小青龙汤对β_(2)肾上腺素能受体减敏哮喘小鼠RhoGDI_(2)/GRK_(2)/β-arrestin信号传导的影响

目的探讨小青龙汤对β_(2)肾上腺素能受体(β_(2)-AR)减敏哮喘小鼠的可能作用机制。方法30只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、小青龙汤组(中药组)、地塞米松组及小青龙汤加地塞米松组(中药加地塞米松组),每组6只。除空白对照组外,其余各组小鼠通过用卵蛋白(OVA)致敏激发及沙丁胺醇反复刺激来进行造模。造模后自激发第1天起,小青龙汤组每天灌服小青龙汤0.76 g/100 g,地塞米松组每天以腹腔注射地塞米松0.07 mg/100 g,小青龙汤加地塞米松组每天灌服小青龙汤及腹腔注射地塞米松,剂量同前,连续7 d。末次给予OVA激发后24 h,采用EMK动物肺功能测量系统监测各组小鼠的气道阻力,苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠肺组织病理情况,逆转录PCR(RT-PCR)分别检测肺组织中β_(2)-AR、Rho鸟苷酸解离抑制因子2(RhoGDI_(2))、β-AR激酶(GRK_(2))、β-抑制蛋白(β-arrestin)的mRNA表达,Western blot测定肺组织中β_(2)-AR、RhoGDI_(2)、GRK_(2)、β-arrestin含量。结果病理组织学观察发现β_(2)-AR减敏哮喘小鼠气道炎症浸润,各级支气管管壁显著增厚,管道狭窄,且较空白组的病理表现明显加重,经给药后均有不同减轻,以小青龙汤加地塞米松组最优;小鼠气道阻力测定显示随着乙酰甲胆碱(Mch)给药浓度的增加,模型组气道阻力较空白组逐渐增加,给药后各组均有下降趋势,以中药加地塞米松组下降最为明显(P<0.05);肺组织中β_(2)-ARmRNA及β_(2)-AR的表达明显下降,经药物干预后两者均有不同程度的上升,其中肺组织中β_(2)-ARmRNA的表达以小青龙汤加地塞米松组最优,而小青龙汤与地塞米松组之间差异无统计学意义;经造模后与空白组相比,小鼠肺组织中RhoGDI_(2)、GRK_(2)、β-arrestin及它们的mRNA的表达均有不同程度的增强(P<0.05),经药物干预后与模型组相比,小青龙汤组、地塞米松组及小青龙汤加地塞米松组中RhoGDI_(2)、GRK_(2)、β-arrestin及它们的mRNA的表达均下降(P<0.05),且小青龙汤组与地塞米松组之间无明显差异(P>0.05)。结论小青龙汤对β_(2)-AR减敏哮喘小鼠的作用机制可能通过影响肺组织β_(2)-AR的表达及RhoGDI_(2)/GRK_(2)/β-arrestin信号传导来实现,且效果与地塞米松相当。

β_(2)-AR减敏哮喘小鼠模型的建立及验证

目的:建立β_(2)-AR减敏哮喘小鼠模型并对其进行验证。方法:SPF级雄性BALB/c30只小鼠随机分为空白组、普通哮喘模型组、β_(2)-AR减敏哮喘模型组。建立普通哮喘模型,并在此基础上采用雾化吸入同时腹腔注射沙丁胺醇的方法进行β_(2)-AR减敏哮喘模型的制备,造模21 d末次激发后,测定小鼠气道阻力、ELISA法检测小鼠血清IgE含量,HE染色观察肺组织炎细胞浸润程度,Western blot法检测肺组织中β_(2)-AR含量,RT-PCR检测肺组织中β_(2)-ARmRNA的表达。结果:与空白组相比,随着乙酰甲胆碱(Mch)浓度升高,OVA诱导的各组气道阻力升高,β_(2)-AR减敏哮喘模型组气道阻力增加更加显著(P<0.05);与空白组相比,普通哮喘组及β_(2)-AR减敏哮喘模型组IgE水平上升(P<0.01);病理组织学观察发现β_(2)-AR减敏哮喘小鼠气道炎症浸润,黏液过度分泌及胶原明显沉积,且均较普通哮喘模型组的病理表现显著加重;β_(2)-AR减敏哮喘小鼠模型肺组织中β_(2)-AR含量及β_(2)-ARmRNA的表达水平较空白组及普通哮喘模型组均明显下降(P<0.05)。结论:β_(2)-AR减敏哮喘小鼠模型构建成功,且造模周期短。

β_2-肾上腺素受体激动剂对支气管哮喘急性期患者β_2-受体功能的影响

目的:探讨支气管哮喘急性期患者用β2-肾上腺素受体激动剂(β2-AG)治疗后β2-肾上腺素受体(β2-AR)功能的变化情况。方法:在治疗前、β2-AG治疗1周、不同方法继续治疗1周后共3次抽取血标本,采用放免法测定外周血环磷酸腺苷(cAMP)含量。结果:治疗1周后,cAMP较治疗前升高,差异有显著性;治疗2周后,A组明显下降,另两组均有上升,与治疗前、治疗1周后比较差异均有显著性(P<0.05)。结论:支气管哮喘患者在单用β2-AG治疗2周出现β2-AR功能下降,糖皮质激素、茶碱能上调β2-AR功能。