牛血中β2-糖蛋白的提取纯化及免疫原性研究

【目的】为β2GPI的获得增加一个新的途径,提高牛血的利用效益,减少牛血资源浪费。【方法】牛血清经HClO_(4)沉淀、Heparin Sepharose CL-6B亲和层析及分子筛等方法纯化获得目的蛋白β2GPI。利用凝胶电泳技术对提取的Bβ2GPI进行了纯度鉴定和分析,然后采用ELISA技术对Bβ2GPI的免疫原性进行了评估。【结果】试验表明提取纯化的Bβ2GPI纯度约为95%,其反应性与β2GPI标准品相同。【结论】从牛血中成功提取纯化β2GPI,且所获得的蛋白具有较高纯度和良好的免疫原性。

抗β2-糖蛋白1抗体的临床意义

抗β2-糖蛋白1抗体(aβ2-GP1)是以磷脂结合蛋白为靶抗原的抗磷脂抗体。20世纪90年代初,三个研究小组同时发现抗磷脂综合征病人的抗心磷脂抗体识别的是血浆中的β2-糖蛋白1 (β2-GP1),而非心磷脂,由此打开了研究者对β2-GP1的兴趣大门。随着研究进展,目前发现aβ2-GP1在多种疾病的发生发展中起着十分重要的作用。本文将对aβ2-GP1在多种临床疾病中的意义作一综述。

β2-糖蛋白Ⅰ的多重作用及其抗体在血液系统疾病中的研究进展

β2-糖蛋白Ⅰ(β2-GPⅠ)是一种具有双重调节补体系统和凝血系统的功能蛋白。β2-GPⅠ不仅具有抗凝、抗血小板和促凝作用,还具有调节补体、调节血管生成及调节免疫的作用。近些年新方法的应用不仅提升了β2-GPⅠ分离纯化的能力,更进一步提升了抗β2-GPⅠ抗体的检测灵敏度及特异性。在临床上,β2-GPⅠ及其抗体可能参与了免疫性血小板减少症、白血病、淋巴瘤等多种血液系统疾病的发生发展。该文综述了β2-GPⅠ的作用、相关指标检测方法、β2-GPⅠ及其抗体在血液系统疾病中的研究进展。

脑梗死患者血清抗β2-糖蛋白1抗体水平变化与颈动脉粥样硬化的相关性

目的探讨脑梗死患者血清抗β2-糖蛋白1(β2-GP1)抗体水平与颈动脉粥样硬化(CAS)斑块及其危险因素的相关性。方法选取303例前循环脑梗死患者,应用血管多普勒超声仪进行颈部血管超声检测,根据有无CAS斑块及狭窄程度将患者分为三组,其中无斑块无狭窄组79例,有斑块无狭窄组98例,有斑块有狭窄组126例,有斑块有狭窄组中1级狭窄41例,2级狭窄34例,3级狭窄30例,4级狭窄21例。采用ELISA检测患者血清抗β2-GP1抗体水平,用酶法测量血糖、甘油三酯及总胆固醇水平,用直接法测量血清低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)及高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平。结果无斑块无狭窄组、有斑块无狭窄组、有斑块有狭窄组患者血清抗β2-GP1抗体水平分别为16.02±16.23 kRU/L、21.43±16.15 kRU/L、34.89±19.15 kRU/L;有斑块无狭窄组、有斑块有狭窄组患者血清抗β2-GP1抗体水平明显高于无斑块无狭窄组(P<0.05或P<0.01),有斑块有狭窄组患者血清抗β2-GP1抗体水平明显高于有斑块无狭窄组(P<0.01);血清抗β2-GP1抗体水平随CAS狭窄程度的增加而增高。Logistic回归分析显示,抗β2-GP1抗体水平与LDLC水平密切相关。结论血清抗β2-GP1抗体参与动脉粥样硬化的形成、发展,LDLC是血清抗β2-GP1抗体增高的独立危险因素,血清抗β2-GP1抗体可作为CAS的血清生化指标之一。

