PPARγ配体对1型糖尿病大鼠的治疗作用探讨

目的探讨PPARγ配体罗格列酮对STZ诱导的1型糖尿病大鼠胰腺β细胞的保护作用及其机制。方法实验用STZ诱导1型糖尿病大鼠动物模型,以罗格列酮5mg.kg-1.d-1连续给药30d。记录体质量和禁食血糖的变化。治疗第31天(停药后第1天)及治疗第61天取材观察胰腺形态学变化,应用免疫组织化学染色显示胰岛β细胞和nNOS的表达情况。结果与未治疗糖尿病动物相比,罗格列酮治疗组大鼠的糖尿病体征显著减轻,胰腺未见明显的病理改变,胰岛内胰岛素阳性细胞数量增多、接近正常水平,与此同时,胰腺内一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活性降低,而nNOS表达增强。结论罗格列酮对STZ诱导的1型糖尿病大鼠胰岛有一定的保护作用,其机制可能是通过抑制巨噬细胞内iNOS的活性,减轻胰岛的炎症反应,避免β细胞损害,促进胰岛功能的恢复。

PPARγ配体抑制气道肌纤维母细胞分化的作用机制

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)配体对气道肌纤维母细胞分化和转化生长因子β(1TGF-β1)/Smad3信号传导途径的影响。方法小鼠气道纤维母细胞原代培养,并于特定时间加入TGF-β(15mg/L)或PPARγ配体-罗格列酮(10mmol/L)或PPARγ抑制剂(10mmol/L)处理后,用Westernblot检测肌纤维母细胞的标志物-α平滑肌肌动蛋白原(αSMA)以及结缔组织基质-纤维结合蛋白和I型胶原蛋白的表达情况;并采用Westernblot、DNA凝胶电泳迁移率检测和免疫细胞化学检测对Smad3蛋白的磷酸化、与DNA结合能力和细胞核转位的影响。结果罗格列酮能抑制TGF-β1诱导的αSMA的产生,并降低纤维结合蛋白和I型胶原蛋白的表达;同时抑制Smad3的磷酸化、与DNA的结合能力和细胞核转位。PPARγ配体的抑制剂能够完全消除PPARγ配体对TGF-β1的抑制作用。结论 PPARγ配体能够通过阻断TGF-β1/Smad3信号传导通路,抑制TGF-β1诱导产生的肌纤维母细胞分化和纤维化的细胞效应。

PPAR_γ配体对人血单核细胞MMPs和TIMPs表达及活性的影响

目的探讨过氧化物酶体增生物激活受体-γ（PPARγ）配体15d-PGJ2对人血单核细胞基质金属蛋白酶及其内源性抑制物（MMPs和TIMPs）表达及活性的影响。方法 应用RT-PCR和Western blotting测定MMPs、TIMPs的基因和蛋白表达,Zymography测定MMPs活性。结果PPARγ配体15d-PGJ2可明显抑制人血单核细胞MMP-9的表达及其活性,但不影响MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达。结论 PPARγ配对15d-PGJ2可抑制人血单核细胞MMP—9的表达及其活性,对减少动脉粥样硬化斑块局部细胞外基质降解、增强斑块稳定性可能起到有益作用。

PPARγ配体调控人胆囊上皮细胞炎性反应的实验初探

目的 :初步探讨PPARγ配体能否抑制人胆囊上皮细胞的炎症反应。方法 :行胆囊上皮细胞原代培养并鉴定 ,根据细胞生长曲线 ,在其生长高峰期 (第 5天 ) ,用 0、 10 μmol/L、 2 0 μmol/L、 30 μmol/L、 5 0 μmol/L、10 0 μmol/L的噻格列酮 (PPARγ配体之一 )处理细胞 2 4小时 ,再用人白细胞介素 (hIL) - 1β5ng/ml刺激 ,2小时后用放射免疫法测量细胞上清液中IL - 8的浓度。对 6个组别的IL - 8浓度采用双因素方差分析 ,两两比较采用最小显著差法 (LSD) ,检验水准α=0 0 5。结果与对照组相比 ,各实验组IL - 8的表达均被抑制 ,差异有统计学意义 (P <0 0 1) ,实验组 5 (10 0 μmol/L)的抑制作用最明显。结论 :PPARγ配体可抑制炎性因子IL - 8在胆囊上皮细胞中的表达 。

