年龄对腺苷脱氨酶和γ-干扰素释放实验诊断结核性胸膜炎敏感性的影响

目的比较腺苷脱氨酶(ADA)和γ-干扰素释放实验T-SPOT.TB在不同年龄组结核性胸膜炎患者的诊断敏感性。方法对2015年1月-2016年8月该院以未明原因胸腔积液住院且已进行ADA或T-SPOT.TB检查的、最终确诊为结核性胸膜炎的271例患者进行回顾性分析。入组患者根据其所做检查,分为ADA组和T-SPOT.TB组,再将每组患者根据年龄分为0~30岁、31~50岁、51~70岁、≥71岁4组,分别计算各组2项检查的敏感性。组间比较采用Kruskal-Wallis检验。结果入组患者中,接受ADA检查的患者有129例,接受T-SPOT.TB检查的患者有142例。ADA诊断结核性胸膜炎的总体敏感性为72.86%,T-SPOT.TB诊断结核性胸膜炎的总体敏感性为90.14%。各年龄段ADA和T-SPOT.TB的敏感性分别为:0~30岁,85.41%和94.64%;31~50岁,69.44%和81.08%;51~70岁,55.88%和80.55%;≥71岁,42.85%和72.72%。年龄相关的敏感性变化在ADA和T-SPOT.TB检查中均有不同,差异有统计学意义(P=0.002和0.047)。结论 T-SPOT.TB诊断结核性胸膜炎的敏感性高于ADA,ADA和T-SPOT.TB对中青年患者结核性胸膜炎诊断敏感性均高于老年患者,应用于老年患者时应考虑假阴性结果。

结核分枝杆菌特异性γ-干扰素化学发光免疫检测体系的建立

目的建立一种用于便携式检测结核分枝杆菌特异性γ-干扰素的化学发光免疫检测体系,为下一步研制便携式检测试剂盒奠定基础。方法利用生物素-链霉亲和素系统偶联磁珠和抗体,利用酰胺键结合方式偶联吖啶酯和标记抗体。采用正交实验法,优化结核分枝杆菌特异性γ-干扰素检测试剂盒所需的吖啶酯标记检测抗体及磁珠偶联包被抗体的方法、缓冲液配方、封闭液配方等条件。最后将建立的检测体系与商品化酶联免疫吸附试验(ELISA)参照试剂盒进行比较。结果建立的检测体系与商品化ELISA参照试剂盒阳性符合率为99.20%,阴性符合率为98.91%,总符合率为99.10%,Kappa值为0.982,最低检出限0.66 pg/mL。结论建立的便携式结核分枝杆菌特异性γ-干扰素化学发光免疫检测体系与ELISA参照试剂盒相比具有类似的检测能力,可用于临床辅助诊断。

血清γ-干扰素诱导蛋白10在活动性肺结核患者中的诊断价值

目的探讨血清γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)在活动性肺结核患者中的诊断价值。方法选择新疆医科大学第一附属医院2017年1-12月收治的活动性肺结核病初诊患者72例(活动性肺结核组);另将本院呼吸科同期住院的肺炎、肺癌和肺气肿等其他肺部疾病患者列为非结核呼吸病组;对照组30例,来源于同期来本院的健康体检者。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测3组血清IP-10,实际操作按说明书要求进行。血清T-SPOT的检测按T-SPOT.TB试剂盒操作规范进行。结果 3组IP-10和IFN-γ水平之间差异有统计学意义(P<0.05)。活动性肺结核组IP-10以及IFN-γ经检验均明显高于非结核呼吸病组和对照组(P<0.05),但健康对照组和非结核呼吸病组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。经相关性检验,活动性肺结核组IFN-γ及IP-10水平呈正相关关系(r=0.154,P=0.004)。IFN-γ与IP-10 2个指标诊断活动性肺结核的ROC曲线下面积为0.927和0.975。IFN-γ和IP-10诊断活动性肺结核的灵敏度分别为90.5%和95.9%,特异度分别为92.3%和97.1%。以对照组和非结核呼吸病组为对照,血清IP-10检测活动性肺结核的敏感性和特异性(95.5%、97.1%)高于血清T-SPOT的敏感性和特异性(75.4%、72.6%),同时也高于IFN-γ的敏感性和特异性(90.5%,92.3%)。结论采用ELISA检测血清IP-10水平,操作方法简便,质量控制明确,敏感性和特异性均呈较高水平,今后可进一步扩大样本证实其敏感性与特异性,为活动性肺结核的快速诊断提供理论依据。

