铅对大鼠皮质神经元γ-氨基丁酸A型受体介导电流及GABA能突触传递的抑制作用

目的研究铅(Pb^(2+))对大鼠皮质神经元γ-氨基丁酸(GABA)A型受体介导电流(I_(GABA))及GABA能突触传递的抑制作用及其机制。方法①分离出生0 d的SD大鼠大脑皮质神经元进行原代培养,培养7~14 d用膜片钳系统记录神经元GABA激活的I_(GABA),检测不同浓度Pb^(2+)(1,5,10,50和100μmol·L^(-1))(Y管给药,作用时间20 s)对GABA(100μmol·L^(-1))激活I_(GABA)的影响,并检测Pb^(2+)50μmol·L^(-1)(Y管给药,作用时间20 s)对不同浓度GABA(1,10,50,100,500和1000μmol·L^(-1))激活I_(GABA)的影响。②取15~19 d日龄雄性SD大鼠大脑制作厚度为350μm的脑片样本,记录自发抑制性突触后电流(sIPSC)、微小抑制性突触后电流(mIPSC)和注入电流诱导的动作电位(AP),检测Pb^(2+)10μmol·L^(-1)(灌流速度2 mL·min^(-1))处理前和处理5 min后sIPSC和mIPSC振幅和频率及AP频率。结果①在10,50和100μmol·L^(-1)浓度时,随浓度升高,Pb^(2+)抑制原代培养神经元I_(GABA)的作用增强,IC_(50)值为(68±20)μmol·L^(-1)。②Pb^(2+)50μmol·L^(-1)抑制GABA最大激活电流(P<0.01),升高GABA的EC50值,由无Pb^(2+)组的(20±6)μmol·L^(-1)增加到(87±39)μmol·L^(-1),表明Pb^(2+)可能以非竞争性机制抑制I_(GABA)。③脑片实验中,与处理前比较,Pb^(2+)10μmol·L^(-1)处理5 min后可逆地抑制神经元sIPSC的频率(P<0.01)而未影响其振幅,而mIPSC的频率和振幅均未受到影响。此外,Pb^(2+)10μmol·L^(-1)抑制AP的频率(P<0.01),降低神经元的整体兴奋性。结论Pb^(2+)对原代培养神经元I_(GABA)有明显的抑制作用;Pb^(2+)可能通过抑制皮质神经元的AP抑制sIPSC的频率;提示Pb^(2+)对原代培养神经元I_(GABA)的抑制以及对脑片神经元sIPSC频率的抑制可能存在不同的机制,反映了Pb^(2+)中毒机制的复杂性。

γ-氨基丁酸B型受体在恶性肿瘤中的研究进展

γ-氨基丁酸(GABA)是中枢神经系统中一种重要的抑制性神经递质,对神经元的兴奋程度有重要影响,也是大脑能量代谢过程中重要的氨基酸。其常用于抗惊厥、抗焦虑和治疗癫痫。近年来,在很多肿瘤细胞中发现γ-氨基丁酸B型受体(GABA_(B)R),其与GABA结合后呈现出完全不同的作用。肿瘤细胞可能通过GABA信号调节其新陈代谢和分裂增殖,同时这些信号也可能影响免疫细胞的功能,进而影响肿瘤微环境。因此,深入研究不同肿瘤中GABA_(B)R的表达情况以及功能,有助于了解其与免疫治疗的关系,开发相应的抗肿瘤药物,提供新的抗肿瘤策略。

