整合素β3基因多态性蛋白质变异及其与疾病关系研究进展

整合素(ITG)β3基因位于17号染色体长臂2区1号3带(17q21.3),基因区间在47253827~47313743,全长59917 kb,编码区间在47253862~47310204,全长56343 kb,有15个外显子、14个内含子;编码1648个氨基酸残基,分子量为105 kDa。ITGβ3蛋白是一种二价离子依赖性细胞黏附分子,广泛存在于细胞膜中。其主要功能是介导细胞之间,细胞和细胞外基质之间的识别、连接和黏附,主导细胞内外跨膜接头蛋白连接的作用。近年来,关于ITG在细胞识别与黏附、细胞活化与分化、免疫反应、细胞信号传导、炎症反应、创伤修复与愈合、凝血与血栓形成、肿瘤形成与转移等方面发挥重要作用的研究取得许多进展,本文综述如下。

莪术二酮对凝血酶诱导的人血小板整合素αⅡbβ3活化的抑制作用

目的研究莪术二酮对凝血酶诱导的人血小板整合素αⅡbβ3活化的抑制作用。方法健康志愿者全血制备成洗涤血小板,分别以终浓度100、150、200μmol/L莪术二酮与洗涤血小板共孵育,凝血酶作为诱导剂,以不加莪术二酮的血小板同步处理为对照组,采用血小板聚集实验检测凝血酶的最佳浓度和血小板的聚集功能,流式细胞术检测血小板的活化(P-选择素)和整合素αⅡbβ3活化(PAC-1)情况,Western blot法检测Integrinβ3相关蛋白表达。结果与对照组比较,莪术二酮可抑制凝血酶诱导的血小板聚集、P-选择素的表达、PAC-1的结合能力以及Talin 1、p-Src、p-Integrinβ3蛋白表达(P<0.05),但莪术二酮的作用弱于阳性药替罗非班(P<0.05)。结论莪术二酮可以通过降低Talin 1和p-Src蛋白表达,从而抑制整合素αⅡbβ3活化,进而抑制凝血酶诱导的血小板活化发挥抗血小板的作用。

整合素β3通过激活MAPK/ERK途径促进鼻咽癌细胞转移

鼻咽癌(NPC,nasopharyngeal carcinoma)作为我国南方及东南亚地区高发的一种头颈部恶性肿瘤,远端转移和局部复发是导致其治疗失败的主要原因。本研究通过对不同转移能力的鼻咽癌细胞进行分析,发现整合素β3(ITGB3,integrinβ3)在高转移鼻咽癌细胞中的表达明显高于低转移鼻咽癌细胞。随后的研究表明ITGB3的上调表达促进了鼻咽癌细胞迁移、侵袭、克隆形成以及黏附能力,同时促进了鼻咽癌细胞增殖并抑制其凋亡水平。进一步地,本研究发现,ITGB3主要通过激活MAPK/ERK途径,进而促进鼻咽癌细胞迁移、侵袭、克隆形成以及黏附。因此,研究揭示了ITGB3对鼻咽癌细胞转移的调控作用及其分子机制,为鼻咽癌细胞转移防治与治疗提供了新的理论基础。

