能谱计算机断层扫描影像特征和尿纤维蛋白原γ链对恶性肺小结节的诊断价值

目的 探讨能谱计算机断层扫描(CT)成像联合尿纤维蛋白原γ链(FGG)在区分良恶性孤立性肺结节(SPN)中的价值。方法 选取2018年12月-2021年6月使用能谱CT进行常规双期对比增强扫描的SPN患者63例(37例恶性和26例良性)作为研究对象。能谱CT成像参数包括动脉(ICLa)和静脉(ICLv)期病灶的碘浓度(IC),归一化IC(NICa/NICv,归一化为主动脉中的IC),能谱Hounsfield单位(HU)曲线的斜率(λHUa/λHUv),以及40和70 keV图像上的单色CT数(CT40 keVa/v、CT70 keVa/v)增强。使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者的尿FGG水平。通过受试者工作特征(ROC)曲线评估能谱CT成像联合FGG区分良恶性SPN的诊断价值。结果 能谱CT成像对恶性结节的诊断准确度为73.0%(27/37),对良性结节的诊断准确度为53.8%(14/26),差异有统计学意义(P<0.05)。与良性SPN相比,恶性SPN的CT40 keVa、CT40 keVv、CT70 keVa、CT70 keVv、λHUa、λHUv、ICLv均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。恶性SPN患者尿液FGG中位水平为2.210 ng/mL(IQR:1.780~3.120 ng/mL),良性SPN患者尿液FGG中位水平为1.587 ng/mL(IQR:1.140~1.975 ng/mL),差异有统计学意义(z=4.264,P=0.014)。尿液FGG对恶性结节的诊断准确度为73.0%(27/37),对良性结节的诊断准确度为46.2%(12/26),差异有统计学意义(P<0.05)。能谱CT成像和FGG联合鉴别良恶性SPN的曲线下面积(AUC)为0.924,敏感度为93.8%,特异度为85.7%。结论 能谱CT成像联合尿液FGG水平检测有利于提高良性和恶性SPN的鉴别诊断效率。

老年人淋巴细胞IL-2Rγ链的表达及其意义

Objective:To study the role of IL 2Rγ chain in the immuno senescence process Methods:8 young, aged from 18 to 35 years(average 24 9±5 8 years), and 17 old healthy people, aged from 65 to 79 years(average 69 4±4 2 years), had been selected for determination the proliferative responses of peripheral blood lymphocytes to PHA, the percentage and dynamic changes of CD132, CD45R positive cells, also, the gene expression of IL 2Rγ chain with RT PCR using the designed primers Results:The results showed that the PHA proliferative response of lymphocytes of aged people(0 199±0 055) were lower than that of young people(0 279±0 054), P=0 0012 The expression of IL 2Rγ chain on the lymphocytes surface decreased in aged people, 46 2%±7 7%, compared to young people, 68 0%±11 8%, P<0 001, It was verified from RT PCR result that the event occurred at transcription level The time dynamic curve of IL 2Rγ chain expression were different between aged and young people Conclusion:A preliminary conclusion would be drawn that the IL 2Rγ chain play an important role in the declined immune function of aged

子痫前期患者血浆纤维蛋白原γ链浓度的变化及意义

目的：研究子痫前期患者血浆纤维蛋白原γ链浓度及其裂解产物，探讨其在子痫前期的预测和辅助诊断中的价值。方法全程追踪人绒毛膜促性腺激素（HCG）阳性孕妇至分娩后，收集临床资料和血浆标本，将31例子痫前期孕妇（轻度15例、重度16例）作为病例组，以31名正常妊娠孕妇作为对照组，应用免疫印迹法检测各组孕妇血浆纤维蛋白原γ链浓度。结果在正常妊娠过程中，纤维蛋白原γ链浓度差异无统计学意义（P＞0．05）。子痫前期患者妊娠32周（确诊前2～7周），血浆纤维蛋白原γ链浓度开始升高（P＜0．05），确诊时进一步升高。在16例子痫前期重度患者中，1例患者确诊前2周、另有3例患者确诊时出现了25000、27000及23000特异片段；15例轻度患者血浆中仅出现了1例；31名正常孕妇中，未见相关片段。结论子痫前期患者确诊前、后血浆纤维蛋白原合成及降解发生紊乱，γ链浓度显著增高，部分患者降解时出现25000、27000及23000特异片段。γ链浓度及这些特异片段在子痫前期的预测和辅助诊断中可能具有一定的价值。

