基于IFN-γ/STAT1/Smad7通路探讨疏肝健脾活血方抗肝纤维化作用机制

目的:探讨疏肝健脾活血方防治肝纤维化的可能作用机制。方法:36只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、中药组,每组12只;除正常组外,其余组小鼠利用20%四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化,中药组按33.3 kg/mL疏肝健脾活血方药灌胃干预,连续4周。采用HE染色、Masson染色、天狼猩红染色观察各组小鼠肝组织病理变化;免疫组化检测肝组织平滑肌α-肌动蛋白(α-SMA)分布情况;检测各组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平变化;采用Western Blot法检测肝组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、α-SMA、信号转导与转录活化因子1(STAT1)、磷酸化信号转导与转录活化因子1(p-STAT1)、Smad7蛋白表达水平;采用RT-PCR法检测各组小鼠肝组织中CollagenⅠ、α-SMA、Smad7、γ-干扰素(IFN-γ)mRNA水平变化。结果:与模型组比较,中药组肝组织中炎症细胞浸润减少,肝细胞点状坏死减少,肝细胞排列相对整齐,汇管区及中央静脉区纤维增生减少,部分纤维间隔消失,胶原沉积明显减少;血清中ALT与AST水平显著下降(P<0.01,P<0.05);肝组织中CollagenⅠ与α-SMA蛋白水平显著下降(P<0.05),Smad7与p-STAT1/STAT1蛋白水平显著上升(P<0.05);肝组织中CollagenⅠ与α-SMA mRNA水平显著下降(P<0.01),Smad7与IFN-γmRNA水平显著上升(P<0.01)。结论:疏肝健脾活血方能够减少肝脏炎症的发生与胶原纤维增生,抑制肝星状细胞的活化,从而起到防治肝纤维化的作用,其作用机制可能与促进IFN-γ/STAT1/Smad7信号通路有关。