二醇加入传2代的绵羊输卵管上皮细胞内,分为实验组(10-6 mol/L组、10-7 mol/L组、10-8 mol/L组、10-9 mol/L组和10-10 mol/L组)和相应的对照... 研究了17β-雌二醇(E2)对培养的绵羊输卵管上皮细胞内SBD-1基因表达的影响.将不同剂量的17β-雌二醇加入传2代的绵羊输卵管上皮细胞内,分为实验组(10-6 mol/L组、10-7 mol/L组、10-8 mol/L组、10-9 mol/L组和10-10 mol/L组)和相应的对照组,分别处理2,6,12,24,48h,然后通过实时荧光定量RT-PCR技术,检测17β-雌二醇对绵羊输卵管上皮细胞内SBD-1mRNA的表达变化.结果显示:17β-雌二醇对绵羊输卵管上皮细胞中SBD-1mRNA的表达存在着时间效应和剂量上的依赖关系;17β-雌二醇可以上调绵羊输卵管上皮细胞中SBD-1mRNA表达,上调表达的最佳时间为6h,最佳浓度为10-8 mol/L(P<0.01). 展开更多
关键词 17Β-雌二醇 输卵管上皮细胞 β-防御素-1(sbd-1) 上调 绵羊 基因表达 sbd-1
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几种不同信号通路的抑制剂对17β-雌二醇诱导绵羊输卵管上皮细胞β-防御素-1(SBD-1)基因转录的影响 被引量:1
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作者 包图雅 曹贵方 +2 位作者 曹金山 杜晨光 凃勇 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期398-403,共6页
主要探讨了17β-雌二醇(E2)促进绵羊输卵管上皮细胞SBD-1(sheep beta-defensin-1)表达的可能的信号通路.在研究过程中,分别用10-8mol/L 17β-雌二醇及雌激素受体拮抗剂ICI182780、PKA(protein kinase A)阻断剂H-89、PKC(protein kinase... 主要探讨了17β-雌二醇(E2)促进绵羊输卵管上皮细胞SBD-1(sheep beta-defensin-1)表达的可能的信号通路.在研究过程中,分别用10-8mol/L 17β-雌二醇及雌激素受体拮抗剂ICI182780、PKA(protein kinase A)阻断剂H-89、PKC(protein kinase C)阻断剂H-7、NF-κB(Nuclear factor-kappaB)阻断剂PDTC(pyrrolidine dithiocarbamate)干预绵羊输卵管上皮细胞6 h,采用实时荧光定量RT-PCR(reverse transcription polymerase chain reaction)方法检测SBD-1 mRNA表达水平的变化.实验结果显示,10-8mol/L 17β-雌二醇可显著促进绵羊输卵管上皮细胞SBD-1 mRNA的表达(p<0.01);ICI182780、H-89、PDTC和H-7均可阻断17β-雌二醇对SBD-1的上调作用.提示17β-雌二醇促进绵羊输卵管上皮细胞SBD-1表达是由雌激素核受体、PKA、NF-κΒ、PKC信号转导通路所介导的. 展开更多
关键词 17Β-雌二醇 输卵管上皮细胞 绵羊 sbd-1 信号通路
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SBD-1型数字白度仪调试实例
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作者 刘德文 《纸和造纸》 1991年第3期47-47,共1页
SBD—1型数字白度仪是由光、电两大部分组成的一个光学测量系统。它是根据光电效应原理,采用双光路和模数转换电路,来测量试样表面漫反射的辐亮度与同一幅照条件下完全漫反射体的辐亮度之比,来达到测量的目的。 SBD—1型数字白度仪随着... SBD—1型数字白度仪是由光、电两大部分组成的一个光学测量系统。它是根据光电效应原理,采用双光路和模数转换电路,来测量试样表面漫反射的辐亮度与同一幅照条件下完全漫反射体的辐亮度之比,来达到测量的目的。 SBD—1型数字白度仪随着使用时间的延长,就可能出现一些问题。如在调修仪器时,遇到下列问题,应该怎样处理呢? 一、荧光白度高了或低了怎么办? 展开更多
关键词 数字白度仪 调试 sbd-1
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洼地绵羊防御素sBD-1基因克隆、序列分析及SYBR Green Ⅰ实时荧光定量检测方法的建立与应用
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作者 王金良 郭显坡 +2 位作者 沈志强 李敏 任艳玲 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期720-724,729,共6页
根据GenBank上登录的绵羊防御素基因序列,经多重比较后,设计1对引物,从洼地绵羊舌上皮组织中扩增到防御素sBD-1基因,克隆到pMD18-T载体中进行测序。结果表明,扩增基因全长215 bp,编码64个氨基酸。基因进化树分析表明,与蒙古绵羊sBD-1基... 根据GenBank上登录的绵羊防御素基因序列,经多重比较后,设计1对引物,从洼地绵羊舌上皮组织中扩增到防御素sBD-1基因,克隆到pMD18-T载体中进行测序。结果表明,扩增基因全长215 bp,编码64个氨基酸。基因进化树分析表明,与蒙古绵羊sBD-1基因有较近的亲缘关系,核苷酸同源性为98.5%;而与黄牛的亲缘关系最远,核苷酸同源性84.6%。氨基酸序列分析表明,序列内无信号肽区域,具有3个潜在的抗原表位。以pMD18-T/sBD-1质粒为模板建立了sBD-1基因SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,核酸电泳、扩增动力学曲线、溶解曲线及重复性试验表明,检测方法具有良好的稳定性和特异性,得到的回归方程(R2=0.998)表明PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在良好的线性关系,从舌、盲肠及输卵管等组织中可以进行有效的检测,检测灵敏度为83.9 copies/μL。该方法为进一步研究防御素sBD-1基因在洼地绵羊抗逆性过程中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 洼地绵羊 sbd-1基因 序列分析 荧光定量
原文传递
蒙古绵羊输卵管上皮细胞β-防御素mRNA相对表达水平的实时荧光定量PCR检测 被引量:4
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作者 唐博 冯永淼 +1 位作者 付本懂 曹贵方 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期733-737,共5页
为了检测培养的蒙古绵羊输卵管上皮细胞内sBD-1 mRNA表达水平,运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术进行了相对定量测定。首先,建立蒙古绵羊输卵管上皮细胞培养体系作为体外试验模型,提取细胞总RNA,根据GenBank中羊β-防御素基因序列,... 为了检测培养的蒙古绵羊输卵管上皮细胞内sBD-1 mRNA表达水平,运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术进行了相对定量测定。首先,建立蒙古绵羊输卵管上皮细胞培养体系作为体外试验模型,提取细胞总RNA,根据GenBank中羊β-防御素基因序列,设计合成引物,进行实时荧光定量PCR。以β-Actin基因为内参基因,对sBD-1 mRNA进行均一化处理,利用荧光阈值(Ct值)计算sBD-1 mRNA的相对表达量。经测序分析,扩增产物为β-防御素。结果显示,SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术可以测定蒙古绵羊β-防御素mRNA表达水平的相对含量。 展开更多
关键词 sbd-1 MRNA 相对表达量 实时荧光定量PCR 蒙古绵羊 细胞培养
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