Fc受体γ链基因启动子区-29位点基因多态性与系统性红斑狼疮关系的研究

目的 :探讨Fc受体γ链基因启动子区 - 2 9位点基因多态现象在中国南方人群中的分布及其与系统性红斑狼疮 (SLE)易感性和临床表现的关系。方法 :采用PCR -RFLP方法检测 180例SLE患者和 14 0例正常对照组Fc受体γ链基因启动子区 - 2 9位点基因型。结果 :SLE患者Fc受体γ链基因启动子区 - 2 9位点TT基因型频率(33 3% )及T等位基因频率 (5 4 4 % )明显高于正常对照组 (17 2 %及 4 2 9% ) (P <0 0 5 ) ,而GG基因型频率 (2 4 4 % )及G等位基因频率 (4 5 6 % )明显低于正常对照组 (31 4 %及 5 7 1% ) (P <0 0 5 )。T等位基因的比值比为 1 5 9。SLE患者各基因型频率及各等位基因频率与狼疮性肾炎 (LN)无相关关系 (P >0 0 5 )。结论 :SLE患者Fc受体γ链基因启动子区 - 2 9位点T等位基因与SLE发病相关但与LN的发生无关。

Fc受体γ链基因3′端非翻译区3804位点T/G多态现象与系统性红斑狼疮发病无关

目的 :探讨Fc受体γ链基因 3′端非翻译区 (3′ -UTR) 380 4位点T/G多态现象在中国南方汉族人群中的分布及与系统性红斑狼疮 (SLE)的关系。方法 :采用PCR -RFLP方法分析Fc受体γ链基因 3′ -UTR 380 4位点T/G单碱基替换的多态现象。结果 :在 16 8例SLE患者和 12 0例正常人中只发现 1例SLE患者存在该位点的T/G杂合现象 ,该杂合现象经基因测序证实 ,其余均位TT型。结论 :Fc受体γ链基因 3′ -UTR 380 4位点T/G单碱基替换的多态性现象在中国南方汉族人群中少见 ,该位点的基因多态现象与SLE发病无关。

T细胞淋巴瘤T细胞受体γ链基因重排的检测

目的 探讨T细胞淋巴瘤T细胞受体γ链基因重排的情况。方法 用免疫组化标记筛选 30例T细胞淋巴瘤、2例高度可疑为T细胞淋巴瘤和 10例淋巴结反应性增生 ,采用聚合酶链式反应扩增方法检测T细胞受体γ链基因重排。结果 30例T细胞淋巴瘤中 2 7例和 2例高度可疑为T细胞淋巴瘤均出现T细胞受体γ链基因重排 ,10例淋巴结反应性增生均无T细胞受体γ链基因重排。结论 T细胞淋巴瘤病变中存在T细胞单克隆增生 ,支持肿瘤单克隆起源学说 ;T细胞受体γ链基因重排检测是区分T细胞淋巴瘤和淋巴结反应性增生的有效方法 ,且对T细胞淋巴瘤疑难病例的诊断有帮助。

抗Fc受体γ链单克隆抗体的研制及生物学特性鉴定

目的:制备Fc受体γ链的单克隆抗体(mAb),并对其生物学特性进行鉴定,为研究受体γ链相关的疾病提供实验材料。方法:人工合成的蛋白多肽偶联后免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA法筛选阳性克隆,Western blot、流式细胞术(FCM)检测鉴定抗体的特性及抗原识别位点。结果:通过细胞融合和亚克隆,共筛选出3株能稳定分泌抗体并且反应性好的杂交瘤细胞株5B6、7D3和8D4。其中7D3抗体反应性最强,2.5μg/mL与体内体外的γ链都能特异性反应。结论:获得了抗Fc受体γ链特异性的mAb,为进一步研究Fc受体γ链在相关疾病发生发展过程中所发挥的作用提供了良好的研究手段。

