γ-谷氨酰胺转肽酶对中期原发性肝癌患者预后的意义

目的探讨肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗HCC患者血清γ-谷氨酰胺转肽酶(GGT)的预后判断价值。方法回顾性研究2008年8月至2011年12月解放军总医院介入放射科收治的1 7 6例接受TA C E治疗的B C L C分期B期H C C患者,按术前血清G G T水平分为两组:高G G T组1 3 0例,正常GGT组46例,比较其生存情况及预后分析。结果高GGT组和正常GGT组TACE治疗前GGT水平分别为176.1±138.8 U/L和33.0±9.3 U/L,具有统计学意义(P<0.001),两组患者的1、2、3年生存率分别为5 2.3%、3 5.4%、2 3.1%和8 6.6%、5 5.3%、4 0.4%。两组患者中位生存时间分别为17.0个月和32.0个月,具有统计学差异,P=0.001。单因素分析显示术前GGT水平、肝硬化、Child分级、肿瘤大小、肿瘤数目及血清AFP水平是影响HCC患者预后的危险因素;多因素分析显示:术前GGT水平及肿瘤大小是中期HCC患者生存的独立危险因素。结论 TACE术前血清GGT水平可以作为判断TACE治疗BCLC分期B期HCC患者生存的独立预后因素。

有序介孔TiO_2固载γ-谷氨酰转肽酶催化合成S-bzl-γ-Glutamyl-L-Cysteine

以有序介孔TiO2(OM-TiO2)为载体对B.subtilis NX-2GGT进行吸附固载.圆二色光谱分析和活性位点滴定结果表明,固定化前后酶的二级结构和活性位点数变化很小,固定化后GGT对供体的亲和力及转肽反应催化常数均有不同程度下降,但固定化酶对产物的亲和力有明显提高.固定化后GGT的热稳定性和pH稳定性均较游离酶有显著提高,固定化酶稳定性良好,经10批次转化后,固定化催化活性仍保持74%.以固定化GGT为催化剂,在L-谷氨酰胺(L-Gln)5mmol/L、S-苄基-半胱氨酸(S-bzl-cys)15mmol/L、酶浓度0.062U/mL和pH9.0条件下,40℃水浴反应5h,产物浓度为1.2mmol/L.

γ-谷氨酰转肽酶催化特性研究进展

γ-谷氨酰转肽酶(GGT)广泛存在于自然界的多种生物中,具有转肽和水解活性,可根据不同底物条件合成γ-谷氨酰氨基酸/多肽,这类物质因可作为风味增强剂或生物活性物而引起食品、医药合成等行业的关注。细菌中有丰富的GGT资源,本文综述γ-谷氨酰转肽酶的结构特征、性质特点、催化反应特性和相关产物特性,旨在挖掘细菌GGT的潜力,为未来研究提供参考。

化学酶法合成γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸

以Bacillus subtilisNX-2产γ-谷氨酰转肽酶为催化剂,以L-谷氨酰胺和S-苄基-L-半胱氨酸为底物,利用转肽反应合成了S-苄基-γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸,考察了反应时间、初始酶浓度、供体/受体比以及投料方式等条件对反应过程的影响。结果表明,在L-谷氨酰胺浓度为20 mmol/L,S-苄基-L-半胱氨酸浓度为20 mmol/L,酶浓度为0.0208 U/mL以及pH 9条件下,于40℃水浴中反应3 h,S-苄基-γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸得率为5.14 mmol/L,对谷胺酰胺的转化率为25.7%。采用分批投料方式可有效提高谷氨酰供体转化率。S-苄基-γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸以三氟甲磺酸脱除苄基保护基,经RPC纯化后可得产物GGC,产物纯度为91.2%,收率为75.7%。

酶法制备S-苄基-γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸的动力学模型

以Bacillus subtilis NX-2产γ-谷氨酰转肽酶(GGT)为催化剂,以L-谷氨酰胺(L-Gln)为γ-谷氨酰基供体,S-苄基-L-半胱氨酸(S-Bzl-Cys)为受体,催化合成了S-苄基-γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸(S-Bzl-GGC)。在反应机理分析的基础上,建立了定量描述该过程的动力学模型,模型计算值和实测值能较好吻合,平均相对误差为5.57%。通过模型分析得知,供体浓度的增加有利于转肽反应,但更多的是自转肽反应;受体浓度增加对提高转肽产物S-Bzl-GGC有一定的作用,对自转肽反应几乎没有影响;酶含量增加提高了反应速率,但不提高转肽产物的最大浓度。

