HPLC与基因检测联合应用对地贫诊断的临床价值

目的探讨高效液相色谱法(HPLC)和基因检测诊断地中海贫血的临床价值。方法收集平均红细胞体积(M CV)<80 fl,平均红细胞血红蛋白含量(M CH)<26 pg的EDTA-K2抗凝的血常规标本共174例份,用HPLC方法测定血红蛋白亚型HbA2含量,对地贫进行非基因检测;提取全血DNA,经PCR方法扩增后,采用琼脂糖凝胶电泳对疑似α-地贫患者标本常见缺失类型-S-EA、-3α.7、-4α.2进行检测,采用反向点杂交(RDB)法对疑似β-地贫患者标本常见突变类型CD 41-42M,-28M,IV S-II-654M,CD 71-72M等进行基因检测。结果174例中HbA2正常27例,异常147例,106例HbA2≤2.5%,疑似α-地贫,41例HbA2≥3.5%,疑似β-地贫,对疑似α-地贫和β-地贫的患者标本分别进行基因检测,其中α-地贫66例,34例正常(未见检测的三种缺失),5例诊断不明未检出。结论采用HPLC和基因检测法对诊断α-地贫检出率差异具有显著性,对诊断β-地贫具有很高的符合率。HbA2的异常程度与是否地贫并无相关性。HPLC适用于β-地贫产前诊断和遗传病咨询,α-地贫则需进行基因检测提高诊断的准确率。

α-地中海贫血患者的α-珠蛋白基因组织的分析

α-地中海贫血是由于α-珠蛋白基因全部和部分缺失所致的一种遗传性溶血性贫血综合征。本文从重组质粒pHα_2中提取和纯化α_2片段(1.6kb),以α-^(32)p-dCTP标记做珠蛋白基因探针对Hb-H病人和Hb-Bart水肿综合征的血细胞DNA进行限制性内切酶谱分析。用HindⅢ和BglⅡ酶解Hb-H病人的非缺失型分别得16.4、4.5和3.8Kb三个特异片段和12.5、7.5二个片段。而Hb-H缺失型病人分别得到16.4、4.5和7.5或16Kb特异的α-基因片段。酶解Hb-Bart胎儿血DNA则没有α-基因特异片段。

重型β地贫儿童血清不规则抗体筛查与鉴定分析

目的了解重型β地中海贫血(地贫)儿童血清中不规则抗体的发生率及其特异性抗体构成。方法对选取的142例反复输血的β地贫双重杂合子(或纯合子)进行不规则抗体筛查和鉴定检测,统计分析其检出率及构成比。结果不规则抗体筛查阳性率为9.2%,具体分布如下:Rh系统11例(84.6%),其中抗-E最多(占30.8%),P系统1例(7.7%);Kidd系统1例(7.7%);而产生不规则抗体的重型β地贫的基因型中CD41-42/CD41-42比例最高(占30.8%)。结论反复输血的重型β地中海贫血患儿不规则抗体阳性率较高,要特别注意对Rh系统不规则抗体的检查。

不同基因型地中海贫血患儿血清铁代谢指标的研究

目的探讨血清铁(SI)、总铁结合力(TIBC)、转铁蛋白(Tf)的检测在地中海贫血(地贫)中的临床应用价值。方法对选取的9例静止型α地贫,56例标准型α地贫,26例血红蛋白H病,40例β地贫杂合子(β+地贫),56例β地贫双重杂合子(或纯合子)(β0地贫),45例缺铁性贫血(IDA)患儿以及70例健康儿童(对照组)血清SI、TIBC、Tf进行检测。结果β0地贫组SI水平明显高于其余各组(P<0.01),而TIBC水平则明显低于其余各组(P<0.05或0.01),但Tf水平无差异(P>0.05);静止型α地贫、标准型α地贫组SI、TIBC水平与对照组相近(P>0.05),但Tf水平明显低于对照组(P<0.01);血红蛋白H病组TIBC、Tf水平明显低于对照组(P<0.01),但SI与之相近(P>0.05)。结论SI和TIBC用于监测地贫患儿的铁负荷优于Tf。对于SI异常增高和TIBC明显降低的的小细胞性贫血患儿,诊断为β0地贫的可能性大。