β2-糖蛋白Ⅰ与抗心磷脂抗体阳性先兆流产的关系以及安子合剂干预作用的实验研究

目的阐述β2-糖蛋白Ⅰ（β2-GPⅠ）在抗心磷脂抗体阳性先兆流产中诱导抗体产生的机制,为安子合剂治疗ACA阳性先兆流产的进一步研究打下良好的实验基础。方法以β2-GPⅠ为免疫原,构建流产小鼠模型;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测抗心磷脂抗体阳性先兆流产模型小鼠血清中ACA、抗β2-GPⅠ抗体。结果①成功复制模型：胚胎丢失率模型组明显高于空白组（P〈0.05）,模型组抗β2-GPⅠ抗体浓度、ACA滴度均显著高于空白组（P〈0.05）;②安子合剂低剂量组能明显降低抗β2-GPⅠ抗体浓度和ACA滴度（P〈0.01）,且效果优于安子合剂中剂量组、高剂量组以及阿司匹林组（P〈0.05～0.01）。结论①抗β2-GPⅠ抗体、ACA均是导致免疫性复发流产的免疫因素;②安子合剂通过降低ACA滴度和抗β2-GPⅠ抗体浓度改善ACA阳性先兆流产妊娠结局;③安子合剂低剂量组具有临床等效性,随着剂量的增加,反而引起代谢障碍而使得效果逐渐减弱。

抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体与先兆流产的关系

目的探讨抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体与先兆流产的关系。方法通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测121例先兆流产孕妇(其中妊娠未成功者75例,妊娠成功者46例)、40名健康正常妇女(其中未妊娠者20名,妊娠者20名)的血清中抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体(IgM型)的水平。结果先兆流产组血清抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体总阳性率为58.7%,与对照组(17.5%)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。妊娠未成功组阳性率为78.7%,与妊娠成功组(26.1%)比较,差异有统计学意义(P<0.05);妊娠未成功组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),而妊娠成功组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);首次先兆流产组、多次先兆流产组抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体阳性率均高于健康正常妊娠组(P<0.05),而不同次数先兆流产组间阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论先兆流产与体内抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体的存在有关,检测抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体可为先兆流产的诊断、治疗及预后判断提供实验室依据。

抗β2-糖蛋白I抗体和复发性流产的关系

目的 探讨抗β2-糖蛋白I抗体和复发性流产的关系.方法 选取我院2015年1月~2016年12月接收的120例抗心磷脂抗体阴性的复发性流产患者以及50例正常的经产妇的临床资料,分析这两者治疗后的抗β2-糖蛋白I抗体水平.结果 复发性流产患者中有32例为抗β2-糖蛋白I抗体阳性,两组患者抗β2-糖蛋白I抗体IgM在〈15RU/ml（A1组）、15-20RU/ml（A2组）以及〉20RU/ml（A3组）上存在明显差异,（P〈0.05）,有统计学意义;研究组中A2组和A3组接受抗凝治疗后妊娠成功率之间存在差异性（P〈0.05）;研究组A2组中接受抗凝治疗和没有接受抗凝治疗的妊娠成功率之间存在明显差异（P〈0.05）;研究组中A2组和A3组中接受抗凝治疗和没有接受抗凝治疗的妊娠成功之间存在差异性（P〈0.05）,有统计学意义.结论 复发性流产和抗β2-糖蛋白I抗体IgM有关,当其≥15RU/ml时可进行抗凝治疗.

