幽门螺杆菌γ-谷氨酰转肽酶基因的克隆及序列分析

目的:克隆不同疾病来源的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)γ-谷氨酰转肽酶(Gamma-glutamyltranspep-tidase,GGT)基因,并进行序列分析。方法:从人胃黏膜组织中分离培养获得Hp,提取其基因组DNA,对GGT基因进行PCR扩增,克隆进pMD18-T载体,进行测序和生物信息学分析,并与基因库中公布的标准株26695和J99的GGT氨基酸序列进行比对分析。结果:成功克隆了分别来源于慢性胃炎,胃溃疡,十二指肠溃疡和胃癌的4种Hp菌株GGT片段,并进行了序列分析。4种病源的HpGGT序列大小均为1 704 bp,编码567个氨基酸,理论分子质量是61kDa,等电点是9.3,在N端具有信号肽,含有ATP蛋白激酶结合结构域和γ-谷氨酰转肽酶保守结构域。序列比对分析显示,不同来源的Hp菌株GGT具有很高的保守性。结论:GGT在Hp中高度保守,具有分泌作用,可能对宿主细胞产生影响。该基因的成功克隆为进一步研究其功能打下了基础。

γ-谷氨酰转肽酶基因工程菌的研究进展

γ-谷氨酰转肽酶是一种生物体内非常关键的酶,普遍存在于微生物、和动植物体内,能够特异性催化谷氨酰类化合物的合成,对氨基酸的转运过程有着不可替代的作用。γ-谷氨酰转肽酶广泛运用于临床诊断、食品工业、催化合成药物等行业。由于γ-谷氨酰转肽酶的重要性,研究者们对该酶的相关性质和实践应用日益重视。本文主要对γ-谷氨酰转肽酶性质和作用机理以及固定化技术和应用进行了综述。

γ-谷氨酰转肽酶基因在胰头癌组织中的表达及其核苷酸序列的研究

目的 研究胰头癌组织与正常胰腺组织中γ 谷氨酰转肽酶 (γ glutamyltranspeptidase,GGT)基因的表达及核苷酸序列的差异 ,以阐明胰头癌患者血清GGT异常升高的分子机制。方法 收集 3例胰头癌、2例胆管癌和 2例正常胰腺的手术切除标本。应用逆转录多聚酶链反应及核苷酸序列分析方法 ,检测不同组织中GGTmRNA表达量的变化及GGT基因核苷酸序列。结果 胰头癌与正常胰腺组织中的GGTcDNA核苷酸序列中 12 0 2bp～ 16 0 5bp相一致。在正常胰腺、胆管癌和胰头癌组织中均可见GGTmRNA的表达扩增产物 ,但胰头癌组织中GGT基因表达水平明显高于胆管癌和正常胰腺组织。结论 胰头癌与正常胰腺组织中的GGT基因序列是相同的 ,但胰头癌组织中GGTmRNA表达量明显增高 ,证实GGT是诊断胰头癌的有效指标。

γ-谷氨酰转肽酶在枯草芽孢杆菌中高效表达及发酵培养基优化

γ-谷氨酰转肽酶是一种能催化底物谷胺酰胺形成γ-谷氨酰-酶复合体,再被受体底物(如氨基酸、短肽)亲核取代,发生转肽反应形成γ-谷氨酰肽的酶,在食品、医药等领域有重要应用价值。该研究选用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)SCK6作为表达宿主,以来源于枯草芽胞杆菌的173种信号肽为基础构建γ-谷氨酰转酶信号肽筛选文库,筛选出最优信号肽SP_(cotC),在此基础上进行启动子筛选,得到最优启动子P_(aprE),最终构建了一株高效分泌表达γ-谷氨酰肽酶的重组菌株BS-gts3,摇瓶发酵胞外酶活力最高为5.04 U/mL。通过单因素试验和响应面试验筛选出最优培养基:乳糖31.73 g/L、FM80250.26 g/L、硫酸镁1.24 g/L、KH_(2)PO_(4)1.25 g/L、K_(2)HPO_(4)0.75 g/L,胞外酶活提高了12%,为5.623 U/mL。并进行5 L发酵罐放大培养,在38 h,胞外酶活力达到最高28.18 U/mL,是已报道的最高水平。该研究对γ-谷氨酰转肽酶的产品开发及应用奠定了基础。