AFU、AFP、γ-GGT联合检测诊断原发性肝癌的临床价值

目的探讨α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、甲胎蛋白(AFP)和γ-谷氨酰胺转肽酶(γ-GGT)联合检测对原发性肝癌(PHC)的互补诊断价值及对肝癌早期诊断的意义。方法对我院2007-06～2009-06间,收治的85例PHC患者、120例慢性乙型肝炎患者及65例健康者(对照组),进行血清AFU、AFP、γ-GGT检测,采用国际标准化方法。结果3项标志物单项检出的敏感率分别为:AFU为81.26%、AFP为70.20%、γ-GGT为60.31%。而3项指标联合检测PHC的检出率高达96.58%。结论联合检测AFU、AFP、γ-GGT3项指标,可提高PHC(尤其AFP阴性PHC)的诊断率。

原发性高血压病人颈动脉内中膜厚度、LVMI与血清hs-CRP、CysC、γ-GT水平的相关性分析

目的探讨原发性高血压病人颈动脉内中膜厚度(cIMT)、心脏左室质量指数(LVMI)与血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、胱抑素C(CysC)、γ-谷氨酰胺转肽酶(γ-GT)的关系。方法选取原发性高血压病人124例(高血压组),同时选取50名健康志愿者作为对照组。采用超声心动图检测LVMI,颈动脉超声检测cIMT,全自动生化仪检测hs-CRP、CysC和γ-GT。结果高血压3级病人LVMI、cIMT、CysC和hs-CRP明显高于高血压1级、高血压2级病人和对照组(P<0.05),而γ-GT明显低于高血压1级、高血压2级病人和对照组(P<0.05);左心室肥厚病人CysC和hs-CRP明显高于单纯原发性高血压病人和对照组(P<0.05),而γ-GT明显低于单纯原发性高血压病人和对照组(P<0.05);斑块形成组CysC和hs-CRP明显高于cIMT增厚组和cIMT正常组(P<0.05),而γ-GT明显低于cIMT增厚组和cIMT正常组(P<0.05);hs-CRP、CysC、γ-GT分别与LVMI、cIMT、收缩压和舒张压呈正相关(P<0.05)。结论血清hs-CRP、CysC和γ-GT水平与原发性高血压病人cIMT、LVMI及血压水平相关,其可能参与了原发性高血压的发生发展。

大肠杆菌茶氨酸合成酶基因γ-GGT的生物信息学分析

γ-谷氨酰转肽酶(γ-GGT)是催化L-茶氨酸合成的关键酶之一,对其编码基因的解析有助于进行茶氨酸的合成调控和异源表达生产研究,本论文利用生物信息学方法,对大肠杆菌(Escherichia coli)γ-GGT基因的结构和特性进行分析。结果显示,E.coliγ-GGT基因编码580个氨基酸,主要氨基酸为甘氨酸和亮氨酸,γ-GGT酶蛋白等电点为5.38,分子量为61.7 kDa,属于酸性不稳定亲水性蛋白,具有信号肽序列和保守功能结构域,在细胞质周质中发挥作用,其二级结构元件主要是α-螺旋和无规卷曲,在微生物中进化较为保守。研究结果为进一步研究γ-GGT基因功能及其应用奠定了基础。

