Toll样受体4拮抗剂厄立特兰对抑郁症大鼠模型前额叶和海马神经元发生和γ-氨基丁酸谷氨酸平衡的影响

目的:研究探讨Toll样受体4拮抗剂厄立特兰对抑郁症大鼠模型前额叶和海马神经元发生和γ-氨基丁酸谷氨酸平衡的影响。方法:选取100只健康的SD大鼠为本研究对象,分为健康对照组、空白对照组、厄立特兰组(低剂量组、中剂量组、高剂量组),每组大鼠各20只。建立大鼠抑郁症模型,待造模完成后,空白对照组给予生理盐水注射、厄立特兰组大鼠分别给予高、中、低剂量的厄立特兰注射液进行注射治疗。于连续给药21 d后对各组大鼠的自发活动总路程、强迫游泳不动时间、前额叶和海马神经元中的γ-氨基丁酸谷氨酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、Toll样受体4(TLR-4)蛋白水平进行检测对比。并采用Pearson相关性检验对抑郁症大鼠的TLR4与GABA、Glu水平相关性进行分析探讨。结果:与健康对照组大鼠相比,空白对照组、厄立特兰组的自发活动总路程均显著降低,强迫游泳不动时间显著增加(P<0.05),空白对照组与厄立特兰组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05),且厄立特兰组大鼠随着剂量的增加,自发活动总路程呈递增趋势,强迫游泳不动时间呈降低趋势(P<0.05)。与健康对照组相比,空白对照组、厄立特兰组大鼠前额叶、海马区的GABA水平有显著降低,Glu、TLR4水平显著升高,且厄立特兰组GABA高于空白对照,Glu、TLR4水平低于空白对照组,厄立特兰组内,随着剂量的增加,GABA显著升高,Glu、TLR4显著降低(P<0.05)。经Pearson相关性检验分析,TLR4与GABA呈负相关,与Glu呈正相关性(P<0.05)。结论:厄立特兰能够降低抑郁症对大鼠前额叶和海马神经元发生和γ-氨基丁酸谷氨酸平衡的影响,发挥作用的机制是厄立特兰通过拮抗Toll样受体4,进而升高GABA水平,降低Glu水平,从而发挥前额叶和海马神经元的神经保护作用。

无抽搐电休克治疗大鼠抑郁症与海马γ-氨基丁酸通路的关系

目的观察抑郁大鼠无抽搐电休克治疗(MECT)后海马内谷氨酸脱羧酶-65(GAD65)的表达以及γ-氨基丁酸(GABA)含量的变化,并阻断γ-氨基丁酸A型受体(GABAA),探讨MECT治疗抑郁症与GABA通路的关系。方法48只SD大鼠随机分为MECT治疗组(治疗组)、GABAA受体拮抗组(拮抗组)、抑郁模型对照组(模型组)、空白对照组(对照组),每组12只。前3组大鼠采用孤养加慢性轻度不可预见性应激建立抑郁模型,治疗组和拮抗组均隔天给予MECT处理6次,但后者在丙泊酚腹腔注射麻醉时同时注射GABAA受体特异性阻断剂荷包牡丹碱,余2组正常饲养。随后行open-field评分,每组随机抽取6只大鼠以免疫组织化学法检测海马GAD65蛋白的表达,其余6只以高效液相色谱法分析海马GABA含量。结果①open-field评分:电休克处理后,治疗组和拮抗组水平计分、垂直计分均高于模型组(P<0.05),拮抗组低于治疗组(P<0.05),提示电休克可有效缓解大鼠抑郁状态,阻断GABAA受体可减弱电休克疗效。②GAD65表达、GABA含量:模型组GAD65的表达量、GABA含量低于对照组(P<0.05),治疗组、拮抗组大鼠高于模型组(P<0.05),提示电休克可以上调GAD65表达,升高GABA含量。结论无抽搐电休克可上调抑郁大鼠海马GAD65表达,升高GABA含量,改善抑郁症状,GABA通路可能部分参与了无抽搐电休克治疗抑郁症的机制。

神经病理性疼痛大鼠脊髓中N-甲基-D-天门冬氨酸受体1亚基与γ-氨基丁酸B受体2亚基表达的变化

目的通过半定量检测L5神经根结扎(SNL)大鼠脊髓N-甲基-D-天门冬氨酸受体1亚基(NMDAR1)与γ-氨基丁酸B受体2亚基(GABABR2)表达的变化,探讨NMDAR1与GABABR2在神经病理性疼痛发生机制中的作用。方法结扎L5神经根建立大鼠神经病理性疼痛模型。24只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组和SNL组。分别于术前及术后不同时间点采用vonFrey纤毛测定两组大鼠的机械刺激缩足阈值(PWT值),并在阈值最低点取脊髓腰膨大部,采用Western印记法半定量检测NMDAR1与GABABR2的表达。结果与假手术组比较,SNL组在术后各时间点的PWT值均显著下降(P值分别<0.01、0.05),并在术后8d降至最低点。术后8d,假手术组术侧与健侧脊髓NMDAR1和GABABR2蛋白表达的差异均无统计学意义(P值均>0.05);SNL组术侧NMDAR1的表达较健侧及假手术组术侧均显著增高(P值均<0.01),而GABABR2的表达则较健侧及假手术组术侧显著下降(P值均<0.01)。结论SNL诱导大鼠机械痛敏行为的发生,SNL大鼠脊髓中NMDAR1与GABABR2表达的变化可能与神经病理性疼痛的形成有关。