β3肾上腺素能受体阻滞剂对老年冠心病大鼠心功能的影响

目的探究β3肾上腺素能受体(β3-AR)阻滞剂SR59230A对老年冠心病大鼠心功能及血管内皮功能的影响及作用机制。方法30只雄性20月龄SPF级SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=10)、β3-AR阻滞剂SR59230A组(干预组,n=30),模型组采用高脂饲料饮+腹腔注射脑垂体后叶素构建冠心病大鼠模型,干预组在模型组基础上分别给予30、50、70μg/kg SR59230A腹腔注射并记为低、中、高剂量干预组,每组10只,对照组及模型组给予等量生理盐水腹腔注射,2次/w,连续干预8 w。观察大鼠心肌组织病理变化,检测干预前后心功能指标、血流动力学指标、血清心室重构分子变化,比较心肌组织心肌酶指标、β3-AR及成纤维细胞生长因子(FGF)-2、血管内皮生长因子(VEGF)等血管内皮功能标志因子表达。结果光镜下模型组心肌组织细胞形态发生明显改变,细胞体积明显缩小,核固缩明显,各干预组心肌组织细胞水肿状态均较模型组有所改善,高剂量干预组细胞肿胀程度缓解最为明显,细胞形态基本趋于正常。与模型组相比,各干预组左室舒张末期内径(LVEDd)、左室收缩末期内径(LVESd)、左室舒张末期压力(LVEDP)等心功能指标和血流动力学指标则均明显降低(P<0.05),计算左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)及左室收缩压(LVSP)、左室内压上升最大速率(+dp/dtmax)、左室内压下降最大速率(-dp/dtmax)等指标明显升高(P<0.05),其血清血管紧张素(Ang)Ⅱ、非对称性二甲基精氨酸(ADMA)等血管心室重构分子水平明显降低(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)活性明显升高,丙二醛(MDA)含量明显降低,β3-AR基因及蛋白表达水平明显降低,FGF-2、VEGF基因及蛋白表达水平明显升高(均P<0.05);高剂量干预组LVEDd、LVESd、LVEDP明显低于低、中剂量干预组(P<0.05),LVFS、LVEF、LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax明显高于低、中剂量干预组(P<0.05),其血清AngⅡ、ADMA水平则明显降低,SOD活性明显升高,MDA含量明显降低,β3-AR基因及蛋白表达水平明显降低,FGF-2、VEGF基因及蛋白表达水平明显升高(均P<0.05)。结论β3肾上腺素能受体阻滞剂可通过下调β3-AR表达,促进大鼠血管FGF-2和VEGF表达上调,减轻血管内皮损伤和心室重构,改善冠心病大鼠心功能。

骨痛灵方通过抑制整合素αvβ3通路缓解肺癌骨转移癌性疼痛

目的:探讨骨痛灵(Gutongling,GTL)方治疗肺癌骨转移疼痛的潜在作用机制。方法:将50只C57BL/6雄性小鼠随机分为5组(n=10):假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、唑来膦酸组(ZA组)、骨痛灵组(GTL组)、骨痛灵+唑来膦酸组(GTL+ZA组)。除Sham组给予接种PBS溶液外,其余各组均予鼠源肺腺癌细胞Lewis-LUC悬液造模。采用von Frey纤维丝测痛仪检测小鼠足底的机械痛阈值,共聚焦显微镜观察破骨细胞伪足小体F-actin环,实时荧光定量PCR法与免疫组化法检测各组小鼠左后肢胫骨骨组织中整合素αvβ3、富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(PyK2)、酪氨酸激酶Src、Casitas B细胞淋巴瘤家族蛋白(Cb1)mRNA及蛋白表达水平。结果:与Sham组比较,Model组小鼠造模后机械痛阈值下降(P<0.05)。造模后第14天:各给药干预组机械痛阈值较Model组升高(P<0.05);ZA组与GTL组机械痛阈值相当;造模后第21天:GTL+ZA组机械痛阈值较各给药组明显升高(P<0.05)。与Sham组比较,Model组F-actin环结构完整、αvβ3、Py K2、Scr、Cbl mRNA表达及蛋白染色强度升高(P<0.05);GTL+ZA组F-actin环较各给药组破坏程度明显、αvβ3、Py K2、Scr、Cbl mRNA表达及蛋白染色强度明显下降(P<0.05)。结论:骨痛灵方可能通过调控骨组织中αvβ3/Py K2/Src/Cbl通路抑制F-actin环形成起到骨保护作用,从而治疗肺癌骨转移疼痛。

TGF-β3拮抗TGF-β1诱导的FMT改善小鼠肺纤维化

目的 研究转化生长因子(transforming growth factor, TGF)-β3是否能够抑制TGF-β1诱导的人肺成纤维细胞(human lung fibroblast, HLF)间质转化。方法 在体外培养原代HLF进行细胞实验,分为3组:对照组:给予等体积超纯水;TGF-β1组:细胞给予TGF-β1(4ng/ml)处理HLF 24h;TGF-β3组:细胞给予20ng/ml的TGF-β3预处理24h后加入TGF-β1(4ng/ml)处理24h。Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)和纤连蛋白(Fibronectin)蛋白的表达水平。在体内构建小鼠肺纤维化模型,分为3组:对照组:给予等体积0.9%氯化钠溶液气管滴注;模型组:博来霉素溶于0.9%氯化钠溶液,按2.0U/kg的浓度给予小鼠气管内滴注;TGF-β3干预组:于造模前1天,将TGF-β3(100μg/kg)给予小鼠尾静脉注射。HE和Masson染色法观察肺组织病理学变化,免疫荧光法检测α-SMA和Fibronectin蛋白的变化。结果 在体外,与TGF-β1组比较,TGF-β3组细胞迁移和侵袭能力降低,α-SMA和Fibronectin蛋白表达下调。在体内,与模型组比较,TGF-β3组小鼠肺组织病理变化改善,胶原沉积减少,α-SMA和Fibronectin蛋白荧光强度降低。结论 TGF-β3抑制TGF-β1引起的HLF间质转化,并改善博来霉素诱导的小鼠肺纤维化。