抗核抗体、抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体、D-二聚体对复发性流产疾病转归的影响

目的探讨复发性流产(RSA)患者抗核抗体(ANA)、抗β_(2)-糖蛋白Ⅰ抗体(A-β_(2)-GPⅠ)、D-二聚体(D-D)对疾病转归的影响。方法选取舞钢市人民医院2019年3月至2021年3月收治的224例RSA患者作为观察组,另选取于产科门诊就诊的60例正常经产妇作为对照组。比较两组ANA、A-β_(2)-GPⅠ阳性率及D-D水平,分析ANA、A-β_(2)-GPⅠ、D-D与流产次数、RSA患者疾病转归的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)分析ANA、A-β_(2)-GPⅠ、D-D表达对RSA患者疾病转归的预测价值。结果观察组ANA、A-β_(2)-GPⅠ阳性率及D-D水平均高于对照组(P<0.05),流产≤3次的患者D-D水平低于流产>3次的患者(P<0.05)。相关性分析可知,RSA患者ANA、A-β_(2)-GPⅠ表达与流产次数无关,D-D水平与流产次数呈正相关(P<0.05)。既往流产次数、吸烟、饮酒、受教育程度、生殖道感染、ANA、A-β_(2)-GPⅠ阳性均为RSA患者疾病转归的影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,ANA、A-β_(2)-GPⅠ、D-D表达三者联合预测RSA患者疾病转归的AUC最大,且>0.9,预测效能较高。结论ANA、A-β_(2)-GPⅠ、D-D与RSA患者预后密切相关,可有效预测疾病转归。

抗β2-糖蛋白1抗体联合抗心磷脂抗体检测在复发性流产中的应用价值

目的探讨抗02-糖蛋白1抗体(anti-β2-GPl)联合抗心磷脂抗体(aCL)检测在复发性流产(RSA)诊断中的应用价值。方法选取南京医科大学第一附属医院2018年1月至2019年12月收治就诊的RSA患者282例,设为RSA组,另选取同期66例健康体检的已产妇为对照组。釆用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组受试者血清中anti-β2-GPl、aCL含量。结果RSA组中有38例患者anti-β2-GPl阳性,阳性率为13.48%,高于对照组9.22%(P=O.017);RSA组26例患者aCL抗体阳性,阳性率为3.03%,高于对照组1.52%(P=0.035)=联合检测时RSA组anti-β2-GPl、aCL共51例患者阳性,阳性率为18.08%,显著高于单项检测的阳性率。结论anti-β2-GP1、aCL与RSA的发生有相关性,联合检测的灵敏度更高,联合检测anti-β2-GP1和aCL是RSA诊断的重要指标。

血清胱抑素C及抗β2-糖蛋白1抗体与急性脑梗死近期预后的相关性研究

目的:研究血清胱抑素C及抗β2-糖蛋白1抗体与急性脑梗死近期预后的相关性。方法:数据研究病例选择2016年6月至2018年5月本院收治的300例急性脑梗死患者,按照14天预后情况不同将患者分为两组(对照组n=173例,观察组n=127例),对两组患者血清胱抑素C、抗β2-糖蛋白1抗体以及神经功能缺损情况进行评分。结果:1.在对患者治疗后进行检查发现观察组血清胱抑素C、抗β2-糖蛋白1抗体指标均显著高于对照组患者;2.经积极治疗14天后分析发现,观察组血清胱抑素C、抗β2-糖蛋白1抗体较高的情况下,NIHSS评分也处于较高水平,神经功能恢复较对照组差,差异有统计学意义,P<0.05。结论:本文研究发现血清胱抑素C及抗β2-糖蛋白1抗体与急性脑梗死近期预后有关,且血清胱抑素C及抗β2-糖蛋白1抗体水平越高神经功能恢复越差,因此可将血胱抑素C及抗β2-糖蛋白1抗体作为评价急性脑梗死近期预后新的判定指标,为临床医师评价患者预后提供新的理论依据。

β_2-糖蛋白I与氧化脂蛋白复合物的研究进展

β2-糖蛋白-I(beta2-glycoprotein I,β2-GPI)在体内与氧化低密度脂蛋白、氧化脂蛋白(a)结合形成复合物,在伴有高动脉粥样硬化风险的自身免疫性疾病及心脑血管疾病等患者血清中水平显著升高,且与体内高氧化应激状态和炎症反应相关,是预测动脉粥样硬化发生、发展的新的危险因素。本文就近年来有关β2-GPI与氧化脂蛋白复合物的检测和临床意义研究作一综述。