TB-IGRA联合其他检测方法在结核筛查中的应用研究

目的探讨TB-IGRA联合其他几种检测方法在结核筛查中的应用效果。方法选择2017年1～8月我院门诊收治的795例患者,根据病情分为结核组和非结核组,均行痰涂片、痰培养、PPD皮试、γ-干扰素释放酶联免疫法(TB-IGRA)、结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测。统计并分析痰涂片、痰菌培养、PPD试验、TB-IGRA、IgG/IgM的开展情况、灵敏度、特异性、约登指数;分析TB-IGRA检测的特异性和灵敏度;比较TB-IGRA检测分别与PPD试验、IgG/IgM抗体并、串联检测的特异性和灵敏度。结果痰菌培养、TB-IGRA检测的开展数量最多,PPD试验开展数量最少(P<0.05),以临床判定结果为金标准,行灵敏度、特异性、约登指数比较,痰菌阳性检出率最低,仅检出5例。痰涂片、痰菌培养的灵敏度低于PPD试验,但特异度高于PPD试验,TB-IGRA检测和IgG/IgM抗体检测的灵敏度高于PPD试验(P<0.05),选择灰区范围在8.32～19.10之间的样本46例,统计分析得到TB-IGRA检测灰区范围内样本的灵敏度、特异性分为23.08%、54.55%。TB-IGRA分别与PPD试验或IgG/IgM抗体检测行并、串联分析,可显著提高检查结果的灵敏度。结论 TB-IGRA检测方法用于区域性结核筛查,灵敏度和特异性高。对于灰区样本,联合PPD试验、IgG/IgM抗体检测有助于提高检测灵敏度。

重组结核杆菌融合蛋白皮肤试验在肾透析患者诊断结核潜伏感染的应用价值

目的 评估重组结核杆菌融合蛋白(ESAT6-CFP10,EC)皮肤试验在肾透析患者中诊断结核潜伏感染的价值。方法 纳入某医院67例肾透析患者,同时接受结核菌素试验(the tuberculin skin test, TST)和γ-干扰素释放实验(interferon gamma release assay, IGRA),并以TST和Quanti FERON-TBgold(QFT,种IGRA方法)作为参照标准,衡量EC皮肤试验的灵敏度和特异度。结果 67例肾透析患者中,EC皮肤试验、TST、QFT阳性率分别为11.3%(7/62)、25.8%(16/62)、22.4%(15/67),差异无统计学意义(χ^(2)=4.051,P=0.105)。分别以TST、QFT、TST&QFT为参照标准,EC皮肤试验灵敏度分别为31.3%(95%CI:11.0%~58.7%)、50.0%(95%CI:23.0%~77.0%)、83.3%(95%CI:35.9%~99.6%),特异度分别为95.7%(95%CI:85.2%~99.5%)、100.0%(95%CI:92.6%~100.0%)、96.4%(95%CI:87.7%~99.6%)。结论 EC皮肤试验在肾透析患者中的结核潜伏感染诊断价值低于QFT,推荐使用QFT。

结核病实验室检测的方法学评价

目的:探讨结核病的实验室检测方法,并对其检测结果进行分析,比较不同检测方法学之间的差异及其优缺点.方法:对2017年在泉州市第一医院就诊的837例疑似结核的患者进行γ-干扰素体外释放实验(TB-IGRA),结核杆菌培养以及抗酸染色涂片三种实验室检测,比较各方法的诊断效能,同时分析在TB-IGRA不同的实验结果下,结核杆菌培养和抗酸染色涂片检出率,并对TB-IGRA和结核杆菌培养两种方法联合检测结果进行统计学分析.结果:γ-干扰素的含量越高,结核杆菌培养和抗酸染色涂片检出率越高.联合检测TB-IGRA和结核杆菌培养时,对肺结核患者和非肺结核患者检测结果有明显的统计学差异.结论:这三种结核的实验室检测方法各有其优缺点,综合考虑TB-IGRA在实验时间及排除诊断上有明显的优势,可以做为一种辅助诊断肺结核的有力手段.