PPARγ配体与血管内皮细胞

血管内皮细胞结构和功能的异常是糖尿病大血管动脉粥样硬化形成及微血管病变早期的关键因素.PPARγ配体除了能增强周围组织对胰岛素的敏感性、降低血糖外,还通过舒张血管、减轻炎症、抗氧化应激等作用与调节血管内皮细胞功能紧密相关.

PPAR-γ配体罗格列酮对人黑素瘤细胞体外趋化功能的影响及相关机制

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)配体罗格列酮(rosiglitazone,RGZ)对人黑素瘤A375细胞株体外趋化功能的影响及机制。方法:体外培养人黑素瘤A375细胞;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测RGZ对A375细胞的增殖抑制率;RT-PCR、Western-blot分别检测RGZ对A375细胞的趋化因子受体CXCR4 mRNA及CXCR4蛋白表达的影响;用Boyden小室研究RGZ对A375细胞体外趋化功能的影响。结果:MTT法检测结果显示在24 h干预点,浓度为10、25μmol/L时,RGZ的细胞毒性作用不明显(P>0.05);且RT-PCR、Western-Blot检测结果分别显示,RGZ能下调CXCR4mRNA及CXCR4蛋白的表达(P<0.01)。趋化实验显示,随着RGZ浓度的升高,穿过Boyden小室膜的A375细胞数显著减少(P<0.01)。结论:PPAR-γ配体RGZ能抑制人黑素瘤细胞的趋化功能,其机制可能与下调肿瘤细胞的CXCR4基因表达有关。

PPARγ配体罗格列酮对血吸虫病肝纤维化小鼠血清TNF-α和IL-6的影响

目的:检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)配体罗格列酮治疗血吸虫病肝纤维化小鼠血清TNF-α和IL-6水平的变化及意义。方法:建立血吸虫病肝纤维化小鼠模型,应用PPARγ的配体罗格列酮治疗并应用放射免疫法检测血吸虫病肝纤维化小鼠血清TNF-α和IL-6水平的变化。结果:罗格列酮治疗可显著降低肝纤维化小鼠血清TNF-α和IL-6含量,与感染对照组及吡喹酮治疗组比较差异有显著性意义(<P0·05)。结论:罗格列酮可明显降低血吸虫病肝纤维化小鼠TNF-α和IL-6水平,从而发挥其抗肝纤维化的作用。

过氧化体增殖物激活型受体γ配体与炎性细胞因子和左心室肥厚

左心室肥厚是临床上常见的心脏疾病 ,可以引起心肌梗死、猝死 ,严重地危害健康。压力负荷增加是引起左心室肥厚的主要原因 ,但其具体的细胞和分子机制还不清楚。近年来已经注意到炎性细胞因子在左心室肥厚发展过程中的作用。过氧化体增殖物激活型受体的配体具有抑制炎症的作用。本文通过综述过氧化体增殖物激活型受体γ配体与炎性细胞因子和左心室肥厚之间的关系 。

PPARγ配体结合域的表达、纯化和鉴定

提取MCF 7乳腺癌细胞的总RNA ,通过RT PCR技术扩增出hPPARγ/LBDcDNA ,并克隆于载体pGEX 1γT上 ,测序表明该序列与已报道序列相同 ,将其转入BL2 1(DE3)大肠杆菌中 ,IPTG诱导表达GST hPPARγ/LBD ,在不同培养温度或IPTG诱导浓度下 ,GST hPPARγ/LBD以可溶或包涵体形式存在 ,表达产物经谷胱甘肽Sepharose 4B亲和层析纯化 ,可被抗hPPARγ多克隆抗体特异识别 。