CXCR4通过integrinαVβ3调控头颈部鳞癌细胞迁移的机制研究

目的:研究C-X-C型趋化因子受体4(CXCR4)-整合素αVβ3(integrinαVβ3)介导头颈部鳞癌细胞迁移的分子生物学机制。方法:应用头颈部鳞癌细胞株HN-5,采用慢病毒转染方法构建CXCR4过表达的细胞株,用荧光显微镜观察基因表达情况;采用脂质体法将CXCR4-siRNA、integrinαVβ3-siRNA分别转染至HN-5细胞和CXCR4过表达的HN-5细胞中,Transwell小室实验检测HN-5细胞迁移能力,Western blot实验检测CXCR4、integrinαVβ3、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和黏附斑激酶(FAK)-非受体型酪氨酸蛋白激酶(SRC)-细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路相关蛋白的表达情况。结果:CXCR4过表达可上调HN-5细胞中integrinαVβ3表达水平,而抑制CXCR4表达可下调integrinαVβ3表达;CXCR4过表达可调控MMP-2和MMP-9促进癌细胞迁移,并激活FAK-SRC-ERK信号通路;而抑制integrinαVβ3表达可明显逆转CXCR4过表达对HN-5细胞的上述作用。结论:CXCR4过表达可通过integrinαVβ3促进头颈部鳞癌细胞迁移,其作用机制可能与激活FAK-SRC-ERK通路有关。

整合素β3在心血管疾病中的作用及研究进展

目前,心血管系统疾病的发病率和病死率逐年上升,严重危害了人们的生存和生活质量。整合素是一种跨膜的细胞黏附分子,可以介导细胞和细胞外基质(ECM)的双向信号传导,调节细胞的黏附、迁移、增殖、扩散和凋亡,并调控止血、血栓形成和免疫反应等病理生理过程。近年来的研究发现,整合素在心血管疾病的发生发展中起着重要作用,如动脉粥样硬化、心肌缺血再灌注损伤、心肌纤维化、心力衰竭、动脉夹层。我们将探讨整合素β3在心血管疾病中的作用和机制,为寻找心血管疾病的潜在治疗靶点提供参考。

β3AR通路活化诱导FGF21表达促进白色脂肪组织棕色化

目的通过活化β3AR-PKA通路,探讨成纤维细胞生长因子21(FGF21)对白色脂肪组织(WAT)棕色化的影响。方法C57BL/6小鼠分别采用标准小鼠饲料(16只)及45%千卡脂肪高脂饲料(16只)喂养。12周后,标准饲料喂养小鼠随机分为2组:对照组(NC组)注射0.9%氯化钠溶液,注射CL316,243组(CL组)注射CL316,243(1 mg/kg);高脂饲料喂养小鼠随机分为2组:高脂饮食组(HFD组)注射0.9%氯化钠溶液,高脂饮食注射CL316,243组(HFD+CL组)注射CL316,243(1 mg/kg)。14周后,Western blot检测WAT蛋白激酶A(PKA)及棕色化相关蛋白(FGF21、PGC-1α及UCP1)表达;观察肝脏及脂肪组织病理学变化。培养3T3-L1前脂肪细胞,诱导成熟后分为3组:NC组,DMEM培养液;CL组,培养液+10μmol/L CL316,243;SU+CL组,培养液+50μmol/L SU5402+10μmol/L CL316,243。48 h后,检测蛋白激酶A(PKA)及棕色化相关蛋白表达,免疫荧光检测线粒体表达。结果与NC组比较,CL组PKA水平及棕色化相关蛋白升高;与CL组比较,HFD+CL组PKA水平及棕色化相关蛋白降低;而HFD+CL组相关蛋白表达高于HFD组。体外实验,与NC组比较,CL组及CL+SU组PKA水平显著升高;CL+SU组较CL组棕色化相关蛋白表达降低;免疫荧光结果显示,与NC组比较,CL组线粒体表达增多;而SU+CL组线粒体表达较CL组减少。结论活化β3AR-PKA通路可增加WAT中FGF21分泌,进而上调PGC-1α及UCP1表达,促进WAT棕色化。