FadD9重组蛋白在活动性肺结核诊断中的价值

目的探讨结核分枝杆菌(MTB)Fad D9重组蛋白在活动性肺结核诊断中的价值。方法制备Fad D9重组蛋白并进行鉴定,使用C57BL/6小鼠模型评估其免疫原性。以Ag85A蛋白为阳性参照抗原,检测145例活动性肺结核患者(活动性肺结核组)、38例结核患者密切接触者(MTB密切接触组)和101名体检健康者(正常对照组)血清样本中Fad D9重组蛋白的特异性抗体水平,将Fad D9重组蛋白作为抗原与58例肺结核患者、34例非肺结核患者的全血样本37℃共孵育20~24 h后,采用γ-干扰素释放试验(IGRA)检测,将检测结果与IGRA试剂盒中的标准管进行比对,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Fad D9重组蛋白诊断结核病的敏感性和特异性。结果Fad D9重组蛋白可在C57BL/6小鼠体内引起较高水平的体液免疫反应,且与阳性参照抗原Ag85A接近。活动性肺结核组抗Fad D9抗体水平高于MTB密切接触组和正常对照组(P<0.0001),MTB密切接触组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。抗Ag85A抗体水平3组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,Fad D9重组蛋白诊断结核病的曲线下面积(AUC)为0.682,最佳临界值为0.343,敏感性为96.8%,特异性为37.5%。结论Fad D9蛋白在活动性结核病的诊断中具有一定的临床应用潜力。

TB.IGRA在海分枝杆菌感染诊断和鉴别诊断中的应用

目的:探讨结核感染T细胞γ-干扰素释放实验(TB.IGRA)在海分枝杆菌感染诊断和鉴别诊断中的应用价值。方法:回顾性分析在我院门诊诊疗的疑似海分枝杆菌感染患者,排除结核病患者,根据患者海分枝杆菌qPCR是否阳性分为海分枝杆菌感染组和真菌、普通细菌感染组。应用TB.IGRA检测患者外周血中结核感染特异性T细胞,比较分析TB.IGRA和抗酸染色诊断海分枝杆菌感染的灵敏度、特异度、预测值和似然比;比较不同年龄组中TB.IGRA的灵敏度、特异度差异以及海分枝杆菌感染患者的γ-干扰素水平。结果:共纳入87例海分枝杆菌感染和25例真菌、普通细菌感染患者。TB.IGRA诊断海分枝杆菌感染的灵敏度、特异度分别为73.6%、64.0%,灵敏度较抗酸染色高,特异度较抗酸染色低;其阳性、阴性预测值和似然比分别为87.7%、41.0%、2.04和0.41;青年、中年和老年组的灵敏度分别为70.0%、73.5%、74.4%,中年组特异度最高(88.9%),老年组最低(46.2%)。结论:TB.IGRA在海分枝杆菌感染的诊断和鉴别诊断中具有重要的应用价值。

CRP和IGRA联合检测肺结核

目的探讨血清CRP和IGRA联合检测对肺结核患者的临床应用价值。方法选择130名肺结核患者,依据痰液病原学细菌涂片检测的结果分为感染组和非感染组,测定两组患者的CRP和IGRA水平,比较CRP检测及CRP联合IGRA检测对肺结核患者早期诊断的灵敏度和特异度。结果单独检测CRP特异度为76.92%,灵敏度为83.33%;联合检测特异度86.54%,灵敏度92.31%。结论联合检测CRP和IGRA对肺结核患者的辅助诊断具有良好的临床应用价值。

T-SPOT.TB和GeneXpertMTB/RIF检测在结核诊断中的应用

目的:比较γ-干扰素释放实验(T-SPOT.TB)和GeneXpertMTB/RIF 2种方法对结核病的诊断价值。方法:采集273例结核病患者与45例健康对照者全血,采用T-SPOT.TB检测结核特异性抗原致敏T淋巴细胞,同时收集结核病患者痰液标本采用抗酸染色法进行抗酸杆菌筛查、GeneXpertMTB/RIF进行MTB-DNA和利福平(RIF)耐药检测。结果:273例结核病患者中抗酸染色、T-SPOT.TB和GeneXpertMTB/RIF的敏感性分别为26.74%(73/273)、89.74%(245/273)和72.53%(198/273),特异性分别为100%、93.33%和100%,阳性预测值分别为100%、98.79%和100%,阴性预测值分别为18.37%、60.00%和37.50%,准确性分别为37.11%、90.25%和76.42%,3种方法的敏感性差异有统计学意义(χ~2=248.39,P<0.01)。3种方法对肺结核的检出率分别为34.76%(73/210)、90.00%(189/210)和94.29%(198/210),差异有统计学意义(χ~2=234.937,P<0.01)。3种方法对肺外结核的检出率分别为0(0/63)、88.88%(56/63)和0(0/63)。抗酸染色阳性的肺结核患者中TSPOT.TB和GeneXpertMTB/RIF的阳性率分别为93.15%(68/73)和100%(73/73),抗酸染色阴性肺结核患者T-SPOT.TB和Genexpert MTB/RIF的阳性率为88.32%(121/137)和91.24%(125/137)。结论:T-SPOT.TB和GeneXpertMTB/RIF 2种方法对诊断结核病和肺结核的诊断效能明显优于抗酸染色,T-SPOT.TB对肺外结核患者有更高的检出率。