针刺对中风痉挛性瘫痪血清氨基酸含量的影响

目的研究针刺对中风痉挛性瘫痪血清氨基酸含量的影响。方法将64例病人随机分为透刺滞针组(观察组)36例和康复药物组(对照组)28例。观察组与对照组均采用bobath易化技术和药物疗法,观察组在对照组的基础上施行透刺滞针术。运用高效液相技术检测治疗前后血清中谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)的含量。结果观察组、对照组治疗前后血清Glu的含量及Glu/GABA值均降低,GABA的含量均升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);两组治疗后比较,Glu、GABA的含量及Glu/GABA值差异均具有统计学意义(P<0.05),观察组疗效优于对照组。结论透刺滞针术结合康复、药物治疗对中风痉挛性瘫痪具有较好的疗效,其作用机制与调节血清中的Glu、GABA含量有关。

定痫丸对戊四唑点燃癫痫大鼠脑内神经递质含量及海马c-fos表达的影响

目的:通过观察定痫丸对癫痫大鼠神经递质谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)和海马c-fos表达的影响来探讨该方治疗癫痫的机理。方法:采用腹腔注射戊四唑3.2mg/100g,连续给予4周造成大鼠癫痫模型,造模同时给予定痫丸、丙戊酸钠和定痫丸加丙戊酸钠治疗,连续4周。结果:采用戊四唑造模后,模型组大鼠脑组织中谷氨酸含量升高而γ-氨基丁酸含量明显降低,c-fos阳性细胞数明显增多,与正常组比较有显著性差异(P<0.05)。定痫丸组、丙戊酸钠组和中西药合用组均可明显降低谷氨酸含量,升高γ-氨基丁酸含量,减少c-fos阳性细胞数,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论:定痫丸可对抗戊四唑致大鼠癫痫的作用,作用机理与降低脑内神经递质谷氨酸含量、升高γ-氨基丁酸含量以及阻断脑内c-fos蛋白的表达有关。

阿尔茨海默病与睡眠障碍相互作用机制研究进展

大约50%以上的阿尔茨海默病(AD)患者伴有明显的睡眠障碍,同时睡眠障碍与认知、学习及记忆功能下降有关,增加AD的发生风险并促进AD进展。AD与睡眠障碍存在双向调节关系,睡眠障碍可通过促进Aβ沉积、tau蛋白聚集、蓝斑核—去甲肾上腺素能系统功能失调、食欲素能系统紊乱、氧化应激、神经炎症、谷氨酸能和γ-氨基丁酸能系统功能失调来增加AD发病风险;同时,AD也可通过损害睡眠调节相关脑区或改变睡眠神经通路导致睡眠障碍;而蓝斑核—去甲肾上腺素能系统功能失调对AD病理和睡眠障碍同时具有促进作用。睡眠障碍与AD相互作用,形成恶性循环,深入探讨二者相互作用的分子机制有助于预测AD发病风险、控制疾病进展。

沉香香粉薰香吸入促睡眠作用及机制研究

目的:探究沉香香粉加热薰香吸入给药促睡眠的作用及可能的作用机制。方法:健康昆明种小鼠分为正常组、模型组、阳性对照组及沉香粉低、中、高剂量组,每组8只。连续2 d灌胃对氯苯丙氨酸(PCPA,300 mg·kg^(-1)),诱导失眠模型。期间同时给药,正常组和模型组给予相应体积的0.9%氯化钠溶液,阳性对照组腹腔注射地西泮(2.5 mg·kg^(-1))。沉香低、中、高剂量(0.2、0.4、0.8 g)组采用电子薰香炉120℃加热香薰吸入给药,5 h/次。通过协同戊巴比妥钠促睡眠试验,考察沉香香粉吸入给药镇静促睡眠的情况,并检测海马组织神经递质水平及其受体表达情况,探究沉香香薰吸入促睡眠的作用机制。结果:相比正常组,模型组小鼠的睡眠潜伏期延长,睡眠时间显著缩短,动物已出现明显失眠症状,表明模型制备成功。相比模型组,沉香香粉吸入给药显著缩短睡眠潜伏期,延长协同戊巴比妥钠(50 mg·kg^(-1))促睡眠的时间,有较好的镇静促睡眠作用;机制研究结果显示,相比正常组,模型组小鼠脑组织中神经递质、受体及蛋白表达不同程度降低,而沉香香粉吸入给药后可显著升高γ-氨基丁酸A受体(GABAA)、谷氨酸(Glu)、5-羟色胺(5-HT)和腺苷(AD)水平,同时可显著上调Glu受体1和Glu转运蛋白1(VGluT1)的表达水平。结论:沉香香粉吸入有促睡眠作用,其机制与调节多神经途径及神经递质分泌平衡有关。