猪FcγRⅢ和γ链共转染Marc-145细胞系的建立

为了建立稳定表达猪FcγRⅢ(Porcine Fc gamma receptorⅢ,poFcγRⅢ)的Marc-145细胞系,从PAM细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅢ和γ链的cDNA,并构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅢ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300 mg/L)和G418(400 mg/L)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环试验和流式细胞术对细胞系进行了鉴定。结果表明,成功构建了猪FcγRⅢ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系,表达于转染细胞表面的猪FcγRⅢ受体分子能与猪IgG特异结合。

猪T细胞受体γ链基因的克隆及生物信息学分析

目的:克隆猪T细胞受体γ链(pTCR-γ)基因,用以研究猪T细胞受体分子结构与功能。方法与结果:以GenBank上登载的pTCR-γ基因为参考序列,用RT-PCR法从猪外周血淋巴细胞中克隆pTCR-γ基因。序列分析表明,pTCR-γ基因开放读框为1026bp,编码341个氨基酸残基,含有由23个氨基酸残基构成的信号肽序列;与参考序列相比,在核苷酸和推导氨基酸序列上的同源性分别为95.6%和88.8%;系统进化分析发现,该基因与绵羊、恒河猴、人、马、牛的同源性相对较高,与褐鼠、家犬、家鼠、家猫的同源性次之,而与禽类、鱼类的同源性最低;生物信息学结构预测表明猪T细胞受体γ链含2个结构域,其中1个为IG_LIKE1结构域(IGv结构域),由第14～114位共101个氨基酸残基组成;另一个为IG_LIKE2结构域(IGc结构域),由第143～238位共96个氨基酸残基组成。结论:克隆并应用生物信息学技术分析了猪T细胞受体γ链基因序列及编码蛋白的结构特征,为进一步研究γ链的结构与功能奠定了基础。

白细胞介素－2受体γ链研究新进展

白细胞介素－２受体γ链（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２ｒｅｃｅｐｔｏｒγｃｈａｉｎ，ＩＬ－２Ｒγｃ）是约３年前发现的ＩＬ－２受体亚单位之一，它不但参与高、中亲和力ＩＬ－２Ｒ的形成，而且作为细胞因子受体超家族成员参与ＩＬ－４、ＩＬ－７、ＩＬ－９和ＩＬ－１５受体以及可能的ＩＬ－１３受体功能性复合物的形成．ＩＬ－２Ｒγｃ基因结构与功能和蛋白质分子结构以及染色体定位已阐明．ＩＬ－２Ｒγｃ及信号传导的异常导致人类Ｘ染色体连锁重度联合免疫缺陷病（Ｘ－ｌｉｎｋｅｄｓｅｖｅｒｅｃｏｍｂｉｎｅｄｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ，ＸＳＣＩＤ）．因此，阐明ＩＬ－２Ｒγｃ在生理及病理状态下的生物学作用，对了解淋巴细胞的生长发育和分化成熟、免疫应答及其调控等问题都有重要的指导意义．

应用半重叠TCRγ链特异性引物检测淋巴细胞白血病

采用更加敏感的半重叠式ＴＣＲγ特异性引物的ＰＣＲ方法，对２８例ＡＬＬ初治、ＣＲ及ＢＭＴ患儿进行检测。２８例ＡＬＬ患儿中１６例检出ＴＣＲγ特异性条带，占５７．１％。其中ＭＲＤ组１８例，阳性检出１２例，占６６．７％。其中免疫分型标记为Ｂ细胞型的４例，占２５％，免疫标记为Ｔ细胞型者全部出现ＴＣＲγ阳性条带。

γ链族细胞因子在心肌缺血再灌注及预处理中的变化及意义

目的探讨γ链族细胞因子及磷酸化酪氨酸蛋白激酶1(p-JAK1)、磷酸化传导及转录激活因子3(p-STAT3)蛋白在大鼠心肌缺血再灌注损伤及缺血预处理中表达变化及作用机制。方法雄性SD大鼠18只,随机分为假手术组、心肌缺血再灌注组、缺血预处理组,采用结扎左前降支法制作大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,缺血时间30 min,再灌注后120 min处死大鼠。检测血清心肌肌钙蛋白T(cTnT)、乳酸脱氢酶(LDH)含量,以及血清γ链族细胞因子IL-2、4、15的水平;Western blot检测p-JAK1,p-STAT3蛋白表达水平的变化。结果与心肌缺血再灌注组相比,缺血预处理组血清cTnT、LDH减少(P<0.05),IL-2、IL-15水平降低(P<0.05),IL-4水平增加(P<0.05);p-JAK1,p-STAT3表达减少(P<0.05)。以上两组上述指标水平均高于假手术组。结论缺血预处理可以通过激活γ链族细胞因子的释放,适度的激活JAK1/STAT3信号转导通路发挥心肌保护作用。