糖尿病视网膜病变患者血清Periostin、αvβ3、25(OH)D_(3)水平变化及相关性分析

目的基于血清骨膜蛋白(Periostin)、整合素αvβ3、25-羟基维生素D_(3)[25(OH)D_(3)]指标,探究糖尿病视网膜病变(DR)患者血清Periostin、αvβ3、25(OH)D_(3)水平变化及相关性。方法选取2020年5月至2022年5月于本院进行诊治的178例糖尿病(DM)患者作为研究对象,依据是否伴有DR进行分组,伴有DR为观察组,未伴有DR为对照组,观察组依据病变程度分为DR1组、DR2组、DR3组;观察两组患者临床生化指标及血清Periostin、αvβ3、25(OH)D_(3)水平;观察患者血清Periostin、αvβ3、25(OH)D_(3)水平之间的相关性;采用二元Logistic回归方程观察DR的影响因素。结果观察组SBP、FPG指标水平及Periostin、αvβ3水平明显高于对照组,25(OH)D_(3)水平显著低于对照组(P<0.05);患者25(OH)D_(3)与Periostin、αvβ3水平均呈负相关,Periostin与αvβ3水平呈正相关;且DR与Periostin、αvβ3水平变化呈正相关,与25(OH)D_(3)表达呈负相关;血清Periostin、αvβ3均为DR的危险因素,25(OH)D_(3)为DR的保护因素。结论血清Periostin、αvβ3、25(OH)D_(3)指标在DR患者中均有异常表达,且3者之间具有一定的相关性,同时3个指标与DR间均具有相关性,这可以帮助医师对DR患者进行早期诊断,从而有利于医护人员及时采取诊治措施,提高患者疗效,改善患者预后,为临床诊治DR提供一定依据。

lncRNA Meg3在全反式维甲酸和转化生长因子β3影响小鼠腭突间充质细胞增殖过程中的作用

目的:探索长链非编码RNA(lncRNA)Meg3在全反式维甲酸(atRA)和转化生长因子β3(TGF-β3)影响胎鼠腭突间充质细胞增殖过程中的作用。方法:分离、培养妊娠13 d胎鼠腭突间充质细胞。EdU法检测对照组(未处理)、atRA组(5μmol/L atRA)和TGF-β3组(10μg/L TGF-β3)处理48 h腭突间充质细胞增殖能力的变化。荧光原位杂交和实时荧光定量PCR法检测上述3组Meg3的定位和相对表达量。利用EdU实验检测Meg3 siRNA转染前后atRA和TGF-β3对腭突间充质细胞增殖的影响。结果:与对照组相比,atRA处理48 h可抑制腭突间充质细胞的增殖,TGF-β3处理48 h可促进腭突间充质细胞增殖(P<0.05)。与对照组相比,atRA可促进腭突间充质细胞中Meg3的表达,TGF-β3可抑制Meg3的表达(P<0.05)。Meg3基因沉默后,与对照组相比,Meg3 siRNA组、atRA和TGF-β3处理组胎鼠腭突间充质细胞增殖能力均增强(P<0.05)。结论:atRA对胎鼠腭突间充质细胞的增殖抑制作用可能主要通过Meg3介导,而TGF-β3对腭突间充质细胞增殖的促进作用可能与Meg3基因无直接关系。