GeneXpert MTB/RIF技术检测结核分枝杆菌的应用评价

目的:探讨GeneXpert MTB/RIF分子诊断系统在结核分枝杆菌检测中的应用价值。方法:回顾性分析2017年10月-2019年3月在武汉大学中南医院进行GeneXpert MTB/RIF、抗酸染色和γ-干扰素释放实验的患者实验结果,通过检测各项技术的检出率、灵敏度和特异度,评估GeneXpert MTB/RIF检测系统在结核检测中的应用价值。结果:GeneXpert MTB/RIF分子诊断仪适用于检测除血液之外的多种标本类型以及利福平耐药情况。GeneXpert MTB/RIF、抗酸染色结果和γ-干扰素释放实验的阳性率分别为28.47%,13.50%和22.26%。灵敏度分别为90.47%,44.05%和69.05%。三种方法的特异度均较高,分别为98.95%,100.00%和98.42%。结论:GeneXpert MTB/RIF分子诊断仪有较高的灵敏度和特异度,能够极大提高结核的快速诊断水平。

北京市青年肺结核特点分析

目的探讨青年肺结核患者的特点。方法收集2016年10月—2018年4月在北京结核病控制研究所门诊登记管理的15～44岁肺结核病例共计201例。对患者的性别、职业、户籍、发病前诱因、临床症状、病原学、影像学分布、免疫学检查结果进行归纳和统计学分析。结果 201例病例中,男性117例,女性84例,男女比为1.39∶1。职业按构成比递降依次为农民53例(26.37%)、技术人员34例(16.92%)、工人25例(12.44%)、学生24例(11.94%)、待业23例(11.44%)、干部职员16例(7.96%)、教师11例(5.47%)、医护人员5例(2.49%)。非户籍人口125例(62.19%),明显多于户籍患者(37.81%)。109例(54.23%)的患者存在诱发抵抗力下降的因素。113例(56.22%)患者就诊时无明显临床症状;88例(43.78%)患者因症就诊,临床症状以咳嗽咳痰(78.41%)最为常见,其次是发热(23.86%)、咯血(15.90%)、乏力消瘦(4.48%)、咽痛(1.14%)。140例发生在单肺叶,有空洞者24例,多肺叶有空洞者24例,病变广泛者更易出现空洞,差异有统计学意义(χ~2=11.712,P<0.05)。涂阳患者56例,涂阳率27.86%,病原学检测阳性率49.25%。有症状组88例,病原学检测阳性率68.18%,明显高于无症状组(34.51%),差异有统计学意义(χ~2=22.437,P<0.05)。多肺叶和/或空洞形成组85例,病原学检测阳性率64.71%,明显高于单肺叶且无空洞组(37.93%),差异有统计学意义(χ~2=14.07,P<0.05)。99例患者进行γ-干扰素测定,87例阳性,敏感性87.88%。88例行结核菌素(PPD)试验,84例阳性,敏感性95.45%。2种检测结果敏感性比较,差异无统计学意义(χ~2=3.417,P>0.05)。结论北京市青年肺结核患者男性居多,职业分布前5位的依次是农民、技术人员、工人、学生、待业,以非户籍人口居多;多数人发病前存在诱发抵抗力下降的因素。有临床症状组和影像学累及多肺叶者和/或有空洞形成者病原学检测阳性率高。健康检查是检测城市青年肺结核的重要途径。γ-干扰素在肺结核患者中的阳性率高,与PPD试验敏感性一致,是诊断菌阴肺结核的重要辅助检查。

浙江嘉兴地区结核病机会性筛查结果分析

目的探索结核病机会性筛查的有效性及可行性。方法选择2016年1月-2017年8月于嘉兴第一医院门诊就诊14岁~89岁患者共2 056例,用纳入标准进行初筛,高危人群再用结核抗体IgG/IgM检测和结核分枝杆菌γ-干扰素体外释放实验(IGRA)进行复筛,并参照WS 288—2008《肺结核诊断标准》对初筛高危人群作结核病诊断。结果结核病机会性筛查入选筛查2 056人次,门诊筛查率为12.08%,诊断为结核病104例,初筛检出率为5.06%,复筛检出率为12.35%;按照年龄分组,结核病检出率在20岁~年龄组呈现一个小高峰,最高峰出现在50岁~年龄组,其余各组均有分布。结论结核病机会性筛查具有较高的结核病检出率,经济可行,可以进一步推广。