胆碱能受体激动剂逆转天疱疮棘层松解的机制研究

目的 研究胆碱能受体激动剂对天疱疮棘层松解的逆转作用及其机制.方法 将HaCaT细胞与寻常型天疱疮IgG（PV-IgG）共培养建成天疱疮细胞模型后,再加入胆碱能受体激动剂卡巴胆碱共培养,以PV-IgG诱导的天疱疮细胞模型作为对照,通过细胞解离实验定量分析卡巴胆碱对棘层松解的逆转情况,用免疫荧光方法定性观察桥粒蛋白变化;分别用RIPA和Triton X-100裂解细胞,得到总蛋白和胞质蛋白,用蛋白免疫印迹灰度值定性分析HaCaT细胞表面与黏附相关的桥粒芯蛋白3（Dsg3）、桥斑珠蛋白（PG）的变化,不同时间点p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）、表皮生长因子受体（EGFR）的磷酸化水平;用定量聚合酶链反应（qPCR）检测上述细胞表面蛋白在mRNA水平的变化;通过免疫共沉淀方法定性分析Dsg3与PG相互作用的变化情况.结果 PV-IgG组细胞碎片数为46.67±2.03,卡巴胆碱组为18.67±2.52,两组比较,t=11.22,P＜ 0.01;免疫荧光实验发现,卡巴胆碱可以逆转PV-IgG所致的桥粒分子内化.在天疱疮细胞模型中,细胞总的Dsg3和PG含量下降,非桥粒部分的Dsg3下降,非桥粒PG含量增加,且Dsg3与PG的相互作用减弱,加入卡巴胆碱后可逆转上述变化.卡巴胆碱也可使Dsg3 mRNA的相对表达量（2-△△Ct）由1.428±0.215增加至4.974±0.948（t=3.65,P=0.01）,PG mRNA的相对表达量由1.563±0.247增加至13.420±1.715（t=6.85,P＜0.01）.磷酸化实验中,卡巴胆碱可以抑制EGFR磷酸化,而对p38 MAPK磷酸化无明显影响.结论 胆碱能受体激动剂卡巴胆碱具有逆转棘层松解的作用,这种逆转作用的机制可能包括：抑制Dsg3和PG内化并增加其表达,增强Dsg3与PG的相互作用,抑制棘层松解关键信号EGFR的磷酸化.

β-及γ-catenin与急性髓细胞白血病关系的研究进展

β-及γ-catenin均参与白血病干细胞（LSC）的自我更新过程，在急性髓细胞白血病（AML）中存在异常表达及易位，因此其可能成为清除LSC的新治疗靶点。β-catenin是经典Wnt信号通路中的关键细胞因子，其异常表达及核易位是AML预后不良的独立危险因素。新近研究结果显示，体外抑制β-catenin表达可以杀伤AML及其LSC。而γ-catenin是β-catenin的同源蛋白，在白血病中可以通过β-catenin依赖或非依赖途径发挥生物学作用。笔者就近年来，β-及γ-catenin在AML及其LSC中的研究进展进行综述。