雌激素对宫腔粘连子宫整合素αvβ3及胸苷磷酸化酶表达的影响

目的揭示整合素αvβ3及胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TYMP)在治疗宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)中的作用,探索雌激素改善IUA大鼠子宫内膜组织容受性的可能机制,为临床上治疗IUA提供方法。方法将18只SD雌性大鼠适应性喂养后,取6只做体外实验,其余12只随机分为模型组和治疗组,每组6只。所有大鼠于动情期以95%乙醇损伤双侧宫腔造模,造模成功后第14天,模型组开始予以生理盐水2 ml灌胃,治疗组予以雌激素2 ml灌胃。造模28天后处死模型组及治疗组大鼠,取出子宫经甲醛固定后行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色,观察各组大鼠子宫内膜组织形态,行免疫组织化学法观察整合素αvβ3及TYMP在各组宫腔中的表达情况。体外实验组大鼠于造模成功后第14天处死,将子宫取出分为2 cm大小一段,将子宫组织置于雌激素培养液中,在处理后的0min、30 min、45 min、60 min行Western blot检测整合素αvβ3及TYMP的蛋白表达水平。选取行宫腔镜检查发现宫腔形态正常的患者及IUA患者各15例,通过宫腔灌洗收集宫腔灌洗液,将采集的临床标本采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time-polymerase chain reaction,qPCR)检测临床标本中整合素αvβ3及TYMP mRNA的相对表达量。结果HE染色发现,与模型组相比,治疗组的宫腔形态得到了一定程度的改善,内膜厚度增加,间质中有大量排列整齐的腺体,可见新生血管。免疫组织化学染色结果提示,与模型组相比,治疗组的整合素αvβ3及TYMP的表达水平均明显升高。大鼠子宫体外实验雌激素处理30 min后TYMP的表达显著高于雌激素处理0min,差异具有统计学意义(P<0.05);雌激素处理30 min、45 min、60 min后整合素αvβ3的表达显著高于雌激素处理0min,差异均有统计学意义(P<0.05)。粘连子宫内膜中的整合素αvβ3及TYMP mRNA表达水平明显低于正常宫腔患者,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论整合素αvβ3及TYMP蛋白可作为子宫内膜容受性的评价指标。雌激素可能通过上调整合素αvβ3及TYMP蛋白的表达,促进子宫内膜生长,有效缓解IUA情况,改善子宫内膜容受性。

中国人群非综合征性唇腭裂与TGFβ3多态性的关系

目的 探讨转移生长因子 β3(TGFβ3)多态性与中国人群非综合征性唇腭裂 (NSCL±P)的相关性。 方法 应用聚合酶链反应 聚丙烯酰胺 (PCR PAGE)胶方法 ,以 10 3名健康体检者为对照 ,配对研究了 12 4名NSCL±P患者TGFβ3基因的多态性。 结果 对照组与患病组两者相比较 ,χ2 =2 4 .6 2 5 ,df=1,P <0 .0 1,在统计学上有显著性差异 ;有家族史与无家族史者比较 ,χ2 =2 5 .891,df=1,P <0 .0 1,在统计学上有显著性差异 ;其他配对比较均无统计学意义。结论 中国人群非综合征性唇腭裂的发生与TGFβ3基因多态性有相关性。

切除修复交叉互补基因1、乳腺癌易感基因1及微管蛋白β3检测在晚期肺鳞状细胞癌患者GP方案治疗中的指导意义

目的 探讨切除修复交叉互补基因1(ERCC1)、乳腺癌易感基因1(BRCA1)及微管蛋白β3(TUBB3)检测在晚期肺鳞状细胞癌患者吉西他滨+顺铂(GP)方案治疗中的指导意义。方法 选取74例行GP方案治疗的晚期肺鳞状细胞癌患者,采用免疫组化法检测ERCC1、BRCA1及TUBB3表达情况。比较不同临床特征晚期肺鳞状细胞癌患者的ERCC1、BRCA1及TUBB3表达情况。根据免疫组化结果对患者进行分组,3阳性为A组(n=16),2阳性+1阴性为B组(n=18),1阳性+2阴性为C组(n=19),3阴性为D组(n=21),比较4组患者的临床特征、总有效率及疾病控制率。结果 74例晚期肺鳞状细胞癌患者肺鳞状细胞癌组织中ERCC1、BRCA1、TUBB3阳性表达率分别为45.95%、55.41%、47.30%。不同性别、临床分期、分化程度肺鳞状细胞癌患者肺鳞状细胞癌组织中ERCC1、BRCA1及TUBB3阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。4组患者的性别、年龄、吸烟时间比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);4组患者的临床分期、分化程度比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。4组患者的总有效率和疾病控制率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01),其中D组患者的总有效率和疾病控制率均最高,A组均最低。结论 ERCC1、BRCA1、TUBB3联合检测能够为GP方案治疗晚期肺鳞状细胞癌提供参考,有助于筛选有效治疗人群,提高GP方案治疗的有效性。