γ-谷氨酰转肽酶的催化特性及其在食品领域应用研究进展

γ-谷氨酰转肽酶广泛存在于生物体中,可以专一性催化γ-谷氨酰基的转移反应,参与生物体内谷胱甘肽代谢和γ-谷氨酰基循环等生理过程。随着食品酶学、合成生物学技术的发展,γ-谷氨酰转肽酶在生物催化领域的应用也日渐受到重视。基于其水解和转肽催化活性,γ-谷氨酰转肽酶可被应用于茶氨酸等多种γ-谷氨酰化合物的生物催化合成。利用酶工程手段进一步优化γ-谷氨酰转肽酶的催化特性,提高目标产物产率,使得γ-谷氨酰转肽酶在食品功能因子的绿色生物制造领域具有较好的应用前景。文章综述了γ-谷氨酰转肽酶的分子结构、催化机制及其在食品工业中的应用现状,并重点关注γ-谷氨酰转肽酶的分子改造及其在催化合成L-茶氨酸领域的应用,以期为γ-谷氨酰转肽酶在食品领域的研究及应用提供参考。

术前γ-谷氨酰转肽酶对非转移性肾细胞癌预后的影响

目的评价术前γ-谷氨酰转肽酶(GGT)对非转移性肾细胞癌(nmRCC)患者术后预后的影响。方法收集2013年1月—2018年7月在本院接受根治性肾切除手术或肾部分切除术治疗的118例nmRCC患者的临床资料。按受试者工作特征(ROC)曲线确定GGT最佳临界值并分为高GGT组和低GGT组,比较两组患者性别、年龄、肿瘤直径等临床资料,运用Kaplan-Meier法进行生存分析,绘制生存曲线,并采用Log-rank法比较各组生存曲线的差异,采用Cox多因素回归分析影响nmRCC患者预后的独立危险因素。结果根据ROC曲线最大约登指数得出GGT最佳截断值为48.5。本研究结果显示,高GGT组的T3-T4分期所占百分比高于低GGT组(38.9%vs 13.0%,P<0.05)和高GGT组的G3-G4分级所占百分比高于低GGT组(33.3%vs 3.0%,P<0.05)。高GGT组总生存期(OS)和无复发生存期(RFS)均低于低GGT组(Log-rank=33.743,P<0.001;Log-rank=30.854,P<0.001)。Cox多因素分析结果表明,肿瘤大小≥4 cm、更高的肿瘤T分期、术前GGT≥48.5和更高的G分级是影响nmRCC患者术后OS和RFS的独立危险因素(P<0.05)。结论nmRCC患者术前高GGT是肿瘤高T分期和高G分级的重要预测指标,同时也是患者术后总生存期和无复发生存期不佳的独立危险因素,能预测其预后。

