香菇β-葡聚糖对雏鸡脾和胸腺淋巴细胞以及腹腔巨噬细胞一氧化氮产生的影响

为探讨香菇β-葡聚糖(lentinan,LTN)对雏鸡免疫增强作用的机理,从体内和体外2种途径研究了LTN对雏鸡脾和胸腺淋巴细胞以及腹腔巨噬细胞NO产生的影响。体内试验的4组21日龄雏鸡分别腹腔注射1 g/L的LTN、10 g/L的LTN、20 g/L的硫乙醇酸钠和生理盐水各2 mL,3 d后测脾和胸腺淋巴细胞以及腹腔巨噬细胞产生NO的量;分别以50、100、200、400 mg/L的LTN刺激经硫乙醇酸钠活化的巨噬细胞,测定其NO的生成量。结果显示,1 g/L和10 g/L的LTN均能刺激体内脾和胸腺淋巴细胞以及腹腔巨噬细胞产生NO;不同浓度的LTN均能使体外巨噬细胞NO的生成量增加。证实,适度促进免疫细胞NO的生成可能是LTN的主要免疫作用机理之一。

酸酶水解-HPLC法检测香菇多糖中β-D-葡聚糖含量

为了更有效地监控食品和医药行业中香菇多糖制品的质量,建立了一种香菇多糖中主要活性成分β-D-葡聚糖含量测定的新方法:香菇多糖样品经酸部分水解后用β-1,3-葡聚糖外切酶和β-葡糖苷酶进一步完全水解以测定总葡聚糖含量;另用淀粉葡萄糖苷酶水解样品中α-葡聚糖;根据HPLC测定的总葡聚糖与α-葡聚糖含量之差计得β-D-葡聚糖含量。分别用该方法和苯酚硫酸法及刚果红法测定已知含量的β-D-葡聚糖对照样品的结果表明:该方法最接近于对照品标示值,且重复性好,可用作为香菇多糖产品中β-D-葡聚糖含量测定的专属方法。

采后钙处理对香菇多糖和细胞稳定性的影响

以采后香菇子实体为原料,采取CaCl2溶液真空渗透法,研究Ca2+处理对采后香菇多糖、β-1,3-葡聚糖酶活性、膜透性和MDA的影响。结果表明:0.12mol/L CaCl2处理的效果最好,β-1,3-葡聚糖酶活性为20.54U/mg,香菇多糖含量为0.38%,膜电导率为85.11%,MDA含量为2.48μmol/L,均优于对照。不同浓度Ca2+处理均能抑制香菇采后β-1,3-葡聚糖酶活性,降低香菇多糖贮藏期间的损耗,并有效维持细胞膜结构的完整性。

香菇多糖诱导人肺腺上皮细胞β-防御素-2基因表达的研究

探讨香菇多糖诱导人肺腺上皮细胞的人-β-防御素-2(HBD-2)基因表达的情况。香菇多糖体外刺激人肺腺上皮细胞(SPC-A-1)后,应用RT-PCR技术检测SPC-A-1细胞HBD-2 mRNA的表达。香菇多糖可上调人肺腺上皮细胞(SPC-A-1)HBD-2 mRNA的表达;这种增强表达与药物的刺激剂量和刺激时间具有一定的相关性。

香菇多糖对甲状腺癌荷瘤小鼠肿瘤生长抑制作用研究

目的研究香菇多糖对甲状腺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及对Wntβ-catenin信号通路的调控。方法C57BL/6小鼠随机分为模型组、实验组和对照组,每组15只,各组小鼠均于背部注射甲状腺癌TT细胞悬液0.1 m L,肿瘤体积长至80 mm3时进行相关实验。实验组和对照组分别给予尾静脉注射香菇多糖(20 mg·kg^-1)、阿霉素(20 mg·kg^-1),模型组尾静脉注射0.9%Na Cl 100μL,每2 d药物干预1次,均连续干预20 d。计算肿瘤体积比,统计小鼠存活时间,以MTT实验检测小鼠脾T、B淋巴细胞增殖水平,以蛋白质印迹(WB)法检测甲状腺癌荷瘤小鼠中肿瘤组织中Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达情况。结果干预后21 d,模型组、实验组和对照组小鼠肿瘤体积比分别为23.05±4.26,16.45±2.39,12.36±3.09,中位存活时间分别为23.46,36.05,39.52 d,脾指数(SI)分别为(4.65±1.13),(5.96±1.02),(3.54±1.05)mg·g^-1,T细胞增殖活性分别为0.46±0.04,0.63±0.14,0.39±0.02,B细胞增殖活性分别为0.43±0.07,0.58±0.03,0.34±0.04,WB检测显示,模型组、实验组和对照组小鼠肿瘤组织中β-catenin蛋白相对表达量分别为1.53±0.26,0.63±0.12,0.58±0.09;c-Myc蛋白相对表达量分别为0.96±0.08,0.39±0.05,0.33±0.06,Axin2分别为1.06±0.10,0.46±0.08,0.23±0.09,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论香菇多糖通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制甲状腺癌荷瘤小鼠肿瘤生长,同时改善了小鼠的免疫功能。