γ-氨基丁酸B型受体活性对慢性应激大鼠下丘脑神经元超微结构的影响

目的:观察γ-氨基丁酸B型受体(GABA_(B)R)活性对慢性应激大鼠下丘脑神经元超微结构的影响。方法:Wistar大鼠60只,分为对照组(control)、应激组(stress)、应激结合2-羟基萨氯酚(2-OH-saclofen)给药组(stress+2-OH-saclofen)、应激结合氯苯氨丁酸(baclofen)给药组(stress+baclofen)。采用间歇低频电击大鼠足底并联合噪声的方式建立应激大鼠模型,同时2-羟基萨氯酚(100μg/kg)或氯苯氨丁酸(0.04 g/kg)分别经大鼠腹腔注射。应激40 d后,对处于不同应激阶段的大鼠进行取材。在透射电镜下观察下丘脑神经元超微结构的变化;用高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠下丘脑内NE和DA含量的变化。结果:在透射电镜下观察发现,单纯应激组、应激结合氯苯氨丁酸给药组与正常对照组相比较,大鼠下丘脑神经元的超微结构出现不同程度的退行性变化;相反应激结合2-羟基萨氯酚给药组下丘脑神经元超微结构则未出现退行性改变。用(HPLC)检测大鼠下丘脑内NE和DA含量发现,与正常对照组相比,单纯应激组NE含量明显升高但呈现下降趋势,DA含量则呈上升趋势(P<0.05)。应激结合氯苯氨丁酸给药组NE和DA含量呈上升趋势(P<0.05)。应激结合2-羟基萨氯酚给药组NE和DA含量却接近正常水平。结论:GABA B受体抑制剂2-羟基萨氯酚对慢性应激大鼠下丘脑神经元有保护作用,而GABA B受体激动剂氯苯氨丁酸则有损害作用。

miR-761通过抑制γ-氨基丁酸受体相关蛋白的表达促进主动脉瓣膜钙化

目的探讨miR-761对钙化性主动脉瓣膜疾病(calcified aortic valve disease,CAVD)的影响及其潜在机制。方法于2022年1月至2023年1月从重庆医科大学附属第一医院心胸外科收集正常(6例)和钙化(8例)的瓣膜组织,采用Western blot、免疫组织化学染色和RT-qPCR检测钙化瓣膜组织中自噬基因、成骨基因、γ-氨基丁酸受体相关蛋白(Gamma-aminobutyric acid receptor-associated protein,GABARAP)或miR-761表达的变化;双荧光素酶实验验证miR-761与GABARAP 3′-UTR区的结合;通过细胞免疫荧光实验对分离的猪主动脉瓣膜间质细胞(porcine aortic valve interstitial cells,pVICs)进行表型鉴定;在pVICs中转染miR-761 mimic、inhibitor以及相应的对照构建过表达或敲低miR-761的pVICs细胞系,加入GFP-LC3腺病毒后观察自噬小体数量的变化。成骨培养基(osteogenic medium,OM)处理pVICs前后分别采用Western blot、碱性磷酸酶染色和茜素红S染色检测pVICs的成骨分化能力。结果与正常组织比较,钙化瓣膜组织中α-SMA、RUNX2、Beclin 1、ULK1和GABARAP蛋白表达上调,p62蛋白、miR-761表达下调(P<0.05);双荧光素酶实验验证了miR-761与GABARAP 3′-UTR区的结合(P<0.05);分离出的pVICs表达间质细胞标记物α-SMA、Vimentin,不表达内皮细胞标记物CD31;共聚焦显微镜结果显示,敲低miR-761使pVICs的自噬小体生成增多;此外,蛋白、碱性磷酸酶染色、茜素红S染色结果均显示,敲低miR-761显著增加pVICs中的GABARAP的表达,显著降低OPN、α-SMA、RUNX2、CollagenⅠ的表达(P<0.05),抑制OM诱导的细胞钙盐沉积。结论miR-761可能通过抑制GABARAP的表达抑制自噬,促进心脏瓣膜钙化。

麻射安金丸对慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌大鼠模型气道炎症及黏蛋白5AC和γ-氨基丁酸A受体α亚基表达水平的影响

目的 探讨麻射安金丸对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道黏液高分泌大鼠模型气道炎症及黏蛋白5AC(MUC5AC)和γ-氨基丁酸A受体α亚基(GABAARα)表达水平的影响。方法 将102只体重(195±20)g的7周龄雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、氨溴索阳性对照组及中药低、中、高剂量组,每组17只。除正常组外,其余各组均采用脂多糖滴入联合香烟烟雾暴露方式建立COPD气道黏液高分泌大鼠模型。造模成功后,氨溴索阳性对照组给予氨溴索溶液[54 mg/(kg·d)],中药低、中、高剂量组分别给予4.375、8.750、17.500 g/(kg·d)麻射安金丸(汤剂),正常组和模型组以等容量生理盐水灌胃,六组均连续灌胃28 d。实验结束后采用苏木精-伊红染色、过碘酸希夫染色观察各组肺组织病理学变化,酶联免疫吸附试验检测各组血清炎症因子水平和肺泡灌洗液细胞因子水平,采用蛋白质印迹法检测各组肺组织中MUC5AC、GABAARα含量。结果 模型组气道及肺组织病理变化较重,白细胞介素-1β(IL-1β)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、MUC5AC、GABAARα水平均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。中药低、中、高剂量组气道及肺组织病理变化轻于模型组,IL-1β、NE、TNF-α、TGF-β1、TIMP-1、MMP-9、MUC5AC、GABAARα水平均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。中药中剂量组IL-1β、NE、MMP-9、GABAARα均低于中药低剂量组;中药高剂量组IL-1β、NE、TNF-α、TGF-β1、TIMP-1、MMP-9、MUC5AC、GABAARα表达均低于中药低、中剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 麻射安金丸能改善COPD气道黏液高分泌状态,抑制气道重塑,可能与其减轻炎症损伤,抑制MUC5AC、GABAARα表达有关。

