γ-谷胱甘肽环酰基转移酶在结直肠癌中的表达及临床意义

目的检测γ-谷胱甘肽环酰基转移酶(γ-glutamyl cyclotransferase,GGCT)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC组织中的表达,探讨GGCT表达与患者临床病理特征、结直肠肿瘤细胞增殖的关系,进一步探究GGCT表达与CRC患者预后的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测229例结直肠肿瘤组织和其中能收集到的167例癌旁正常组织中GGCT、Ki-67和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达水平,应用SPSS 26.0软件对实验数据进行统计学处理。结果GGCT在CRC和癌旁组织的胞质阳性表达率分别为83.4%和75.4%(P=0.792),而在胞核的阳性表达率分别为36.7%和74.3%(P=0.045);Ki-67在CRC和癌旁正常组织阳性表达率分别为77.7%和60.5%(P=0.040);cyclin D1在CRC和癌旁正常组织阳性表达率分别为43.2%和12.0%(P=0.030)。GGCT在细胞核中阳性表达与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期呈负相关,GGCT在CRC组织中的表达与Ki-67、cyclin D1呈负相关。CRC患者中GGCT核阴性表达组生存期低于阳性表达组。结论GGCT在CRC和癌旁正常组织细胞中的定位存在差异,这一差异主要体现在细胞核上。GGCT在CRC胞核中低表达,癌旁正常组织中高表达。GGCT在CRC细胞中的定位不同,发挥功能不同,胞核上GGCT表达的降低可能与肿瘤细胞增殖活性增加有关,与CRC患者生存预后有关,参与了CRC的发生与发展。

环磷酰胺激活小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ的机制研究

目的探讨环磷酰胺(CP)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ(mGST-Ⅰ)活性的影响及其可能的机制。方法用苯巴比妥75 mg·kg-1诱导小鼠CYP2B后,ip CP,测定9 h内mGST-Ⅰ酶活性,观察二巯基丁二醇(DTT)对酶激活的逆转作用和巯基烷化剂N-乙基马来酰亚胺(NEM)对酶再激活效应,用SDS-PAGE和负染凝胶法评价CP对mGST-Ⅰ蛋白表达的影响。结果 CP引起小鼠微粒体中mGST-Ⅰ活性增加;NEM在mGST-Ⅰ半胱氨酸-49-巯基(cys-49-SH)上的活化效应减弱,而CP引起的mGST-Ⅰ激活效应不被二硫键还原剂DTT逆转。激活的mGST-Ⅰ电泳图谱未见蛋白分子量变迁及蛋白表达增加。结论大剂量CP致mGST-Ⅰ激活效应机制主要是酶分子cys-49-SH上单个巯基的修饰作用。

谷胱甘肽硫-转移酶研究进展

Glutathione S-transferases(GSTs) are a family of soluble detoxification enzymes which use reduced glutathione(GSH) in conjugation and reduction reactions.Toxic electrophiles,including a variety of carcinogens,are substrates for the GSTs and are more easily excreted into bile or urine after conjugation or reduction .The three-dimensional structures of GSTs from several species,including humans,have been determined.GST activity has been found to present in all human tissues,and expression of the various GST isoenzymes differs in degree in the various tissues. Glutathione S-transferases may play a role in the protection of cells against toxic electrophiles and in the resistance to cancer chemotherapeutic agants.The polymorphisms of GSTs genes are one of the important factors that exercise influence on individual susceptibility to cancer.