患儿手术日龄联合术前血清γ-谷氨酰转肽酶评估患儿胆道闭锁的预后

探讨胆道闭锁(biliary atresia,BA)Kasai术手术日龄及术前血清 γ- 谷氨酰转肽酶水平与早期预后的关联性,为胆道闭锁患儿Kasai手术时机及GGT的预后评价提供参考。方法:回顾性研究2017年1月至2022年6月安徽省儿童医院收治的BA患儿临床资料,包括一般资料(性别、手术时日龄)、术前GGT数值、术后DBI数值等指标。根据Kasai手术前GGT水平分为低GGT水平组,中GGT水平组和高GGT水平组(术前 GGT 低(47 ~150 U/L)中(150 ~1 000 U/L)高 (1 000 ~ 2 433 U/L));并统计不同水平GGT患儿术后3个月退黄情况,根据退黄情况分为未退黄组( n=34)和退黄组( n=41)。计算手术时日龄的值;再根据此手术时日龄分为两组,比较Kasai手术后3个月的预后指标,包括天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)、术后1月DBI下降超过术前50%、术后3月DBI<25umol(退黄可)、术后3月内胆管炎复发次数、术后1年自体肝生存率及术后2年自体肝生存率。结论 胆道闭锁术前高GGT水平患儿相比于低中GGT水平的患儿预后稍好;手术时日龄<50 d组患儿早期预后指标较手术时日龄>80 d组更好,尽早行Kasai手术可改善BA预后。

γ-谷氨酰转肽酶/血小板比值在肝细胞癌患者中的预后价值

目的探讨γ-谷氨酰转肽酶/血小板计数比值(gamma-glutamyl transpeptidase to plateletratio,GPR)在肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)患者中的预后价值。方法选取2018年05月至2020年03月间于我院初诊并行手术切除的144例HCC患者作为研究对象,收集患者的临床病理资料、实验室检查及随访数据进行回顾性分析。根据受试者工作特征(Receiveroperationcharacteristics,ROC)曲线确定GPR的最佳截止点,并将所有患者分为高GPR与低GPR组。通过Kaplan-Meier生存曲线及log-rank检验比较两组患者的总体生存(Overall survival,OS)差异,并采用单、多变量Cox回归分析评估影响HCC患者预后的独立风险因素。结果ROC曲线表明术前GPR预测HCC患者总体OS的最佳截止点为0.733,曲线下面积AUC值为0.653(95%置信区间:0.563-0.742)。根据此临界值,将所有患者分为GPR≤0.733(n=61)和GPR>0.733组(n=83)。结果表明,高GPR比值(>0.733)与肿瘤直径(χ^(2)=4.383,P=0.046)、TNM分期(χ^(2)=4.177,P=0.041)及BCLC临床分期(χ^(2)=4.492,P=0.034)具有显著相关性。此外,两组患者的5年总体OS分别为61.5%与32.1%差异有统计学意义(χ^(2)=7.602,P=0.006),GPR>0.733提示HCC患者预后不佳。单、多因素分析证实微血管浸润(风险比:2.004,95%置信区间:1.140-3.526,P=0.016)、术前甲胎蛋白AFP水平(风险比:1.855,95%置信区间:1.054-3.264,P=0.032)、BCLC临床分期(风险比:2.199,95%置信区间:1.333-3.628,P=0.002)及GPR比值(风险比:2.016,95%置信区间:1.177-3.453,P=0.011)是HCC患者的独立预后因素。结论γ-谷氨酰转肽酶/血小板比值有望成为一项新的预后评价指标,为HCC患者提供准确的预后分层。

超声弹性成像技术联合血清甲胎蛋白、γ-谷氨酰转肽酶检验诊断肝脏良恶性肿瘤的价值

目的:分析超声弹性成像技术联合血清甲胎蛋白(AFP)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)检验诊断肝脏良恶性肿瘤的应用价值。方法:选取肝脏恶性病变(恶心组)及良性病变(良性组)患者各40例,均进行超声弹性成像检查,测定血清AFP、GGT水平,分析其对肝脏良恶性诊断的价值。结果:恶性组弹性硬度评分及血清AFP、GGT水平均高于良性组(P<0.05)。超声弹性成像弹性硬度评分、S1S2指数联合血清AFP和GGT检验诊断肝脏良恶性肿瘤的敏感度为100.00%,特异度为97.50%,均高于单一指标(P<0.05)。结论:超声弹性成像联合血清AFP、GGT检验诊断肝脏良恶性肿瘤的临床价值高。