G蛋白β3亚单位基因C825T多态性与高血压患者的肥胖无关

目的 探讨G蛋白β3亚单位基因C82 5T多态性与原发性高血压患者肥胖的相关关系。 方法 采用聚合酶链反应结合限制性内切酶片段长度多态分析方法检测 14 7例健康人和 32 1例高血压患者的G蛋白 β3亚单位C82 5T多态性 ,并测定高血压患者的体质指数、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇及空腹血糖浓度。结果 高血压组G蛋白β3亚单位C82 5T多态性中基因型频率 (CC为 2 8.7% ,CT为 5 2 % ,TT为19.3% )、等位基因频率 (C为 5 4 .6 72 % ,T为 4 5 .33% )与正常对照组基因型频率 (CC为 2 7.2 % ,CT为 4 6 .9% ,TT为 2 5 .9% )、等位基因频率 (C为 5 0 .7% ,T为 4 9.3% )比较无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;CC基因型患者的体质指数、血脂水平与CT +TT基因型患者比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 G蛋白 β3亚单位基因C82

恩度联合放疗对 Lewis 肺癌小鼠 MVD 及αvβ3 mRNA 表达的影响

目的：观察恩度联合放疗对Lewis肺癌的生长抑制作用，检测肿瘤中微血管密度（ MVD）及αvβ3 mRNA的表达，探讨其在肿瘤血管“正常化”及协同抑瘤作用中的可能机制。方法荷瘤小鼠随机分成4组：空白对照组（NC），恩度组（ES），放射治疗组（RT），恩度联合放疗组（ES＋RT）。从开始治疗后隔日测量肿瘤体积，绘制生长曲线。免疫组化法及RT-PCR分别检测各组肿瘤组织中MVD及αvβ3 mR-NA的表达情况。结果（1）ES＋RT组的抑瘤作用最为明显；（2）与空白对照组相比，RT组随时间延长微血管计数逐渐增加，ES组及ES＋RT组下降，其中ES＋RT组比ES组下降更为明显，差异有统计学意义（P＜0．05）；（3）与空白对照组相比，RT组αvβ3 mRNA表达水平升高，而ES及ES＋RT组则降低，ES＋RT组降低更为明显，ES组在第6天扩增倍数最低，各治疗组在d8～d12均有统计学差异（ P＜0．05）。结论恩度联合放疗显著抑制Lewis肿瘤的生长；恩度能使肿瘤MVD明显减少，形态趋于正常；恩度可下调αvβ3 mRNA的表达，改善肿瘤组织紊乱的血管网，降低乏氧，可能是放疗增敏的机制之一。

CHO细胞模型中整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响

目的:探讨整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响。方法:利用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞模型建立共表达人类野生型整合素αⅡb和野生型β3或突变型β3ΔNITY(β3胞浆段缺失NITY基序)稳转的细胞株,通过细胞在固相化纤维蛋白原上的黏附及伸展试验检测各稳转细胞株的黏附及伸展功能,通过免疫共沉淀方法检测蛋白相互作用。结果:成功建立了CHO-αⅡbβ3和CHO-αⅡbβ3ΔNITY细胞株,稳定表达野生型整合素αⅡbβ3的CHO细胞具有在固相化纤维蛋白原上的黏附和伸展能力,与CHO-αⅡbβ3细胞株相比,CHO-αⅡbβ3ΔNITY细胞株的黏附能力减弱,但是黏附后的伸展能力无明显改变。免疫共沉淀结果显示,kindlin-2能够结合野生型整合素β3,但与突变型整合素β3结合的量显著减少。结论:整合素β3胞浆段缺失NITY基序引起细胞黏附功能受损,这种缺失突变导致整合素β3与kindlin-2蛋白的结合受到抑制,从而部分抑制了整合素β3的信号转导。

糖基转移酶β3GnT8/β3GalT7在多种肿瘤细胞中的表达

目的:探讨一种新的糖基转移酶β3GnT8/β3GalT7在多种肿瘤细胞中的mRNA表达情况。方法:运用半定量RT-PCR方法研究人β3GnT8/β3GalT7基因在11种恶性肿瘤细胞中的表达谱。结果:β3GnT8/β3GalT7基因在多种肿瘤细胞株中都有表达,在A549细胞中的表达最高,在SGC7901细胞中中度表达,在白血病细胞中的表达较低。结论:β3GnT8/β3GalT7基因在11种肿瘤细胞中的表达有显著差异。