人白介素2受体γ链胞外区在巴斯德毕赤酵母中的表达

目的:在毕赤酵母GS115中表达重组人白细胞介素2受体γ链(rhsIL-2Rγ)胞外区。方法:用RT-PCR法从正常人淋巴细胞中获得IL-2Rγ胞外区基因;构建重组质粒pPIC9K-hsIL-2Rγ,用聚乙二醇法转入感受态GS115菌株,MD平板筛选His+转化子,用BMMY培养基诱导表达rhsIL-2Rγ;对重组蛋白进行免疫酶染色、SDS-PAGE及Western印迹鉴定。结果:克隆到目的片段,构建了重组质粒pPIC9K-hsIL-2Rγ;免疫酶染色、Western印迹等结果显示,重组质粒已成功转化GS115,并获得诱导表达的rhsIL-2Rγ。结论:在毕赤酵母GS115中表达了rhsIL-2Rγ,其蛋白条带有上移现象,分子较大,可能其糖基化过度或存在二聚体。

人IL-2受体γ链的克隆

作者鉴定了人IL-2R的第三亚单位-γ链,并分离出编码该链的互补DNA(cDNA).γ-链对高亲和力受体(由α,β,γ异三聚体构成)和中亲和力受体(由β,γ异二聚体构成)的形成是必须的.只有在γ链存在的情况下,鼠纤维母细胞上IL-2R在结合IL-2后方能内在化;α和β链不足以内在化,因此,γ-链是功能性IL-2R不可少的成份.

一个纤维蛋白原γ链Arg275His突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系

目的 对一个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析。方法 采集家系3代5人外周血,吸取上层血浆用血凝仪检测活化部分凝血酶原时间、凝血酶原时间、凝血酶时间、蛋白C活性、蛋白S活性和抗凝血酶活性,纤维蛋白原活性和抗原分别用Clauss法和免疫比浊法进行检测。以常规酚-氯仿法抽提家系所有成员外周血基因组DNA,PCR扩增纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG所有外显子及其侧翼序列,PCR产物纯化后直接测序以检测基因突变。结果 先证者活化部分凝血酶原时间、凝血酶原时间正常,凝血酶时间超出正常上限值2倍以上,纤维蛋白原活性明显下降,抗原也低于正常范围,且活性显著低于抗原;其母表型检测结果与之相似。基因分析显示先证者呈纤维蛋白原FGG基因第8外显子g.5 6 78G>A杂合碱基置换,导致Arg2 75 His错义突变,该突变来源于母系。结论 纤维蛋白原γ链Arg2 75 His杂合错义突变是引起该家系异常纤维蛋白原血症的原因。

HIV/AIDS患者抗病毒治疗后γ链细胞因子的变化及其意义

目的观察γ链细胞因子在艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)病人(HIV/AIDS病人)和正常人表达水平的区别,及其在24个月的高效抗反转录病毒治疗(HAART)治疗中的动态变化,分析其与抗病毒治疗的关系及其临床意义。方法 40名HIV/AIDS病人在初次HAART治疗的0、6、12、18和24个月进行回访,另35名正常人作为对照,均采集外周血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测常见的γ链细胞因子[白细胞介素2、4、7、15、21(IL-2、IL-4、IL-7、IL-15、IL-21)和γ干扰素(IFN-γ)],同时使用流式细胞计数法测定CD4+T和CD8+T淋巴细胞数量,实时反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定血清中HIV核糖核酸(RNA)水平。结果未经抗病毒治疗的HIV/AIDS病人外周血IL-2、IL-15、IL-21和IFN-γ水平显著低于正常人,而IL-4和IL-7水平显著高于正常人。在启动HAART后的各次回访中,随着外周血HIV RNA病毒载量水平和CD8+T淋巴细胞数量的逐渐下降和CD4+T淋巴细胞数量的显著增加,IL-2、IL-15、IL-21和IFN-γ水平也逐步上升,而IL-4和IL-7水平逐步下降,显示出一定的相关关系。结论这些常见的γ链细胞因子可能和HIV感染的致病机制相关,并可能参与了抗病毒免疫重建和病毒控制过程。