非酒精性脂肪性肝病患者血清γ-谷氨酰转肽酶与代谢综合征及血尿酸的相关性

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者血清γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltransferase,γ-GT)水平与代谢综合征(metabolic syndrome,MS)、血尿酸(uric acid,UA)水平之间的相关性。方法161例NAFLD患者按初次血清γ-GT生化检测结果分成γ-GT升高组和γ-GT正常组,整理2组的人口学特征,检测MS各组分及血UA水平。根据体重指数(body mass index,BMI)、各生化指标、MS患病情况依次分组比较正常组和异常组NAFLD患者血清γ-GT升高发生率,探索NAFLD患者血清γ-GT升高与MS各组分、血UA水平的相关性。结果γ-GT升高组NAFLD患者的收缩压(systolic blood pressure,SBP)、舒张压(diastolic blood pressure,DBP)、血UA以及包括三酰甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、LDL-C/高密度脂蛋白胆固醇比值(LDL-C/high-density lipoprotein cholesterol,LDL-C/HDL-C)、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、糖化白蛋白(glycosylated albumin,GSA)在内的MS各组分指标均高于γ-GT正常组(P<0.05)。检验分析显示在高TG血症组、LDL-C升高组、高血糖组、高UA血症组、MS组,NAFLD患者血清γ-GT升高的发生率均增加(P<0.05)。进一步控制年龄、性别因素后,NAFLD患者血清γ-GT水平与血UA和MS各组分(除HDL-C外)指标水平呈正相关(P<0.05)。多元线性回归分析显示,血UA水平、MS组分个数与NAFLD患者血清γ-GT密切相关(P<0.05)。结论NAFLD患者血清γ-GT升高可反映其发生MS及高UA血症的风险增加。

苯巴比妥钠联合熊去氧胆酸对新生儿胆汁淤积症谷草转氨酶、总胆红素及γ-谷氨酰转肽酶水平改善的临床分析

目的分析新生儿胆汁淤积症选择苯巴比妥钠联合熊去氧胆酸治疗方案对患儿谷草转氨酶(glutamic oxaloacetic transaminase,AST),总胆红素(total bilirubin,TBIL)及γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,γ-GGT)水平的影响。方法非随机选取2023年10月—2024年2月威宁诚爱医院收治的80例胆汁淤积症患儿为研究对象,根据治疗方法不同分成对照组及观察组,每组40例。对照组采用苯巴比妥钠治疗,观察组则实施苯巴比妥钠联合熊去氧胆酸治疗,对比两组治疗效率与治疗前后AST、TBIL、γ-GGT水平。结果观察组治疗总有效率为97.50%(39/40),高于对照组的80.00%(32/40),差异有统计学意义(χ^(2)=6.135,P<0.05);两组患者治疗前TBIL、AST、γ-GGT水平比较,差异无统计学意义(P均>0.05),治疗后两组TBIL、AST、γ-GGT水平均较治疗前下降,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论苯巴比妥钠联合熊去氧胆酸用于新生儿胆汁淤积症治疗,可改善患儿AST,TBIL及γ-GGT水平,加速患儿疾病转归。