卵磷脂对花尾胡椒鲷幼鱼谷胱甘肽-硫-转移酶,谷胱甘肽过氧化物酶和DNA完整性的影响

采用不同卵磷脂添加量的配合饲料投喂花尾胡椒鲷(Plectorhyncchuscinctus)幼鱼,同步测定幼鱼的谷胱甘肽-硫-转移酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性以及DNA完整程度。结果表明,谷胱甘肽-硫-转移酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性随着饲料中卵磷脂含量的增加而提高,而DNA单链断裂程度随着饲料中卵磷脂含量的增加而减少。这提示卵磷脂能够提高鱼体的抗氧化防御系统的机能。

谷胱甘肽硫-转移酶与疾病和化疗

目的综述谷胱甘肽硫-转移酶(GSTs)的多态性与疾病发病的相关性以及GSTs基因突变对化疗效果的影响。方法对近年来此领域有代表性的文献进行整理、归纳。结果GSTs的多态性对疾病的发生,特别是恶性肿瘤的发生有较大的相关性;GSTs表达水平的升高可影响化疗效果,是引起化疗耐药的又一途径,利用GSTs逆转剂逆转化疗耐药是一种可考虑的方法。结论GSTs作为某些疾病早期发现的蛋白标记、用逆转剂逆转GSTs引起的化疗药物耐药以及实现化疗药物给药个体化尚需进行大量的多因素分析。

家蚕谷胱甘肽硫-转移酶的组织分布及发育期变化规律

为明确家蚕谷胱甘肽硫-转移酶(GSTs)的生物学信息,对家蚕不同发育阶段GSTs的变化规律、5龄幼虫主要组织及不同品种间的GSTs活性差异进行了研究。家蚕GSTs在中肠、脂肪体、血淋巴、表皮、头部等组织中都有分布,脂肪体中GSTs活性最高,其次是中肠,头部最低。各发育阶段中,在由一种虫态变为另一种虫态的初始期GSTs活性较高,以后逐渐降低。在幼虫主要组织中GSTs活性5龄第3天最高,以后逐渐下降,至吐丝前达到较低的水平。抗性较强的夏秋蚕品种的GSTs活性高于春用蚕品种,杂交种的GSTs活性高于原种。研究结果提示家蚕GSTs活性与其组织器官的生理功能、品种抵抗性等相关联。

重组日本血吸虫谷胱甘肽-硫-转移酶单克隆抗体在急性血吸虫病临床诊断中的应用

目的研究重组抗原26 ku日本血吸虫谷胱甘肽-硫-转移酶(SjGST)及其单克隆抗体在血吸虫患者分子诊断中的应用。方法用已纯化的重组SjGST抗原免疫近交系(BALB/c)小鼠,数周后取免疫鼠脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,选择性培养基筛选出杂交瘤细胞,经有限稀释法克隆化,扩大培养制备针对重组SjGST抗原的单克隆抗体细胞株。亲和层析法纯化单克隆抗体。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测急性血吸虫病患者和非流行区正常人血清。结果成功获得重组蛋白26 ku SjGST,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示与预期相对分子质量大小相符的蛋白条带。成功获得能够长期分泌抗重组SjGST单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA与蛋白质印迹试验均显示杂交瘤细胞培养上清中含有重组SjGST抗体。ELISA检测患者血清结果表明,26 ku SjGST用于急性血吸虫病患者血清中抗体检测的阳性率为90.6%,26 ku SjGST抗体用于急性血吸虫病患者血清中循环抗原检测的阳性率为59.4%。结论该重组蛋白用于急性血吸虫病患者血清中抗体的检测具有良好的免疫反应性,26 ku SjGST抗体对循环抗原的检测可作为抗体检测的有效补充。

谷胱甘肽S-转移酶-π在膀胱移行细胞癌的表达及其临床意义

目的：探讨谷胱甘肽Ｓ－转移酶－π（Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ－Ｓ－Ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ π、ＧＳＴ－π、）在膀胱移行细胞癌的表达情况及临床意义。方法：采用免疫组化ＳＰ法，检测１０７例未经化疗的原发性膀胱移行细胞癌中ＧＳＴ－π、Ｐ糖蛋白（Ｐ－ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ， Ｐｇｐ）表达情况。结果： ＧＳＴ－π染色分胞浆、胞核、胞浆与胞核共染三种情形，总阳性率为 ７２．９％；ＧＳＴ－π浆染色（单独胞浆、胞浆与胞核共染）阳性率为５８．９％，ＧＳＴ－π核染色（单独胞核、胞浆与胞核共染）阳性率为４６．７％，其中ＧＳＴ－π总体染色阳性和浆染色阳性与膀胱癌的病理分级、分期和术后腔内化疗复发有关，并与Ｐｇｐ表达密切相关；ＧＳＴ－π核染色阳性与膀胱癌的分级、术后腔内化疗复发无关，而与病理分期有关。结论：ＧＳＴ－π表达情况是预测原发性膀胱移行细胞癌腔内化疗疗效的有效标志物，ＧＳＴ－π浆染色较核染色更能预测膀胱癌的耐药性，ＧＳＴ－π核染色可能与膀胱癌进展有关。

