清心开窍方对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆及海马CA1区Akt、GSK3α、βAPP、Aβ表达的影响

目的:探讨清心开窍方对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力、海马CA1区神经元形态学的改变,以及对Akt、GSK3α、βAPP、Aβ蛋白表达的影响。方法:选取50只3月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠,随机分为模型组、多奈哌齐组(1.67 mg·kg^(-1))、清心开窍方高、中、低剂量组(每日给药剂量分别为19、9.5、4.75 g·kg^(-1)),另取10只同背景同性别同月龄的C57BL/6J小鼠作为对照组,对照组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,1次/d,连续灌胃12周。采用Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力,透射电镜观察小鼠海马CA1区神经元超微结构,尼氏染色法观察小鼠海马CA1区神经元损伤情况,免疫组织化学染色法检测海马CA1区Akt、GSK3α、βAPP、Aβ蛋白的表达情况。结果:与对照组比较,模型组APP/PS1双转基因小鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),穿台次数减少,其海马CA1区神经元超微结构出现严重损伤,锥体细胞数量减少,排列紊乱,尼氏体着色变浅,Akt蛋白表达减少(P<0.01),GSK3α、βAPP、Aβ表达增加(P<0.01);与模型组比较,清心开窍方干预组逃避潜伏期均明显缩短(P<0.01),穿台次数增多,同时比较小鼠在原平台停留的时间和路程百分比均明显增加(P<0.05;P<0.01),其神经元结构较完整,核膜清晰,胞浆内核糖体丰富,线粒体数量增多,且嵴结构完整,锥体细胞数量增多,排列紧密,尼氏体着色较深,同时Akt蛋白表达增加(P<0.01;P<0.05),GSK3α、βAPP、Aβ表达减少(P<0.01;P<0.05)。结论:清心开窍方能够改善APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆能力,其机制可能与Akt/GSK3α介导的信号通路相关,它能够激活Akt,抑制GSK3α,降低βAPP、Aβ的生成,减少神经元损伤。

老年痴呆患者miR-26b、βAPP及Hcy的表达及临床意义

目的探讨分析老年痴呆患者miR-26b、βAPP及Hcy的表达及临床意义。方法选取2018年6月~2019年12月我院收治的88例老年痴呆患者为研究组;另选同时期体检正常的88例健康人士为对照组;测定其血清miR-26b、βAPP及Hcy水平。比较两组研究对象的miR-26b、βAPP及Hcy水平,并分析不同指标水平与疾病严重程度的相关性。结果研究组miR-26b水平明显低于对照组,βAPP及Hcy水平明显高于对照组(P<0.05);不同严重程度患者的血清miR-26b表达水平依次为:轻度>中度>重度,表达水平两两之间比较有明显差异(P<0.05);血清βAPP及Hcy表达水平依次为:轻度<中度<重度,两两之间比较有差异(P<0.05);βAPP及Hcy水平与疾病严重程度呈正相关,miR-26b水平与疾病严重程度呈负相关(P<0.05)。结论 miR-26b在老年痴呆患者体内低表达,与疾病严重程度呈负相关;βAPP及Hcy在老年痴呆患者体内高表达,与疾病严重程度呈正相关。

清心开窍方对APP/PS1双转基因小鼠海马区AKT/GSK3α/βapp/Aβ表达的影响

目的：探讨清心开窍方对APP/PS1双转基因小鼠海马AKT（protein kinase B,PKB,Akt）GSK3α（Glycogen synthase kinase 3α）、βAPP（β-amyloid precursor protein,βAPP）、Aβ（β-amyloid,Aβ）表达的影响。方法：选取60只APP/PS1双转基因小鼠,按随机数字表法随机分为模型组、多奈哌齐组（1.67 mg/kg）、清心开窍方高剂量组（19 mg·kg-1·d-1）,清心开窍方中剂量组（9.5 mg·kg-1·d-1）,清心开窍方低剂量组（4.75 mg·kg-1·d-1）,另选取同背景同性别C57BL/6J小鼠为对照组,对照组、模型组给予等量生理盐水灌胃,各组每天干预1次,连续灌胃12周。RT-PCR检测AKT、GSK3α、βAPP、AβmRNA的表达,Western Blot法检测AKT、GSK3α、βAPP、Aβ蛋白表达量,硫磺素T染色法测定小鼠大脑皮层及海马区老年斑的数量。结果：实时荧光定量PCR和Western Blot结果显示,模型组中GSK3α、βAPP、AβmRNA的表达最高,与对照组及其他各组相比有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）,且其表达量随清心开窍方剂量的增加而减少;模型组中AKT的表达量最低,与对照组及其他各组相比有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）,且其表达量随清心开窍方剂量的增加而增加。硫磺素T染色结果显示,模型组中老年斑数量最多,与对照组及其他各组相比有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论：清心开窍方能够促进APP/PS1双转基因小鼠脑内AKT的表达,并减少GSK3α、βAPP和Aβ的表达,减少APP/PS1双转基因小鼠脑内皮质及海马区的老年斑数量。