PPAR-γ配体抗前列腺癌作用研究现状及展望

前列腺癌是男性生殖系统常见的恶性肿瘤。激素依赖性前列腺癌的治疗主要采用内分泌治疗,而激素非依赖性前列腺癌在目前尚缺乏有效的治疗方法。近年来,有研究发现过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)与前列腺癌关系密切,PPAR-γ活化后具有抗前列腺癌作用,有望成为预防、治疗前列腺癌的新位点。本文就其配体在抗前列腺癌作用方面的研究作一综述。

PPARγ配体罗格列酮和GW9662对3T3-L1脂肪细胞内脏脂肪素mRNA表达的影响

目的观察PPARγ配体罗格列酮和GW9662对3T3-L1脂肪细胞内脏脂肪素(visfatin)mRNA表达的影响,观察GW9662能否拮抗罗格列酮对visfatin的作用,以探讨PPARγ与visfatin的关系。方法体外培养3T3-L1前脂肪细胞并诱导其分化成熟,分别以不同浓度的罗格列酮和GW9662干预,在不同的时间段提取细胞总RNA,用RT-PCR技术检测visfatin mRNA的表达水平,以确定二者单独作用时的最佳剂量及时间。再将分化成熟的3T3-L1脂肪细胞随机分为4组:对照组:不加任何干预剂;罗格列酮组:单独加入罗格列酮;GW9662组:单独加入GW9662;罗格列酮+GW9662组:同时加入罗格列酮和GW9662共同作用;以上各组药物均使用最佳剂量,作用最佳时间后观察visfatin mRNA的表达。结果罗格列酮或GW9662单独干预分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,visfatin mRNA的表达水平均低于空白对照组,且当罗格列酮浓度达10μmol/L或以上、GW9662浓度达5μmol/L或以上时,其表达差异有统计学意义。用罗格列酮+GW9662共同干预分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,visfatin mRNA的表达水平虽比罗格列酮单独干预时有所下降,但差异无统计学意义。结论罗格列酮或GW9662均能下调成熟3T3-L1脂肪细胞visfatin mRNA的表达水平,且二者共同作用时,GW9662不能拮抗罗格列酮对visfatin表达的抑制作用。罗格列酮可能是通过非PPARγ途径或者部分通过非PPARγ途径影响visfatin的表达。

PPAR-γ配体在激素不敏感型前列腺癌中的作用

目的:研究过氧物酶体增殖因子活化受体(PPAR-γ)配体对人前列腺癌细胞系生长的影响。方法:用Northernblot、MTT法和流式细胞仪(AnnexinV和PI双染色)分别分析检测PPAR-γ配体15脱氧-△12,14-前列腺素J2(15-d-PGJ2)和曲列格酮(TGZ)对激素不敏感型的人前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的影响。结果:PPAR-γ在前列腺癌细胞系PC-3高表达,其配体15-d-PGJ2和TGZ均以剂量依赖方式抑制细胞生长,使细胞生存率下降;用流式细胞仪(AnnexinV和PI双染色)分析结果为Annexin V-FITC阳性和PI阴性,提示15-d-PGJ2和TGZ能够促进前列腺癌细胞的早期凋亡。结论:PPAR-γ的配体可以通过激素不敏感型前列腺癌细胞上的受体,促进前列腺癌细胞的早期凋亡,使得细胞生存率降低,提示PPAR-γ可能成为治疗激素不敏感型前列腺癌的靶点。

过氧物酶体增殖因子活化受体γ配体对人肝癌细胞系BEL-7402细胞周期的影响

目的 探讨过氧物酶体增殖因子活化受体 (PPAR)γ配体对人肝癌细胞系生长的影响。方法 用细胞计数、[3 H ] 胸苷摄入和流式细胞术分别检测 15 脱氧 △12 ,14 前列腺素J2(15d PGJ2 )和曲列格酮 (TGZ)对人肝癌细胞系BEL 740 2细胞增殖及细胞周期的影响。结果 15d PGJ2和TGZ均以剂量依赖方式抑制细胞生长 ,减少S期细胞比值和增加G0 /G1期细胞比值 ,但对G2 /M期细胞比值无明显影响。结论 15d PGJ2和TGZ均可抑制BEL 740 2细胞增殖 ,这种抑制作用可能部分与PPARγ介导的G1细胞周期停滞有关。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ配体对诱导大鼠肝癌的抑制作用

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptor gamma,PPAR γ)是一种核受体,与基因转录调节及脂类代谢有关.