典型光活化毒素α-三噻吩对棉铃虫和亚洲玉米螟谷胱甘肽S-转移酶的影响

研究了典型光活化毒素α-三噻吩(简称α-T)对棉铃虫Helicoverpaarmigera和亚洲玉米螟Ostriniafurnacalis谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)的影响。结果表明:近紫外光照(300～400nm)对棉铃虫和亚洲玉米螟幼虫GSTs活性无显著影响,但两种昆虫GSTs对α-T的反应不同。无光照条件下,α-T对亚洲玉米螟离体GSTs活性没有影响,而高浓度α-T能抑制棉铃虫离体GSTs活性;高剂量α-T可使两种昆虫活体GSTs活性升高。光照条件下,高浓度和高剂量α-T抑制棉铃虫GSTs活性,而不影响亚洲玉米螟离体GSTs活性,但低剂量α-T抑制其活体活性,而高剂量α-T则诱导其活性增加。棉铃虫和亚洲玉米螟GSTs对α-T反应的差异,可能与它们对药剂的敏感性以及药剂在两者体内的穿透、运转、贮藏、代谢等生理特性上的差异有关。

微粒体谷胱甘肽S-转移酶与药物代谢

目的 阐明微粒体谷胱甘肽S 转移酶 (mGST)的研究新进展及其在药物代谢中的作用。方法 综述了近年来对mGST的生物学特性及在肝脏药物代谢中的研究进展。结果 膜结合型mGST超基因家族在药物经肝微粒体解毒代谢、防止脂质过氧化以及抗癌药物耐药性中起到重要的作用。结论 mGST具有重要的药理与毒理学意义 ,具有深入研究的广阔前景。

对乙酰氨基酚致小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶的激活机制

目的 探索大剂量对乙酰氨基酚 (Par)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽S 转移酶(mGST)活性的影响及其可能的机制。方法 小鼠饮用 1 0 %乙醇 7d以诱导肝药酶 ,Par90 ,1 5 0 ,2 1 0mg·kg-1ip ,在 6h内测定肝mGST活性及谷胱甘肽 (GSH)含量 ,结合二硫苏糖醇(DTT)逆转与N 乙基马来酰亚胺 (NEM)激活效应来探讨mGST活性变化机制 ,并用SDS PAGE和负染凝胶法评价Par对mGST蛋白分子量及含量的影响。结果 ipPar90～ 2 1 0mg·kg-1,在短时间内引起小鼠mGST活性增加 ,GSH含量减少。mGST活性的改变与Par处理之间存在时效及量效关系。Par引起的mGST的激活效应不被二硫键断裂剂DTT逆转 ,NEM在Par激活的mGST半胱氨酸 49巯基 (Cys 49 SH)上总激活效应降低 ;激活的mGST未见蛋白分子量变迁及蛋白表达增加。结论 大剂量Par引起小鼠体内mGST活性增加 ,其激活机制主要与Cys 49