血清甲胎蛋白、异常凝血酶原、γ-谷氨酰转肽酶与丙氨酸氨基转移酶比值变化对早期原发性肝癌患者疾病严重程度的影响

目的 探究早期原发性肝癌(PLC)患者血清甲胎蛋白(AFP)、异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)水平及γ-谷氨酰转肽酶与丙氨酸氨基转移酶比值(GGT/ALT)变化及其与疾病严重程度的关系,为临床PLC早期诊断和治疗提供参考依据。方法 回顾性分析2020年5月至2023年5月镇江市第三人民医院收治的70例存在肝功能异常患者的临床资料,根据疾病不同将其分为两组,PLC组(35例,为PLC患者)和肝炎组(35例,为慢性肝炎患者),另选取同期在本院进行健康体检人员35例的体检资料作为对照组。观察比较3组研究对象血清AFP、PIVKA-Ⅱ水平及GGT/ALT、阳性率,PLC组不同肿瘤直径患者上述指标水平。结果 与对照组比,肝炎组和PLC组患者血清AFP、PIVKA-Ⅱ水平及GGT/ALT及AFP、PIVKA-Ⅱ、GGT/ALT阳性率均呈逐渐升高趋势,且PLC组患者均较肝炎组、对照组更高,肝炎组患者血清PIVKA-Ⅱ水平高于对照组;与肿瘤直径<5 cm比,肿瘤直径≥5 cm的PLC组患者血清AFP、PIVKA-Ⅱ水平均更高(均P<0.05);不同肿瘤直径PLC组患者GGT/ALT比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 在早期PLC患者的诊断中,血清AFP、PIVKA-Ⅱ水平及GGT/ALT均较高,可为疾病诊治和后续治疗提供参考依据。

血清γ-谷氨酰转肽酶联合直接胆红素诊断婴儿胆道闭锁的价值

目的探讨血清γ-谷氨酰转肽酶(GGT)联合直接胆红素(DB)对胆道闭锁的诊断价值。方法选取2010年7月至2018年12月住院治疗的胆汁淤积症患儿667例为研究对象,根据术中胆管造影结果和随访情况,将患儿分为胆道闭锁组(n=234)和胆汁淤积组(n=433)。比较两组的发病年龄、性别,以及血清总胆红素(TB)、DB、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆汁酸(TBA)、GGT水平。将有统计学意义的指标纳入受试者工作特征曲线(ROC)分析,计算ROC曲线下面积(AUC)和最佳诊断界值。结果胆道闭锁组患儿发病年龄早于胆汁淤积组(P<0.001)。两组患儿性别、ALT及AST水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。胆道闭锁组TB、DB、TBA、GGT水平显著高于胆汁淤积组(P<0.05)。GGT联合DB诊断胆道闭锁的AUC最大,为0.892(95%CI:0.868~0.916)。当GGT取值为324.0?U/L,DB取值为115.1?μmol/L时,GGT与DB联合诊断胆道闭锁的敏感度和特异度分别为79.8%、83.2%。结论 GGT联合DB诊断胆道闭锁的敏感度和特异度较高,可作为诊断胆道闭锁的有效指标之一。

γ-谷氨酰转肽酶产生菌的筛选和培养条件的研究

从土壤中筛选分离到一株产γ 谷氨酰转肽酶的菌株 ,经生理生化特性鉴定为枯草芽孢杆菌 (Bacillussubti lis)NX 2。产酶条件研究表明 ,葡萄糖是最佳的碳源 ,酵母膏为最佳氮源 ,当采用 1 5 %酵母膏 ,1 0 %玉米浆复合氮源 ,菌体产γ 谷氨酰转肽酶活力达到 3 2U mL。分析NX 2菌生长和产酶的进程 ,发现γ 谷氨酰转肽酶的合成与菌体生长是同步的。

γ-谷氨酰转肽酶与蒜泥绿变的关系

本文研究了γ-谷氨酰转肽酶与蒜泥绿变的关系,测定了不同休眠期、不同温度贮藏不同时间的大蒜中γ-谷氨酰转肽酶的活性,并将从发芽的大蒜中所制备的γ-谷氨酰转肽酶添加到不能绿变的蒜泥中,确定了γ-谷氨酰转肽酶对蒜泥绿变的作用。