阿尔茨海默病脑内γ-氨基丁酸受体的变化

阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种进行性发展的神经系统退行性疾病,主要的临床病理特征为β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)斑块,tau过度磷酸化在细胞内形成神经元纤维缠结。目前,越来越多的证据表明,γ-氨基丁酸(gamma aminobutyric acid,GABA)受体的变化与AD有着紧密的关系,有研究表明,GABA受体中各亚基在AD患者中表达水平有所变化。因此推测,GABA各亚基的变化可能与AD发病机制有关,但目前在临床,仍无较好地通过靶向治疗GABA受体来改善AD的方法。为了进一步了解GABA受体的变化与AD的关系,本文综述了脑内GABA受体在AD患者及动物模型中的变化,发现AD患者的GABA(A)受体亚基中出现了差异性表达。总结AlzheimerDataBase数据库AD中GABA受体各个亚基的改变,基于数据,我们发现少数几个GABA亚基发生了显著性变化。而证据显示,GABA受体的变化改变了脑内的神经活动,另有研究发现,通过GABA受体激动剂与拮抗剂治疗小鼠可以改善小鼠的认知能力。通过总结GABA受体在AD中的差异表达,希望为治疗AD提供更为准确的靶点。

儿童抗γ-氨基丁酸B受体脑炎1例并文献复习

目的探讨儿童抗γ-氨基丁酸B(GABAB)受体脑炎的发病机制、临床特点、辅助检查以及诊断与治疗方法。方法回顾性分析我院随诊15个月的1例抗GABAB受体(GABABR)脑炎患儿的临床资料,总结患儿临床特征、影像学改变、血清(脑脊液)免疫学检查及临床诊疗经过,并分别以“自身免疫性脑炎”“γ-氨基丁酸B受体”“autoimmune encephalitis”“anti-gamma-aminobutyric acid B receptor”为检索词,分别在中国知网、万方、Pubmed数据库查询建库至2023年1月的相关文献,总结分析儿童抗GABABR脑炎的临床特点及影像学改变。结果本研究中患儿急性起病,以肌张力障碍、情绪异常为主要表现,头颅MRI提示基底节区对称性损害,血清抗GABABR抗体阳性,脑脊液抗GABABR抗体阴性,诊断为“抗GABABR脑炎”,经丙球加类固醇免疫治疗后病情缓解。检索到8篇文献,结合本研究,共11例患儿,男性居多,一线治疗主要是皮质类固醇、静注免疫球蛋白、血浆置换。11例患儿中,除1例自发缓解外,其余患儿均接受一线治疗,2例死于严重感染,其余均预后良好。结论临床上对于单纯头颅MRI基底节区对称性损害的患者,排除感染、代谢、肿瘤等常见病因后需注意鉴别抗GABABR脑炎,尽早完善自身免疫性脑炎抗体检测,及早发现并积极治疗能改善患者预后。

