IgA肾病患者外周血γδT细胞分泌TGF-β1的功能

目的研究IgA肾病患者外周血γδT细胞分泌TGF-β1的功能。方法用流式细胞仪分析外周血γδT细胞比率并检测血清IgA的水平,以抗TCRγδ单克隆抗体(mAb)固相法,体外选择性地扩增γδT细胞。在体外培养的条件下,以抗CD3抗体刺激48h后,用ELISA法测定培养体系中TGF-β1的水平。结果IgA肾病患者外周血γδT细胞的比例升高,并与血清IgA的水平呈正相关。用抗TCRγδmAb固相法能获得高纯度的γδT细胞。经抗CD3抗体刺激的IgA肾病患者的γδT分泌TGF-β1的量比正常对照组明显升高。结论IgA肾病患者的γδT细胞可通过大量分泌TGF-β1参与该病的发生、发展。

子宫内膜异位症患者NK细胞和γδT淋巴细胞分析

目的 :探讨子宫内膜异位症患者外周血、腹腔液中NK细胞和γδT淋巴细胞的数量和杀伤功能。方法 :取 15例子宫内膜异位症患者的外周血和腹腔液 ,用荧光染色法、流式细胞术和酶标法等测定NK和γδT细胞的数量和杀伤功能。取 10例非内异症者外周血和腹腔液作为对照。结果 :1 与对照组相比 ,病例组外周血和腹腔液中的NK细胞数量无明显改变 ,γδT细胞数量在外周血中无明显差异 ,但在腹腔液中明显增加 (P <0 0 5 )。病例组中外周血和腹腔液之间NK和γδT细胞数量均有差异 ,表现为腹腔液中两种细胞所占的百分比明显增高 (P <0 0 5 )。 2 病例组与对照组相比 ,除外周血的γδT细胞外 ,外周血的NK细胞及腹腔液的NK和γδT细胞的功能均明显下降 (P <0 0 5 )。同一个体中 ,病例组腹腔液中的NK和γδT细胞的功能比外周血中的明显降低 (P 均 <0 0 5 )。结论 :内异症患者NK和γδT细胞杀伤功能的下降可导致机体清除异位子宫内膜细胞的功能下降 。

具有生物学活性的hMSH2蛋白在昆虫sf9细胞中的表达

目的表达具有生物活性的hMSH2蛋白。方法用搭桥PCR获得hMSH2全长基因,构建pAcGP67B-hMSH2重组质粒,与AcNPV昆虫病毒DNA共转染昆虫细胞sf9,表达hMSH2蛋白(同时构建pET30a-hMSH2重组质粒,用大肠杆菌表达hMSH2蛋白);Western blot鉴定hMSH2蛋白;ELISA,流式细胞仪检测蛋白与OT3肽及TCRγδ的结合特异性;检测细胞增殖(MTT法)和细胞因子分泌,观察重组蛋白体外活化γδT细胞的生物学功能。结果克隆到正确的hMSH2基因,并将其插入到表达载体pAcGP67B和pET30a中的正确位置。经Western blot鉴定获得了hMSH2蛋白。用昆虫病毒表达载体系统表达的hMSH2蛋白能与其探针肽OT3及TCRγδ特异性结合,并能在体外刺激γδ细胞增殖及分泌IFN-γ,其活性更优于原核表达的蛋白。结论成功利用昆虫病毒载体表达系统得到了比原核大肠杆菌表达系统更具生物活性的hMSH2蛋白。

Graves病患者T淋巴细胞亚群水平的变化

目的 观察Graves病患者T细胞亚群水平变化。方法 运用间接免疫荧光法测定 19例Graves病患者CD3、CD4、CD8、Tγδ细胞水平变化。结果 CD3、CD4、CD4/CD8数值较正常对照组显著减低 (P <0 .0 1) ,CD8数值与正常对照组相比差别无显著性 (P >0 .0 5 ) ,Tγδ细胞较正常对照组显著升高 (P <0 .0 1)。结论 Graves病患者的细胞免疫失衡 ,尤其是Tγδ细胞异常增高可能为Graves病患者发病原因之一。