抗β_2-糖蛋白1抗体与狼疮性肾炎的关系研究

目的探讨抗2β-GP 1抗体与狼疮性肾炎(LN)的相关性。方法采用EL ISA法测定随机抽取活动期LN患者33例血清中抗2β-GP 1,同时检测患者血清IgG、C3及C r。结果与正常对照组及其它肾炎组相比,LN组抗2β-GP 1水平明显升高(P<0.01),阳性率高达54.55%,显示抗2β-GP 1与LN有较强的相关性。结论抗2β-GP 1可作为LN早期诊断的重要指标。

抗β_2-糖蛋白Ⅰ抗体与反复自然流产的关系

目的:探讨抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体(anti-β2-GPⅠantibody)与反复自然流产(RSA)的关系。方法:采用酶联免疫吸附法检测81例RSA患者和39例正常妇女血清中anti-β2-GPⅠ的水平。结果:RSA组anti-β2-GPⅠ及其IgG型抗体阳性率分别为42.0%和40.8%,显著高于对照组(7.7%)(P<0.01,P<0.05);IgM型抗体阳性率与对照组比较差异无显著性(P>0.05);早期与中晚期RSA两组间及RSA 2次与RSA≥3次两组间阳性率比较差异均无显著性(P>0.05)。结论:anti-β2-GPⅠ与RSA有关,可作为RSA免疫因素的辅助诊断指标。

氧化修饰的β_2-糖蛋白-1诱导抗心磷脂抗体的产生

目的：探讨蛋白质的氧化修饰与体内抗磷脂抗体产生的关系。方法：首先，在体外以次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶氧化系统氧化大鼠β_2-GP1，然后以氧化的β_2-GP1（oxβ_2－GP1）免疫同种大鼠，最后以ELISA方法检测被免疫大鼠β_2-GP1血清中的抗心磷脂抗体（ACA）。结果：氧化的β_2-GP1免疫的大鼠血清中产生高滴度的ACA。结论：β_2－GP1的氧化修饰在ACA的产生上可能起十分重要的作用。

肾病综合征患儿血清β_2-糖蛋白I/氧化低密度脂蛋白复合物水平升高的研究

目的在血循环中氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)易与β2-糖蛋白I(β2-glycoproteinI,β2-GPI)结合成稳定的β2-GPI/ox-LDL复合物,该复合物是血栓形成和动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)发生的新的危险因素。原发性小儿肾病综合征(nephritic syndrome,NS)患者伴有高脂血症和高氧化应急状态,具有肾小球硬化和血栓的危险性。文中检测NS患儿血清β2-GPI/ox-LDL复合物水平,分析其与NS病情的关系。方法以抗人β2-GPI抗体为包被抗体,酶标记抗载脂蛋白B(apo B)为检测抗体的血清β2-GPI/ox-LDL ELISA检测法,检测84例NS患儿和84例年龄、性别匹配的健康儿童(对照组)的血清。用ELISA法检测血清ox-LDL浓度,同时检测研究对象常规血脂水平和肾功能指标。结果 NS患儿血清β2-GPI/ox-LDL水平显著高于对照组[(1.08±0.47)U/ml vs(0.54±0.29)U/ml,P<0.001],ox-LDL浓度也明显升高[(143.76±64.55)mg/L vs(89.11±53.80)mg/L,P<0.01]。相关分析显示,β2-GPI/ox-LDL水平与ox-LDL(r=0.721)、LDL-C(r=0.518)、TC(r=0.503)、TG(r=0.380)以及尿蛋白(r=0.326)显著正相关(均为P<0.01),与血清清蛋白(Alb)显著负相关(r=-0.417,P<0.01)。进一步多因素分析显示,NS患儿β2-GPI/ox-LDL复合物水平49.5%的变化由ox-LDL(β=0.527,P<0.01)、尿蛋白(β=0.172,P=0.036)和LDL-C(β=0.203,P=0.037)决定。结论血清β2-GPI/ox-LDL水平升高与NS患儿病情有关。