松郁安神方联合阿普唑仑对失眠大鼠基底核多巴胺受体和γ-氨基丁酸受体的影响

目的:观察松郁安神方联合阿普唑仑对失眠大鼠睡眠状态及基底核多巴胺受体和γ-氨基丁酸(GABA)受体的影响。方法:将SPF级雄性SD大鼠分为对照组(8只)和造模组40只,造模组采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)建立失眠大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、阿普唑仑低剂量组(0.04 mg/kg)、阿普唑仑高剂量组(0.08 mg/kg)、松郁安神方组(17 g/kg)及松郁安神方联合阿普唑仑低剂量组,每组8只,灌胃相应药物,对照组和模型组灌胃等容积生理盐水,1次/d,连续7 d。期间观察各组大鼠一般生理状态。实验结束后,通过Western blotting检测大鼠基底核多巴胺受体和GABA受体蛋白的表达情况。结果:松郁安神方联合阿普唑仑低剂量组大鼠饮食、睡眠等生理活动接近对照组,毛色有光泽,体质量较阿普唑仑高剂量组显著增加(P<0.01),且基底核GABA_(A)受体蛋白表达量显著高于阿普唑仑低、高剂量组(P<0.01),多巴胺D_(2)受体(D_(2)DR)蛋白表达量显著低于阿普唑仑低、高剂量组(P<0.01)。结论:松郁安神方能够通过降低阿普唑仑对失眠大鼠的使用剂量,增强阿普唑仑的镇静催眠作用,并降低其不良反应。松郁安神方能够增强阿普唑仑对失眠大鼠基底核GABA_(A)受体蛋白的上调作用和对D_(2)DR蛋白表达的抑制作用,其机制可能与调控失眠大鼠基底核多巴胺受体和GABA受体信号通路相关。

不同强度电针对PCPA失眠大鼠下丘脑γ-氨基丁酸及受体的影响

通过观察不同强度电针对睡眠节律紊乱大鼠下丘脑γ-氨基丁酸(GABA)及受体(GABRA1)的影响,初步探讨针灸治疗失眠的作用机制及不同强度电针的效应差异.用免疫组织化学技术观察失眠大鼠下丘脑GABA阳性细胞的表达情况,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测失眠大鼠下丘脑GABRA1 mRNA表达改变.研究发现,对氯苯丙氨酸(PCPA)化失眠大鼠下丘脑GABA阳性细胞染色较浅,且表达量减少,GABRA1mRNA表达明显降低(P<0.01);经电针治疗5 d后,失眠大鼠下丘脑GABA阳性神经元染色较深,表达量较多,GABRA1 mRNA表达显著升高(P<0.01),且2 V电针刺激作用比1 V电针刺激更为明显.结果表明电针可增加失眠大鼠下丘脑GABA及受体的表达,调节睡眠-觉醒周期,发挥镇静催眠作用,且2 V电针刺激效果优于1 V电针刺激.

反复热性惊厥过程中γ-氨基丁酸B受体对硫化氢的调节作用

目的热性惊厥(febrile se izure,FS)是婴幼儿时期最常见的惊厥性疾患之一,阐明其发生机制一直是该领域的重要研究课题。该课题前期的研究证明,γ-氨基丁酸B受体(-γam inobutyric ac id B receptor,GABABR)亚基和气体信号分子硫化氢(H2S)均在反复热性惊厥中发挥了重要作用。该文使用GABABR激动剂ba-c lofen,抑制剂Phac lofen,探讨GABABR对FS大鼠硫化氢/胱硫醚-β-合成酶(cystath ion ine--βsynthase,CBS)体系表达的影响。方法大鼠随机分为对照组,FS组,FS+bac lofen组,FS+phac lofen组。采用热水浴诱导大鼠FS,隔日诱导1次,共10次。采用分光光度计法测定大鼠血浆中H2S含量;用原位杂交方法观察CBS mRNA表达情况;用免疫组化方法观察CBS蛋白表达情况。结果FS+bac lofen组H2S含量较FS组升高427.45±15.91μmol/L vs362.14±19.71μmol/L,同时CBS表达也较FS组增强;而FS+phac lofen组H2S含量较FS组降低189.72±21.53μmol/L vs 362.14±19.71μmol/L,同时CBS表达也较FS组减弱。结论反复热性惊厥过程中,GABABR的改变可影响H2S/CBS体系的表达。