甲胎蛋白和其他血生化指标构建潜在的胆道闭锁患儿早期诊断模型

背景:胆道闭锁主要依赖于术中诊断,操作复杂且对待诊患儿的伤害较大,不适合作为早期诊断的方法。因此,寻找简单有效的血液生化诊断指标将改善早期诊断效率。目的:检测胆道闭锁患儿血浆甲胎蛋白水平,探索甲胎蛋白和血液生化指标在胆道闭锁临床诊断中的应用价值。方法:收集48例胆道闭锁患儿、20例肝炎患儿与9名健康婴儿血液样本,采用酶联免疫吸附试验测定患儿血浆中甲胎蛋白质量浓度,分析甲胎蛋白与血生化指标的相关性,建立潜在的诊断模型。试验通过新华医院伦理委员会的批准(批准号:XHEC-D-2013-026)。结果与结论:(1)胆道闭锁组和肝炎组甲胎蛋白质量浓度显著高于健康组(P <0.001),胆道闭锁组和肝炎组甲胎蛋白质量浓度比较差异无显著性意义(P>0.05);(2)48例胆道闭锁患儿中,不同肝纤维分级患儿间的甲胎蛋白质量浓度比较差异无显著性意义(P> 0.05);(3)血液生化指标显示,胆道闭锁组和肝炎组均有严重的肝损伤,两组前白蛋白、γ-谷氨酰胺转肽酶水平比较差异有显著性意义(P<0.05,P<0.001);(4)甲胎蛋白和γ-谷氨酰胺转肽酶水平呈现负相关(r=-0.516,P <0.01);(5)结合甲胎蛋白、前白蛋白、γ-谷氨酰胺转肽酶及患儿年龄和性别建立了一个潜在的诊断模型,敏感性为81.82%,特异性为91.67%,模型的曲线下面积AUC达到0.939;(6)结果说明,胆道闭锁患儿血浆甲胎蛋白水平明显升高,通过甲胎蛋白等生化指标构建的诊断模型对胆道闭锁临床诊断有一定的参考价值。

扶正祛邪中药治疗恶性肿瘤的临床研究

目的:观察中药治疗恶性肿瘤的临床疗效和不良反应。方法:选择晚期恶性肿瘤患者28例,每日服用本研究中药水煎剂1付,连续服用28d,服药前后进行有关项目对比。结果:本组病例有效率(CR+PR)3.6%,临床收益率(CR+PR+MR+SD)为85.7%,免疫指标提升,一般状况均有改善。结论:扶正祛邪中药具有一定的抗肿瘤作用。

四种常见血清肝酶在乙型肝炎相关性肝癌中的表达及意义

目的通过前瞻性的研究四种常规检测血清肝酶与乙型肝炎相关性肝癌的风险关系,为临床诊断提供参考依据。方法前瞻性的收集2008年6月-2013年6月294例在医院治疗乙型肝炎患者临床资料,评估四种常规检测的肝酶(丙氨酸氨基转移酶[ALT],天门冬氨酸氨基转移酶[AST],碱性磷酸酶[ALP]和γ-谷氨酰胺转肽酶[GGT])与患者临床病理特征之间的关系,通过Kaplan-Meier和logistic方法分析四种肝酶的基线水平对乙型肝炎相关性肝癌发生的预测价值。结果调查294例患者中有26例在随访时间结束时发展成了肝癌,肝癌发生率为8.8%;在4种肝酶中,GGT和ALP是乙型肝炎相关性肝癌发生独立危险因素,基于ALP和GGT构建的AG模型能够有效的预测乙型肝炎患者发生肝癌的风险。结论血清GGT和ALP是乙型肝炎患者肝癌的发生预测因素。

喀什地区维吾尔族和汉族丙肝实验室检查的对比分析

目的:探讨喀什地区维吾尔族和汉族丙肝患者的实验室检查特征,为临床诊断治疗提供依据。方法:对424例丙肝患者血清采用酶联免疫吸附法检测抗-HCV,荧光定量聚合酶链反应法检测丙肝RNA,采用电化学发光法检测FER、CA125、CA199,采用酶法检测GGT,ALT,AST。结果:维吾尔族丙肝患者HCVRNA的阳性率65.25%明显高于汉族患者54.26%,且维吾尔族丙肝患者血清FER(476.35±120.50)和GGT(71.22±21.84)水平均高于汉族患者FER(333.44±105.71)、GGT(55.63±15.16),差异均有统计学意义(P<0.05)。但两民族患者间抗-HCV阳性率、CA125、CA199、ALT、AST水平无统计学差异(P>0.05)。结论:喀什地区维吾尔族和汉族丙肝患者不同,维吾尔族丙肝患者HCVRNA阳性率、FER、GGT水平均高于汉族患者,本研究提示维吾尔族丙肝患者可能肝细胞损害较重,更易发展为肝癌,临床应加以重视。