麻黄汤不同配伍对大鼠脑内Glu/GABA比值的影响

目的:研究麻黄汤不同配伍对大鼠额叶皮层中谷氨酸/γ-氨基丁酸(Glu/GABA)比值的影响。方法:采用HPLC法测定氨基酸类神经递质的量。结果:桂枝、杏仁、甘草均显著降低了大鼠额叶皮层中Glu/GABA比值(P=0.021,0.007,0.028),且桂枝与甘草(P=0.014)、杏仁与甘草(P=0.009)呈显著的一级交互作用。结论:麻黄汤不同配伍对大鼠额叶皮层中Glu/GABA比值的影响呈规律性变化。

低剂量伽玛刀照射对功能区癫痫猫模型的治疗作用及机制研究

目的观察低剂量伽玛刀照射对青霉素点燃癫痫猫的行为和脑额叶功能区皮质神经递质的影响。方法实验于2007—2009在河北省人民医院伽玛刀治疗中心和临床研究中心完成。选择雄性成年猫80只,按随机数字表法分成3组,癫痫模型组、伽玛刀治疗组各28只,正常对照组24只。正常对照组不做任何处理;其他两组均在猫额叶功能区皮质多次注射青霉素制作点燃癫痫的模型,伽玛刀治疗组在造模成功后给予低剂量照射,DG 15Gy/50%。观察时间点为伽玛刀照射后4、8、12周。采用Smialowki 6级评分法进行行为学观察;采用高效液相色谱荧光法测定脑额叶功能区皮质谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)的含量。结果 80只猫全部进入结果分析。(1)猫行为学观察结果:除正常对照组外,各组实验用猫均出现惊厥行为,点燃率为100%。第12周时伽玛刀治疗组发作级别显著低于癫痫模型组(P<0.05)。(2)实验用猫额叶功能区皮质神经递质的含量:在各时间点,与正常对照组比较,癫痫模型组额叶功能区皮质Glu含量明显增加,GABA含量减低(P<0.05);与癫痫模型组比较,12周时,伽玛刀治疗组额叶功能区皮质Glu含量降低,GABA含量增加(P<0.05)。结论低剂量(15 Gy)伽玛刀照射对青霉素点燃癫痫猫有明显的抗癫痫作用,其机制可能与降低额叶脑功能区皮质Glu的含量和增加GABA的含量有关。

灵芝补气安神功效对动物焦虑行为影响的实验研究

目的:观察灵芝水煎液及其粗多糖对动物焦虑行为的抗焦虑作用及机制。方法:建立装置焦虑模型小鼠和心气虚焦虑装置大鼠模型,除正常对照组、焦虑模型对照组,大小鼠分别灌胃地西泮2.5 mg/kg、灵芝水煎液2、4、6 g/kg、灵芝粗多糖0.04、0.08、0.12 g/kg,末次给药后1 h,观察大、小鼠于高架十字迷宫(EPM)实验中开臂进入次数百分比(OE%)、开臂滞留时间百分比(OT%)及明暗箱(LDT)实验中穿梭次数;行为学实验结束后取大鼠血及大、小鼠脑组织,ELISA法测定小鼠脑组织中小鼠γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(GLU)、5-羟色胺(5-HT)的含量;试剂盒测定大鼠脑组织中GABA、GLU含量,γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)、谷氨酸脱羧酶(GAD)、谷氨酰胺合成酶(GS)活力,血清超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA),血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、心钠素(ANP)含量;免疫组化法观察海马γ-氨基丁酸受体α1(GABAARα1)阳性表达。结果:随心气虚造模时间延长,各组大鼠体质量明显降低,19 d起,各给药组大鼠体质量降幅逐渐减小,22 d起各给药组大鼠体质量均大于心气虚焦虑模型组;灵芝水煎液及粗多糖均可显著升高大、小鼠的OE%、OT%、穿梭次数和脑组织中GABA含量,降低GLU含量及GLU/GABA的比值;降低小鼠脑中5-HT含量;降低大鼠脑中GABA-T活性;升高大鼠脑中GAD、GS活力,血清SOD活力、血浆cAMP含量,降低血清MDA、血浆cGMP、ANP含量,增强海马GABAARα1受体阳性表达;等质量灵芝饮片的水提取物、多糖提取物,表现出相似的抗焦虑效果。结论:灵芝水煎液及其粗多糖对动物焦虑行为有明显抗焦虑作用,抗焦虑主要活性部位可能为灵芝多糖。作用机制与通过调节GLU/GABA-Gln代谢环路中相关酶的活力,升高GABA含量和上调下游GABA/GABAARα1信号通路的表达,纠正兴奋-抑制性神经递质的失衡有关。