针刺干预对慢性束缚应激模型大鼠海马和额叶皮层γ-氨基丁酸A受体和B受体表达相关性研究

目的通过观察针刺对慢性束缚应激抑郁模型大鼠海马和额叶皮层γ-氨基丁酸A受体和B受体(γ-aminobuty ric acid A receptor and B receptor,GABAAR、GABABR)表达的影响,旨在深入揭示针刺干预抑郁状态可能存在的特殊机制和作用途径,为针刺抗抑郁之机制研究作出补充,为临床针刺治疗抑郁症提供实验依据。方法将24只SD大鼠采用随机数表法分为空白组、模型组、模型+针刺组、模型+氟西汀组,通过慢性束缚应激结合孤养的方式建立心理应激模型,针刺干预选取"百会"(GV20)、"印堂"(GV29)、双侧"三阴交"穴(SP6),平刺进针,深度0.5~1 cm,每次20分钟,每日1次,持续28天。采用体重和糖水实验评价模型大鼠行为学改变情况,运用蛋白质印迹法(Western Blot)检测海马和额叶皮层组织GABAAR和GABABR的蛋白表达水平。结果 (1)与空白组相比,模型组大鼠体重增长值以及糖水偏爱明显降低(P<0.01);模型组大鼠海马和额叶皮层中GABAAR和GABABR蛋白含量明显降低(P<0.01);(2)与模型组相比,针刺组大鼠体重增长值和糖水偏爱均明显升高(P<0.01),同时上调海马中GABAAR蛋白含量及额叶皮层GABAAR和GABABR蛋白含量均明显升高(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论针刺可提高大鼠海马GABAAR和额叶皮层GABAAR,GABABR含量,逆转慢性束缚应激大鼠抑郁状态,提示这可能是针刺抗抑郁作用机制。

罗哌卡因对心脏毒性的γ-氨基丁酸_A受体机制

目的探讨罗哌卡因对心脏毒性的γ-氨基丁酸A受体机制。方法通过对新西兰大白兔侧脑室注入γ-氨基丁酸A受体激动药蝇蕈醇和γ-氨基丁酸A受体阻滞药印防己毒素,观察静脉输注罗哌卡因致心脏毒性发生时的血浆罗哌卡因浓度。结果侧脑室注入蝇蕈醇可显著延长罗哌卡因心脏毒性的发生时间,提高罗哌卡因心脏毒性发生时的血浆罗哌卡因浓度;侧脑室注入印防己毒素可明显缩短罗哌卡因心脏毒性的发生时间,降低罗哌卡因心脏毒性发生时的血浆罗哌卡因浓度。结论罗哌卡因心脏毒性的作用机制除了罗哌卡因的心脏直接毒性外,部分是由中枢神经系统γ-氨基丁酸A受体所介导的。

中药对疲劳大鼠脑内学习记忆相关递质谷氨酸及γ-氨基丁酸受体mRNA表达的影响

目的观察不同方药对运动性疲劳模型大鼠学习记忆相关递质谷氨酸(GLU)及γ-氨基丁酸(GABA)受体mRNA表达水平的调节作用。方法 SD大鼠随机分正常对照组、模型组、疏肝中药组、健脾中药组、补肾中药组。采用大鼠游泳方式建立运动性疲劳动物模型,并应用疏肝方剂四逆散、健脾方剂四君子汤、补肾方剂金匮肾气丸对疲劳大鼠进行干预,通过荧光定时定量PCR实验技术测定各组大鼠海马及纹状体GLU的NMDA受体亚单位NR1/NR2A/NR2B mRNA以及GABA受体GABAARα1 mRNA的表达水平。结果模型组海马部位NR1、NR2A、NR2B mRNA与正常组比较表达下降,GABAARα1 mRNA表达升高。纹状体部位模型组NR1、NR2A mRNA表达升高,NR2B mRNA表达下降,GABAARα1 mRNA表达升高。疏肝中药组对海马及纹状体NR1和NR2A受体mRNA的调节作用最好,健脾中药组对NR2B受体mRNA的调节作用最好,两方都能够调节升高的GABAARα1 mRNA表达水平。补肾中药组对上述受体mRNA的调节作用不明显。结论应用疏肝、健脾方剂四逆散和四君子汤可以很好地调节运动性疲劳模型大鼠脑内学习记忆相关递质GLU和GABA受体mRNA的表达。

焦虑症γ-氨基丁酸受体机制与药物干预研究进展

焦虑症是一种常见的精神类疾病,随着社会压力的日益加大,发病率逐渐升高。以往研究证实,焦虑症与γ-氨基丁酸受体有关,现阶段又发现γ-氨基丁酸受体的多个亚型参与了焦虑症的病理生理过程。该文综述了γ-氨基丁酸受体不同亚型在焦虑症发病机制中所起作用及不同机制下药物干预的研究进展。