系统性红斑狼疮患者血浆内皮微粒和抗β_2-糖蛋白Ⅰ抗体的检测

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）是一种自身免疫性疾病,可引起全身多脏器损害,临床上常出现静脉血栓、血小板减少、溶血性贫血及神经系统改变等表现,研究表明SLE的许多临床表现与血栓形成密切相关,而内皮功能障碍在血栓形成中亦扮演着重要角色,内皮微粒（endothelial mi-croparticles，EMP）是内皮细胞凋亡或激活时释放的亚微米级颗粒，检测血浆中EMPs的水平是新近提出的评估内皮功能障碍的方法。

清热活血方对β_2-糖蛋白诱导的抗心磷脂抗体产生的影响及机理研究

目的:观察清热活血方对β_2-糖蛋白(β_2-GPI)诱导的抗心磷脂抗体(aCL)产生的影响,探讨清热活血方对抗磷脂抗体综合征(APS)的治疗作用及可能的作用机制。方法:4周龄的30只雌性昆明种小鼠被随机分为3组:A组(用药组)、B组(模型组)、C组(正常对照组);A组用清热活血方5g/(kg·d)灌胃;14d后,A、B两组多部位皮下注射β_2-GPI;检查血清aCL、外周血T细胞亚群和IL-2生物活性。结果:A组各周血清aCL OD值均较B组有不同程度降低(P<0.01)。与B组相比,A组可明显降低T_H/T_s比值(P<0.01),可使不同稀释度的IL-2活性明显降低(P<0.01)。经双变量直线分析,T_H/T_S比值和IL-2生物活性呈正相关(P<0.01)。结论:清热活血方可抑制β_2-GPI诱导的aCL的产生,其作用机理可能是抑制T_H/T_S比值和IL-2生物活性的升高。

育龄期妇女抗心磷脂抗体和抗β_2-糖蛋白1抗体检测及临床应用

抗磷脂抗体综合征（ASP）是常见的疾病,易引起习惯性流产、早产、死胎等症状.临床上,依赖病人表现和磷脂抗体（aPL）来确诊.aPL有多种,其中最重要、最具代表性的aPL是抗心磷脂抗体（aCL）和抗β2-糖蛋白1 （β2-GP1）抗体.……

糖尿病视网膜病变患者血清β_2-糖蛋白Ⅰ的表达

目的探讨血清β2-糖蛋白Ⅰ(beta2-glycoproteinⅠ,β2-GPⅠ)在不同时期糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者中的变化,了解血清β2-GPⅠ与DR的关系。方法收集60例2型糖尿病患者血清标本,将其分为3组:20例无明显DR(no-DR,NDR)患者为NDR组;20例非增生性DR(non-proliferative DR,NPDR)患者为NPDR组;20例增生性DR(proliferative DR,PDR)患者为PDR组。同时收集20例健康人血清为正常对照(normal control,NC)组。应用Westernblot方法,对各组随机抽取的4份血清样本中β2-GPⅠ水平进行分析。结果β2-GPⅠ水平在NPDR组、PDR组大量表达,在NDR组中量表达,在NC组少量表达。NC组、NDR组、NPDR组和PDR组各条带面积平均光密度值,分别为(440564.9±66597.4)mm-2、(655561.6±85640.8)mm-2、(859969.7±85461.0)mm-2、(954887.4±125764.4)mm-2。与NC组比较,β2-GPⅠ水平在NDR组、NPDR组、PDR组显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.01);与NDR组比较,β2-GPⅠ水平在NPDR组、PDR组显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.01);与NPDR组比较,PDR组无明显升高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在DR发生过程中,血清β2-GPⅠ水平上调,β2-GPⅠ可能具有潜在的早期诊断DR的价值。

β_2-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物的研究进展

β2-糖蛋白Ⅰ与氧化型低密度脂蛋白结合形成2β-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物,它在体内存在与否和高氧化应激状态、炎症有关。自身免疫性疾病以及一些伴有心血管病变的有慢性炎性反应的疾病患者血清β2-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物水平明显升高,自身免疫性疾病患者血清中还可检测到复合物自身抗体的存在。体外实验显示,β2-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物与其自身抗体形成的免疫复合物,通过Fcγ受体途径被巨噬细胞摄取,这可能是导致氧化型低密度脂蛋白被巨噬细胞摄取的主要路径之一。