系统性红斑狼疮小鼠肾组织γδT细胞TGF-β1表达研究

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)MRL/lpr小鼠肾组织γδT淋巴细胞分泌细胞因子TGF-β1的功能。方法:流式细胞仪分析MRL/lpr小鼠外周血、肾组织γδT淋巴细胞比例,并体外选择性扩增γδT细胞,在体外培养条件下,测定培养体系中细胞因子TGF-β1的表达。结果:MRL/lpr小鼠外周血、肾组织中γδT淋巴细胞比例升高,肾组织中γδT淋巴细胞能异常分泌TGF-β1细胞因子。结论:肾组织γδT细胞可能通过分泌TGF-β1在狼疮性肾炎发病中起着免疫调节的保护性功能。

雷公藤多苷对IgAN大鼠血清IgA水平及γδT细胞表达的影响

目的研究雷公藤多苷对IgA肾病大鼠外周血γδT细胞表达影响。方法尾静脉注射葡萄球菌肠毒素诱导IgA肾病大鼠模型,并予雷公藤多苷干预治疗,同时给予强的松对照,运用流式细胞仪检测IgAN大鼠用药前后外周血γδT细胞比率;放射免疫法检测血清IgA水平。结果雷公藤多苷能抑制血清IgAN外周血γδT细胞表达从而抑制血清IgA的升高。结论通过抑制血清IgAN外周血γδT细胞表达,从而降低血清IgA水平,是雷公藤多苷治疗IgAN的作用机制之一。

雷公藤多苷对IgAN大鼠外周血γδT细胞分泌TGF-β1功能的影响

目的:研究雷公藤多苷对IgA肾病(IgAN)大鼠外周血γδT细胞分布及表达转化生长因子β1(TGF-β1)功能的影响。方法:复制IgAN大鼠模型,并予雷公藤多苷干预治疗,同时给予泼尼松对照,运用流式细胞仪检测各组用药前后外周血γδT细胞比率、放射免疫法检测血清IgA水平;以抗TCRγδ单克隆抗体(mAb)固相法,体外选择性地扩增γδT细胞。在体外培养的条件下,以抗CD3抗体刺激48h后,用ELISA法测定培养体系中TGF-β1的表达。结果:雷公藤多苷能抑制血清IgAN外周血γδT细胞与血清IgA的升高,同时还能抑制γδT分泌TGF-β1的过度分泌。结论:通过降低血清IgAN外周血γδT细胞与血清IgA水平,同时抑制γδT分泌TGF-β1的过度分泌,可能是雷公藤多苷治疗IgAN的作用机制之一。

IgA肾病大鼠外周血、肾组织γδT细胞分泌TGF—β1功能的实验研究

目的研究IgA肾病大鼠外周血、肾组织γδT淋巴细胞分泌细胞因子TGF—β1的功能。方法流式细胞仪分析IgA肾病大鼠外周血、肾组织78T淋巴细胞比例以及血清IgA水平，并体外选择性扩增γδT细胞，在体外培养条件下，测定培养体系中细胞因子TGF—β1的表达。结果IGA肾病大鼠外周血、肾组织中γδT淋巴细胞比例升高，并能异常分泌TGF—β1细胞因子。结论γδT细胞可能是通过分泌TGF—β1参与IgA肾病的发生与进展。

吸入免疫耐受机制的研究进展

吸入耐受是通过吸入抗原诱导的免疫耐受。其可能机制涉及到主动抑制、克隆缺失、克隆无反应性、γδ细胞、CD4 0和CD4 0L及鼻相关引流淋巴结的特性。吸入免疫耐受对过敏性疾病及自身免疫性疾病的治疗提供了一种新的途径 。