黄连温胆汤对氯苯丙氨酸致失眠小鼠的睡眠改善及γ-氨基丁酸能系统通路递质含量及受体表达的影响

目的观察黄连温胆汤对氯苯丙氨酸(PCPA)致失眠小鼠的睡眠改善作用及对γ-氨基丁酸(GABA)能系统通路相关受体及递质的影响,探讨其治疗失眠的作用机制。方法将48只雄性KM小鼠随机分为空白组、模型组、地西泮组(2 mg·kg^(-1))及黄连温胆汤低、中、高剂量组(8.45、16.90、33.80 g·kg^(-1))。除空白组外,其余各组小鼠均腹腔注射450 mg·kg^(-1)PCPA(每日1次,连续2 d)建立小鼠失眠模型。造模成功后,各组小鼠灌胃给予相对应药物,每日1次,连续灌胃7 d。观察记录各组小鼠的活动次数、体质量及戊巴比妥钠阈上剂量诱导的睡眠潜伏期、睡眠时间;采用ELISA法测定小鼠脑组织中谷氨酸(GLU)、GABA含量,计算GLU/GABA比值;采用免疫组织化学法测定脑组织中谷氨酸脱羧酶65/67(GAD65/67)、γ-氨基丁酸转运蛋白亚型1(GAT-1)、γ-氨基丁酸A受体α1亚型(GABA ARα1)、γ-氨基丁酸A受体γ-2亚型(GABA ARγ-2)及Na+-K+-Cl-协同转运蛋白1(NKCC1)的表达情况;采用Western Blot法测定小鼠脑组织中GAD65/67、GABA ARα1及NKCC1蛋白的表达情况。结果与空白组比较,模型组小鼠戊巴比妥钠阀上剂量诱导的睡眠潜伏期显著延长(P<0.01),睡眠时间显著缩短(P<0.01),活动次数显著增加(P<0.01),体质量显著降低(P<0.01),脑组织中的GABA含量明显下降(P<0.05),GLU含量及GLU/GABA比值显著升高(P<0.01),脑组织中GAD65/67、GABA ARα1蛋白表达显著下调(P<0.01),NKCC1蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,黄连温胆汤可有效缩短戊巴比妥钠阀上剂量诱导的小鼠睡眠潜伏期(P<0.05,P<0.01),并延长小鼠睡眠时间(P<0.01),减少造模后小鼠活动次数(P<0.01),使体质量显著上升(P<0.05,P<0.01),升高脑组织中的GABA含量(P<0.01),降低GLU含量及GLU/GABA比值(P<0.01),并显著上调脑组织中GAD65/67、GAT-1、GABA ARα1、GABA ARγ-2蛋白表达(P<0.01),下调NKCC1蛋白表达(P<0.01)。结论黄连温胆汤具有较好的镇静催眠作用,对PCPA致失眠小鼠有睡眠改善作用,可能与其调节小鼠脑内GABA能系统通路神经递质含量及受体表达有关。

介绍一种大鼠脑中γ-氨基丁酸受体的检测方法

目的：介绍一种大鼠脑中γ－ 氨基丁酸受体的快速简便的检测方法。方法：用３Ｈ－ ＧＡＢＡ 为配体来检测大鼠脑神经末梢微囊中的ＧＡＢＡ受体。检测ＧＡＢＡ受体的合适条件是１．０ ×１０－３ｍｏｌ／Ｌ的脑膜蛋白在３７℃下反应３０ ｍｉｎ。结果：大鼠脑中存在ＧＡＢＡ受体，Ｋｄ＝ （９７．３±５．８） ×１０－９ｍｏｌ／Ｌ，Ｂｍａｘ ＝０．１０６１ ×１０－９ｍｏｌ／ｇ 蛋白±０．０１０３×１０ －９ｍｏｌ／ｇ 蛋白，属低亲和力受体。结论：用３Ｈ－ ＧＡＢＡ可以检测大鼠脑中的ＧＡＢＡ受体。

