我国高粱炭疽病症状类型及其病原菌鉴定

高粱炭疽病是近年来我国高粱产区严重发生的高粱病害,局部地区已造成严重的高粱产量损失。为了明确我国高粱炭疽病症状类型及其相应的病原菌种类,为病害田间诊断和抗病育种提供理论指导,于2015~2017年连续3年,对我国8省13市高粱产区高粱炭疽病发生情况进行系统调查,依据高粱炭疽病病斑形状、颜色、晕圈有无、分生孢子盘和孢子有无及数量多少等特征,将不同地区的高粱炭疽病症状分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ和Ⅷ等8种类型,不同类型症状分布区域不同,但并无规律性。采集不同症状的高粱炭疽病标样72份,进行病原菌分离纯化,共获得高粱炭疽病菌210株,并采用病菌形态学鉴定和rDNA-ITS及β-tublin基因序列分析相结合的技术对供试菌株进行鉴定。病菌培养性状、形态结构等均符合高粱炭疽病致病菌亚线孢炭疽菌(Colletotrichum sublineolum Henn.)的形态特征。且供试高粱炭疽病菌ITS及β-tublin序列均与GenBank中亚线孢炭疽菌序列极为相似,相似度为99.7%~100%。综上可见,我国不同高粱产区的高粱炭疽病虽症状差异很大,存在多种症状类型,但其病原菌均为亚线孢炭疽菌,并非其他种类侵染所致。高粱炭疽病表现症状差异可能与不同地区种植的高粱品种基因型不同有关。通过研究解决了高粱炭疽病田间症状易混淆、不易诊断的问题,对于该病害的预警和综合防治均具有重要的应用价值。

蛋白质印迹法中免染技术和总蛋白定量方法的研究进展

当含有蛋白质的SDS-PAGE胶浸泡在三氯乙酸或氯仿中时,经三氯化合物的作用,使得蛋白质中的色氨酸经紫外光照射会发出可见光,因而可在SDS-PAGE凝胶上实现对蛋白质条带的定位与定性。免染技术即是基于此原理而发明的。基于免染技术,我们可以检测到待测样品中的总蛋白条带的光密度,进而利用目的蛋白条带光密度与总蛋白条带光密度的比值对目的蛋白进行定量。本文就蛋白质印迹法技术中的免染技术和总蛋白定量方法的原理和优势进行简要综述。

大鼠脊髓缺血损伤后β管蛋白及其mRNA的表达变化

目的：研究大鼠脊髓缺血损伤后β管蛋白及其ｍＲＮＡ的表达变化。方法：利用β管蛋白的单抗及地高辛标记ｃＤＮＡ探针，借助于免疫组化、原位杂交、图像分析等方法，对腹主动脉阻断（肾动脉上）３０ｍｉｎ后再灌流不同时间点大鼠缺血损伤脊髓神经元β管蛋白及其ｍＲＮＡ的变化进行了定性定量研究。结果：ＳＣＩ后β管蛋白及ｍＲＮＡ均明显降低，３ｄ达最低水平，７ｄ有所恢复，到１４ｄβ管蛋白ｍＲＮＡ恢复到伤前，而β管蛋白仍维持低水平。结论：β管蛋白破坏，可能与Ｃａ２＋激活的中性蛋白酶有关；β管蛋白与其ｍＲＮＡ的分离，提示β管蛋白的减少，除转录水平减少所致翻译产物降低外，破坏增多亦是可能的原因。

引起大豆红冠腐病的冬青丽赤壳菌快速分子检测

利用冬青丽赤壳菌(Calonectria ilicicola)的β-tublin基因特异性序列设计PCR引物,能成功将大豆红冠腐病菌与其他近似种及相关种区分开,灵敏度达到1 ng/μL,可以用于检测接种发病的植株样品。同时建立了C.ilicicola的实时定量PCR检测体系,灵敏度提高1 000倍。本研究建立的方法对冬青丽赤壳菌引起的大豆红冠腐病的实时监测有重要的指导意义。