慢性阻塞性肺疾病患者血清γ-谷氨酰转肽酶与炎症的相关性

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期及急性期患者血清γ-谷氨酰转肽酶(GGT)的变化及其与炎症的关系。方法选取60例无肝脏及胆道疾病的COPD稳定期患者和60例急性期患者,测定患者血清GGT活性与C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT))及白介素(IL)-6水平,并进行相关分析。结果 COPD患者急性加重期与稳定期比较:血清GGT、CRP、PCT及IL-6均明显升高(P<0.05);COPD患者稳定期血清GGT与CRP、PCT及IL-6的相关系数分别为:0.227、0.105、0.011;COPD急性期血清GGT与CRP、PCT及IL-6的相关系数分别为0.546、0.624、0.116。结论血清GGT水平在COPD急性期明显升高,并与血清CRP、PCT及IL-6相关。血清GGT水平可用来评估COPD患者的炎症及氧化应激。

2型糖尿病患者γ-谷氨酰转肽酶与胰岛素抵抗的相关性

目的探讨γ-谷氨酰转肽酶(GGT)与2型糖尿病(T2DM)以及胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法选择104例T2DM患者和74例正常人,检测身高、体重、血压、GGT及其他生化指标,比较两组间所测指标的差异性,并分析IR与各因素的相关性。结果经Pearson相关分析,体重指数(BMI)、SBP、DBP、空腹血糖(FPG)、空腹C肽、尿酸(UA)、GGT、甘油三酯(TG)与胰岛素抵抗指数(IRI)呈正相关,其中GGT与IRI显著相关(r=0.369,P<0.01),有显著的统计学意义。多元逐步线性回归分析显示血压、BMI、GGT与IR密切相关。结论在排除其他肝病的影响因素后,GGT可以作为IR的独立预测指标,GGT有可能成为T2DM发生危险因素的预测指标。

γ-谷氨酰转肽酶及其应用

γ-谷氨酰转肽酶(EC2 3 2 2,γ-GT)在生物体内分布相当广泛,从细菌到哺乳动物体内都有它的存在。该酶能催化3种类型的反应、转肽反应,自转肽反应和γ-谷氨酰基的水解反应。γ-GT在临床检测中可作为生物标志物,已经用作肝脏和其他疾病的常规检测指标。该酶在生物催化合成中也有相当重要的应用,利用此酶可以合成多种含γ-谷氨酰基的化合物。

γ-谷氨酰转肽酶与各种肝病关系初探

目的 研究γ 谷氨酰转肽酶 (γ GT)与各种肝病诊断与预后的关系。方法 收集 2 13例各型肝炎患者的肝功指标 ,进行分析 ,得出结论。结果 酒精性脂肪肝、肝癌、急性肝炎患者肝功指标中γ 谷氨酰转肽酶升高明显 ,重型肝炎γ 谷氨酰转肽酶无明显升高。结论 酒精性脂肪肝γ 谷氨酰转肽酶升高最明显 ,重型肝炎γ 谷氨酰转肽酶表现为酶 胆分离 ,γ 谷氨酰转肽酶明显升高对诊断肝癌有一定意义。

γ-谷氨酰转肽酶与血压的相关性分析

目的探讨γ-谷氨酰转肽酶与血压的关系。方法采用横断面研究,收集自然人群样本1480例,采用问卷调查吸烟、饮酒以及服药情况,测量身高、体重、血压等,空腹抽血检测γ-谷氨酰转肽酶、血糖、血脂、肝功能、肾功能等相关指标。结果 1480名居民中男性886名,女性594名,年龄20～84岁。Pearson相关分析发现,γ-谷氨酰转肽酶与收缩压、舒张压、总胆固醇、血糖、低密度脂蛋白胆固醇、血尿酸、血肌酐以及体质指数正相关,而与高密度脂蛋白胆固醇负相关。对log转换的γ-谷氨酰转肽酶水平的四分位数分析发现,四组间年龄、收缩压、总胆固醇、血糖、天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶水平有显著差异,尤其是最高四分位数水平显著升高。Logistic回归分析发现,在调整上述协变量之后,最高位四分位数和最低位四分位数相比高血压患病风险增高74%(OR=1.74,95%CI为1.13～2.68,P=0.01)。结论γ-谷氨酰转肽酶水平与血压水平正相关,且可预测高血压。