负透镜诱导豚鼠视网膜中γ-氨基丁酸及其受体的表达

背景 研究表明,抑制性氨基酸神经递质γ-氨基丁酸（GABA）在近视的发生和发展过程中发挥关键作用,GABA及GABA受体拮抗剂对近视发生的抑制作用已被证实,但相关作用机制的研究鲜见报道.目的 探讨负透镜诱导性近视（LIM）豚鼠视网膜中GABA及其受体亚型表达的变化,探讨GABA及GABA受体拮抗剂抑制近视发生的机制.方法 采用随机数字表法将40只3周龄健康三色短毛豚鼠随机分为正常对照组和模型组.正常对照组取右眼作为正常对照眼,模型组右眼佩戴-10 D透镜4周以诱导近视模型作为实验眼,左眼不戴镜作为对照眼.分别于造模前及造模后4周用A型超声法和带状光检影法测量各组豚鼠的眼轴长度和屈光度;于造模后4周断颈法处死豚鼠并分离视网膜,采用高效液相色谱分析（HPLC）法检测豚鼠视网膜中GABA含量的变化,采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测豚鼠视网膜中GABA受体mRNA的相对表达量. 结果 造模后4周,模型组实验眼、正常对照眼和模型组对照眼屈光度分别为（-3.39±0.70）、（1.03±0.68）和（0.77±0.64）D,模型组实验眼近视屈光度较正常对照眼和模型组对照眼均明显增大,差异均有统计学意义（t=-16.382、-17.113,均P＜0.05）;模型组实验眼、正常对照眼和模型组对照眼眼轴长度分别为（8.62±0.08）、（8.31±0.05）和（8.32±0.05） mm,模型组实验眼眼轴较正常对照眼和模型组对照眼明显延长,差异均有统计学意义（t=10.981、15.838,均P＜0.05）;豚鼠正常对照眼、模型组实验眼、模型组对照眼视网膜中GABA含量分别为（14.83±1.20）、（18.63±1.58）和（15.74±0.96） μmol/g,模型组实验眼视网膜中GABA含量明显高于正常对照眼和模型组对照眼,差异均有统计学意义（t=-6.045、6.876,均P＜0.05）;模型组实验眼视网膜中GABAA受体、受体GABAC受体mRNA的相对表达量明显高于正常对照眼,差异均有统计学意义（t=-3.211、-2.532,均P＜0.05）;模型组实验眼视网膜中GABAA受体、受体GABAC受体mRNA的相对表达量明显高于模型组对照眼,差异均有统计学意义（t=2.512、5.645,均P＜0.05）,而3个组间GABAV受体mRNA的相对表达量差异无统计学意义（F=2.676,P＞0.05）. 结论 LIM豚鼠视网膜中GABA及GABAA受体mRNA、GABAC受体mRNA表达上调,而GABAB受体mRNA表达无显著变化.

周边γ-氨基丁酸通过GABA_B受体调控骶髓后联合核神经元谷氨酸能突触

目的研究突触周边γ-氨基丁酸(ambient GABA)通过GABAB受体调控骶髓后联合核(SDCN)神经元谷氨酸能突触的机制。方法在急性切取的骶段脊髓薄片上,利用全细胞膜片钳法记录骶髓后联合核神经元谷氨酸能兴奋性突触后电流(EPSCs),将GABAB受体用其特异性受体拮抗剂CGP52432阻断,观察谷氨酸突触终末上的GABAB受体被周边GABA作用的影响。结果在突触后GABAB受体被从胞内阻断的条件下,再灌流CGP52432阻断谷氨酸能突触前GABAB受体,可增加刺激引发的EPSCs(eEPSCs)幅度;改变配对刺激的两个EPSC比率(paired-pulse ratio,PPR),并激发沉默突触(silent synapse)。但CGP52432对微小兴奋性突触后电流(mEPSCs)无影响。结论位于SDCN神经元谷氨酸能突触前的GABAB受体受周边GABA调控。这种影响参与调节谷氨酸释放并可能参与痛觉信息在脊髓水平的传递。

脑性瘫痪幼鼠脑中γ-氨基丁酸A受体mRNA表达变化

目的:探讨缺血缺氧窒息脑性瘫痪(以下简称脑瘫)幼鼠脑中γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,GABAA)受体α1,β2亚单位mRNA的变化规律,及脑瘫形成的生物学机制。方法:应用RT-PCR方法分别检测大鼠缺血缺氧后不同时间(2,12,24,48,96h)大脑、海马中GABAA受体α1,β2亚单位mRNA表达情况。结果:正常对照鼠脑内GABAA受体α1,β2亚单位的mRNA广泛表达;脑瘫组单位面积(mm2)皮质及海马GABAA受体α1mRNA阳性细胞数在窒息后12h分别增加20%和34%,96h分别增加57%和75%与对照组比F=7.22,3.23,P<0.05或0.01;单位面积(mm2)皮质及海马GABAA受体β2mRNA阳性细胞数窒息后2h分别下降19%和34%与对照组比F=7.12,P<0.05,12h分别下降34%和46%与对照组比F=2.56,P<0.01,24h恢复正常。结论:GABAA受体α1,β2mRNA的变化可能为脑瘫形成的重要原因。