中国南方人群Fc受体γ链基因3′端非翻译区基因多态性与系统性红斑狼疮的关系

目的 探讨Fc受体γ链基因3’端非翻译区(3’-UTR)基因多态性现象在中国南方人群中的分布及与系统性红斑狼疮(SLE)易感性和临床表现的关系。方法 采用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)方法检测180例SLE患者和140例正常对照组Fc受体γ链基因3’-UTR 3847及3804位点基因型。结果 SLE患者Fc受体γ链基因3’-UTR 3847位点CC基因型频率(8.9％)及C等位基因频率(32.7％)较对照组(2.9％及23.6％)明显升高(P<0.025);而TT基因型频率(43.3％)及T等位基因频率(67.3％)较对照组(55.7％及76.4％)明显降低(P<0.025)。SLE伴狼疮肾炎(LN)患者CC基因型频率及C等位基因频率较不伴LN的患者明显升高(P<0.05及P<0.025)。对Fc受体γ链基因3’-UTR 3804位点基因型的研究显示,在全部病例和对照组中仅1例SLE患者为TG型,其余均为TT型。结论 SLE患者Fc受体γ链基因3’-UTR 3847位点C等位基因与SLE发病及LN的发生有关。3804位点基因多态性现象在中国南方人群中少见,该位点的多态性与SLE发病无关。

免疫球蛋白重链和T细胞受体γ基因重排在非霍奇金淋巴瘤中检测的临床意义

目的 :探讨免疫球蛋白重链 ( Ig H)和 T细胞受体 γ( TCRγ)基因重排在非霍奇金淋巴瘤( NHL )中的检测意义。方法 :用 PCR方法检测 2 5例 NHL和 1例反应性淋巴结炎患者 ,及 2 0例正常人骨髓、周围血和 /或淋巴结单个核细胞 ( MNCs)中克隆性 Ig H、TCRγ基因重排。结果 :克隆性Ig H和 /或 TCRγ基因重排在 2 5例 NHL 中检出为 84.0 % ( 2 1 / 2 5 ) ;克隆性 Ig H基因重排在 B-NHL和 T-NHL中检出分别为 86.7% ( 1 3 / 1 5 )和 2 0 .0 % ( 2 / 1 0 ) ,克隆性 TCRγ基因重排分别为5 3 .3 % ( 8/ 1 5 )和 80 .0 % ( 8/ 1 0 )。 1例反应性淋巴结炎和 2 0例正常人均未检测到 Ig H和 TCRγ基因重排。结论 :Ig H、TCRγ基因重排检测有助于 NHL 的诊断和鉴别诊断 ,及发现 NHL

荣昌猪白细胞介素-2受体γ链基因克隆、表达与鉴定

运用RT-PCR技术从由刀豆蛋白(ConA)诱导培养的荣昌猪外周血单核淋巴细胞(PBMC)扩增出猪白细胞介素-2受体γ链基因的完整开放阅读框(ORF),长约1 107 bp,编码由368个氨基酸残基组成的相对分子质量为41 780的蛋白多肽。荣昌猪IL-2Rγ与人、猕猴、牛、犬、鼠在氨基酸水平上的同源性分别为81.6%,80.8%,85.1%,83.2%和68.8%。运用PCR技术从含荣昌猪IL-2Rγ开放阅读框序列质粒中扩增其成熟蛋白编码基因,共1 020 bp。将其定向克隆于原核表达载体pET-32a(+)后在E.coliBL21中诱导表达,SDS-PAGE结果显示表达的融合蛋白约为52 000,重组蛋白以包涵体的形式表达,表达产物约占菌体总蛋白的37.6%;Western-blotting分析表明,在相对分子质量52 000处有一条特异性的带;对γ诱导重组菌进行转录检测得到约1 020 bp的特异性片段。