大鼠背根神经节γ氨基丁酸A受体在慢性神经痛中的作用

目的观察调控大鼠背根神经节(DRG)γ氨基丁酸A(GABA-A)受体的功能对神经痛动物痛阈的影响,探讨DRG GABA-A受体在神经痛发病机制中的作用。方法选用成年雌性SD大鼠50只,随机均分为五组,制作脊神经结扎模型,A组脊神经结扎术后立即于L5DRG局部运用蝇蕈醇20μg(50μl);B组予荷包牡丹碱0.15μg(50μl);C组给予蝇蕈醇20μg+荷包牡丹碱0.15μg;D组于脊神经结扎术后5dDRG局部注射蝇蕈醇20μg;E组注射生理盐水50μl。于术前1d至术后10d,每天行行为学检测大鼠术侧后爪机械痛阈和热痛阈。结果 L5脊神经结扎术后动物出现跛足,舔脚等神经痛症状。E组机械痛阈于术后1d开始下降,持续至术后10d,热痛阈于术后3d开始下降,持续至术后10d。与E组比较,A组术后各时点机械痛阈和热痛阈明显升高(P<0.05),B组术后1d机械痛阈和热痛阈即明显下降,并持续至术后10d(P<0.05),且明显低于E组(P<0.05)。D组术后6d,机械痛阈和热痛阈开始上升(P<0.05),于术后7d达到高峰,术后8d机械痛阈和热痛阈开始下降。结论 DRG GABA-A受体在神经痛的发生中起重要作用,激动GABA-A受体可以预防神经痛的发生,但对已经发生的神经痛只起到暂时缓解的作用。

复方氯胺酮口服液对鼠小脑N-甲基D-天冬氨酸受体1和γ氨基丁酸A受体的影响

目的观察大鼠服用复方氯胺酮口服液(CKOS)后不同时点行为变化及小脑中N甲基D天冬氨酸受体1(NMDAR1)和γ氨基丁酸A受体(GABAAR)的分布,探讨其口服液对鼠小脑NMDAR1和GABAAR的影响及其作用机制。方法采用免疫组化、原位杂交技术检测SD大鼠服用CKOS后不同时点NMDAR1和GABAAR在小脑Purkinje细胞的表达情况。结果0点处(正常对照)NMDAR1在小脑Purkinje细胞表达最多;随着药效的增加,NMDAR1在小脑Purkinje细胞上的表达逐渐减少,30min时NMDAR1表达最低值,120min时Purkinje阳性细胞逐渐恢复,360min恢复接近正常。而GABAAR与NMDAR1的表达方式正相反,GABAAR在Prukinje细胞上的表达随着药效的增强而增加,又随着药效减低而减少。结论CKOS对鼠小脑NMDAR1在Purkinje细胞上的表达呈剂量依赖抑制,应产生不协调运动。但GABAAR在Purkinje细胞上的表达呈剂量依赖增强,抑制不协调运动。CKOS对小脑的作用为促使大鼠协调运动。

四氢孕酮介导γ氨基丁酸A受体敏感性与肝主疏泄相关性研究

以肝主疏泄调畅情志理论为基础,从典型情志病经前烦躁障碍切入,通过汇总国内外研究进展,围绕四氢孕酮水平波动及四氢孕酮介导γ氨基丁酸A受体敏感性变化,研究肝疏泄失常微观机制。四氢孕酮的特殊情绪调节效应与情志病证发病具有一定相关性,肝疏泄失常人群存在四氢孕酮敏感性差异。四氢孕酮介导γ氨基丁酸A受体敏感性差异影响经前烦躁障碍发病,是肝疏泄失常引发情志病证的微观机制之一。四氢孕酮介导γ氨基丁酸A受体敏感性是机体应对四氢孕酮水平波动的反应能力的改变。

罗格列酮对哮喘小鼠肺组织γ氨基丁酸A受体α亚单位及MUC5AC表达的影响研究

目的探究罗格列酮对哮喘小鼠肺组织γ氨基丁酸A受体α亚单位(GABAARα)及MUC5AC表达的影响。方法 2017年12月—2018年1月,将50只健康雌性BABL/C小鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松组、罗格列酮组及联合治疗组,每组10只。动物模型制备分为致敏、激发、取材3部分,哮喘组、地塞米松组、罗格列酮组及联合治疗组小鼠均进行致敏、激发,其中地塞米松组小鼠于激发前30 min给予地塞米松雾化吸入,罗格列酮组小鼠给予罗格列酮雾化吸入,联合治疗组小鼠给予地塞米松联合罗格列酮雾化吸入;对照组小鼠在致敏、激发阶段均给予0.9%氯化钠溶液。最后1次激发后24 h取小鼠肺组织进行检测。采用苏木素-伊红染色(HE染色)观察肺组织病理学表现,采用蛋白质印迹法检测肺组织GABAARα及MUC5AC蛋白浓度,采用聚合酶链反应检测肺组织GABAARα及MUC5AC mRNA相对表达量。结果 (1)HE染色结果显示,哮喘组小鼠气道黏膜上皮局部脱落,黏膜下充血水肿,支气管壁及血管壁周围有较多炎性细胞浸润;地塞米松组、罗格列酮组及联合治疗组小鼠上述表现较哮喘组减轻。(2)哮喘组、地塞米松组、罗格列酮组及联合治疗组小鼠肺组织GABAARα、MUC5AC蛋白浓度及其mRNA相对表达量高于对照组,地塞米松组、罗格列酮组及联合治疗组小鼠肺组织GABAARα、MUC5AC蛋白浓度及其mRNA相对表达量低于哮喘组(P<0.05);而地塞米松组、罗格列酮组及联合治疗组小鼠肺组织GABAARα、MUC5AC蛋白浓度及其mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论罗格列酮对哮喘小鼠肺组织GABAARα、MUC5AC表达的影响与地塞米松及地塞米松联合罗格列酮相当,其可能通过下调GABAARα、MUC5AC表达而减少哮喘小鼠气道黏液过度分泌。