过氧化物酶体增殖物激活受体γ及其配体与肝纤维化研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)属核激素受体超家族成员,是调节脂肪细胞分化和能量代谢的关键性转录因子。PPARγ是其中一个亚型,在人类表达于巨噬细胞、肝星状细胞等,其生物学功能复杂。近年来,对PPARγ及其配体在肝纤维化中的作用及其与肝纤维化的关系进行了较多的研究。此文就PPARγ及其配体与肝纤维化的研究进展作一综述。

过氧化物酶体增生因子激活受体α和γ配体对游离脂肪酸介导的β细胞损害的干预作用

目的 研究过氧化物酶体增生因子激活受体α和γ (PPARα和PPARγ)配体对游离脂肪酸 (FFA)介导的胰岛 β细胞损害的干预作用。方法 应用PPARα配体氯贝丁酯及PPARγ配体曲格列酮 (troglitazone,TGZ)和噻唑烷二酮 (thiazolidinedione,TZD)处理大鼠胰岛素瘤细胞系 β细胞(INS 1细胞 ) ,采用细胞活力和DNA片段梯度分析评价PPARα和PPARγ配体对FFA诱导的INS 1细胞损害的影响。结果 INS 1细胞与 0 .2 5～ 1mmol/L的FFA孵育 2 4h后细胞活力下降 ,1mmol/L的FFA可诱导INS 1细胞发生凋亡。比较是否使用氯贝丁酯 (10 0 μmol/L)、TGZ (10 μmol/L)和TZD (10 0 μmol/L)处理 β细胞的结果 ,发现这些配体可保护INS 1细胞免于FFA的细胞毒性 (包括脂性凋亡 )作用。结论 FFA可介导 β细胞发生明显的脂毒性和脂性凋亡 ,应用PPARα和PPARγ配体可能具有保护 β细胞免于FFA的细胞毒性的作用。

PPAR-γ配体降低^(137)Cs照射诱导的PAI-1高表达

目的观察大鼠肾小球膜细胞137Cs照后PAI1基因的表达情况,以及PPARγ配体Pioglitazone对照射诱导的PAI1表达的影响。方法10Gyγ线照射±10mmol/LPioglitazone处理大鼠肾小球膜细胞,用RTPCR方法证明PPARγ基因表达,用Northernblot、Westernblot方法观察PAI1基因表达,用Gelshift方法观察AP1基因的活性变化(由于PAI1基因启动子区存在AP1结合位点,加之AP1介导某些炎性因子的产生且AP1是照射诱导的早期表达基因之一,因此观察照射在大鼠肾小球膜细胞能否诱导AP1活性的升高,并进一步观察Pioglitazone对照后AP1活性的影响)。结果RTPCR方法证明了大鼠肾小球膜细胞表达PPARγ基因。10Gy照后Northernblot结果显示照后24hPAI1mRNA的表达增加,不同剂量照后24hPAI1mRNA的高表达呈照射剂量依赖性。10mmol/LPioglitazone+10Gy照后24h的Northernblot和48h的Westernblot结果表明,Pioglitazone使照射诱导的PAI1基因高表达在mRNA水平和蛋白水平均明显降低。Gelshift结果发现放疗后2hAP1活性开始升高,4h最高,加入Pioglitazone后明显被抑制。结论PPARγ配体Pioglitazone使照射诱导的肾小球膜细胞PAI1基因高表达降低,其机制可能是通过降低AP1活性来调节PAI1的表达。Pioglitazone可能具有预防或降低放射性肾损伤的作用,这将有待于动物实验的进一步证实。

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ配体抗肿瘤机制的研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)及其配体已成为肿瘤基础研究的热点之一,文中从细胞分化、细胞增殖、细胞凋亡、血管形成及肿瘤侵袭性等方面综述了PPAR-γ配体抗肿瘤机制的研究进展。