鞘内注射右美托咪定对神经病理性疼痛大鼠DRG神经元GABA_A受体激活电流的影响

目的:观察鞘内注射右美托咪定对神经病理性疼痛大鼠背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)神经元GABA_A受体激活电流的影响。方法 :鞘内置管成功的雄性SD大鼠36只,体重180～220g,采用随机数字表法随机分为3组(n=12):假手术组(S组)、神经病理性疼痛组(CCI组)、右美托咪定+神经病理性疼痛组(D组)。S组和CCI组鞘内注射生理盐水每日10μl/次,D组鞘内注射右美托咪定2μg/kg,生理盐水稀释至10μl,每日1次,持续至术后14 d。各组于术前1 d (T0),术后3、5、7、10、14 d(T1-5)时测试热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency, TWL)。于术后T5时测试完TWL后处死大鼠,在急性分离的DRG细胞上,运用全细胞膜片钳技术,记录不同浓度药物作用下各组背根神经节细胞GABA_A受体激活电流的变化。结果 :(1)与S组比较,CCI组和D组T1-5时TWL均缩短(P <0.05);与D组比较,CCI组T1-5时TWL均缩短(P <0.05)。(2)GABA (0.1～1000.0μmol/L)可以使85.7%(102/119)的DRG神经元产生浓度依赖性的内向电流,而且这种内向电流能被GABA_A受体选择性拮抗剂荷包牡丹碱(100μmol/L)所阻断。(3)CCI组在不同浓度(0.1～1000.0μmol/L) GABA激活电流幅值均小于S组和D组(P <0.05);D组在不同浓度(0.1～1000.0μmol/L) GABA激活电流幅度小于S组(P <0.05)。结论:右美托咪定通过增强GABA_A受体介导的突触前抑制作用,可能是其缓解神经病理性疼痛的机制之一。

复方氯胺酮对恐惧幼鼠脑杏仁核NR2bR和GABAaR蛋白表达的影响

目的 观察复方氯胺酮口服液对幼鼠的恐惧行为反应和大脑杏仁核甲基-D-天冬氨酸2b受体（N-methyl-D-aspartate 2B Receptor, NR2bR）和γ-氨基丁酸a受体（γ-aminobutyric acid A Receptor, GABAaR）蛋白表达影响.方法 用木僵行为实验对幼鼠恐惧状态下的行为学变化进行评分,用免疫组织化学方法检测复方氯胺酮口服液对在恐惧伤害性刺激下的幼鼠的大脑杏仁核NR2b和GABAa受体受体蛋白表达的影响.结果 模型组与对照组比较,木僵反应评分明显增加（P〈0.01）,GABAaR的表达增加（P〈0.05）,NR2b的表达减少（P〈0.05）;各用药组与模型组比较,木僵反应评分明显降低,复方氯胺酮组（CKOS组）和咪达唑仑组（M组）的GABAa的表达增加,CKOS组和氯胺酮组（K组）的NR2b的表达减少;各用药组之间的比较,木僵反应评分CKOS组高于M组,M组高于K组,GABAa的表达中CKOS组高于M组,NR2b的表达中CKOS组低于K组.结论 复方氯胺酮口服液具有抑制幼鼠恐惧条件反射产生的作用.

GABRP基因多态性与系统性红斑狼疮发病易感性的相关性

目的:明确γ氨基丁酸A受体π亚基(GABRP)基因单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮(SLE)发病易感性之间的关系。方法:PCR扩增111例SLE患者和120名正常对照者外周血目的基因片段,通过二代测序对目的基因片段进行测序检测rs929763位点和rs3805455位点的多态性。结果:GABRP rs929763TT、AT基因型频率在SLE组与对照组中分别为99.1%、0.9%和95.8%、4.2%,差异无统计学意义(P>0.05)。GABRP rs3805455AG、AA、GG基因型频率在SLE组与对照组中分别为45.0%、9.9%、45.0%和45.8%、8.3%、45.0%,差异无统计学意义(P>0.05),A、G等位基因频率在SLE组与对照组中分别为32.4%、67.5%和50.0%、50.0%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GABRP基因SNP位点rs929763和rs3805455多态性可能与SLE的发病无关。

黄芩苷对脑出血大鼠脑内GAT-1和GABA_AR表达的作用

目的:观察黄芩苷对出血性大鼠脑内γ氨基丁酸运载蛋白1(GAT-1)和γ氨基丁酸A受体(GABAAR)表达的影响,探讨黄芩苷对大鼠脑损伤的保护机制。方法:采用胶原酶+肝素钠法诱导脑出血模型,并随机分为假手术组、对照组和给药组,分别灌胃给予生理盐水和黄芩苷。给药后12 h,24 h,72 h和7 d取出各组大鼠损伤侧脑组织制作冰冻切片进行免疫组化染色,测定标本中GAT-1和GABAAR阳性神经元的数目以及平均光密度值。结果:脑出血后GAT-1表达上调,GABAAR表达在出血后12 h有所上调,24 h后开始下降,d 7时GAT-1和GABAAR表达恢复到与假手术组比较无显著差异的水平。与模型组比较,给药组GAT-1阳性神经元数目明显下降,GABAAR阳性神经元数目明显增多。平均光密度值与阳性神经元数目变化成正相关。结论:GAT-1和GABAAR参与脑出血后神经元损伤的病理生理过程,黄芩苷可能通过抑制GAT-1的表达、增加GABAAR的表达挽救受损神经元。