谷胱甘肽转移酶-π与卵巢癌多药耐药的关系

目的探讨谷胱甘肽转移酶-π(GST-π)在卵巢癌多药耐药中的作用。方法选取2013年1月至2015年12月洛阳市中心医院卵巢癌组织56例,体外培养肿瘤细胞,采用噻唑兰(MTT)法进行体外药物敏感性试验,酶联免疫吸附试验法测卵巢癌组织及癌旁组织中GST-π活性,反转录-聚合酶链反应测卵巢癌组织及癌旁组织中GST-πmRNA表达。结果癌旁组织及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌组织中GST-π活性分别为(0.61±0.04)、(1.29±0.13)、(4.01±0.33)、(7.35±0.18)、(8.39±0.41)μmol·mgprot^(-1)·h^(-1),两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);临床分期越高,卵巢癌组织中GST-π活性越强。癌旁组织及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌组织中GST-πmRNA表达分别为0.004±0.001、0.051±0.003、0.087±0.004、0.109±0.032、0.165±0.026,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);临床分期越高,卵巢癌组织中GST-πmRNA表达越强。体外药物敏感性试验结果显示,56例标本中,对3种药物联合化学治疗高度敏感者9例(16.07%),中度敏感者17例(30.36%),低度敏感者12例(21.43%),耐药者18例(32.14%)。高度敏感、中度敏感、低度敏感及耐药的卵巢癌组织中GST-π活性分别为(1.61±0.12)、(5.83±1.57)、(8.24±2.23)和(13.49±2.06)μmol·mgprot-1·h-1,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);耐药性越强,卵巢癌组织中GST-π活性越大。结论 GST-π可能参与卵巢癌的多药耐药机制。

谷胱甘肽-S-转移酶-Π和p53在乳腺癌的表达及其相互关系

目的 :探讨 p5 3、谷胱甘肽 S 转移酶 π(GST π)在乳腺癌表达的病理意义及相互间关系。 方法 :应用免疫组化SP法检测 91例未经抗肿瘤治疗的原发性乳腺癌组织和 1 8例复治乳腺癌中GST π、p5 3蛋白表达。 结果 :( 1 ) p5 3、GST π与肿瘤大小、组织学类型、临床分期、淋巴结转移及是否化疗复治无明显相关。 ( 2 )p5 3与组织学分级有关。( 3 ) p5 3与GST π蛋白表达呈负相关。 结论 :GST π与 p5 3在乳腺癌的表达密切相关 ,GST π可能参与乳腺癌的发病。

表达谷胱甘肽S转移酶-蜂毒素-^(88)精氨酸变体白细胞介素2工程菌的发酵条件研究

目的研究重组蜂毒素-88精氨酸变体白细胞介素2(Melittin-88ArgIL-2)工程菌的发酵条件。方法采用摇瓶发酵,对含pGEX-4T-2-Melittin-88ArgIL-2重组质粒的工程菌进行诱导表达,研究诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度、培养基的pH值等对谷胱甘肽S转移酶-Melittin-88ArgIL-2表达量的影响。同时研究培养温度对产物表达形式的影响。结果根据优化的条件,蛋白质的表达量占菌体总蛋白质的36%左右。结论确立了该重组melittin-88ArgIL-2工程菌的发酵条件。

谷胱甘肽硫转移酶-π在肺癌中的表达

目的 研究GST—π在肺癌中的表达,探讨GST-π作为非小细胞肺癌标志物的应用价值。方法 应用免疫组织化学技术,观察GST-π在193例肺癌组织中的表达,采用双抗夹心ELISA法检测78例非小细胞肺癌、7例小细胞肺癌患者、60例健康人血清GST-π含量。结果GST-π在非小细胞肺癌组织中表达的阳性率(76.7%)显著高于小细胞肺癌,非小细胞肺癌患者血清GST-π含量明显高于小细胞肺癌患者及健康人。GST-π表达与癌细胞分化程度有一定关系,与肺癌TNM分期和肺癌患者生存率无明显相关。结论 GST-π可作为非小细胞肺癌的肿瘤标志物,对非小细胞肺癌与小细胞肺癌的鉴别诊断有一定帮助。

谷胱甘肽转移酶-π在膀胱癌中的表达及临床意义

目的研究谷胱甘肽转移酶-π(glutathiones transferases-π,GST-π)在膀胱癌组织中的表达及临床意义。方法用免疫组织化学方法研究147例膀胱癌组织中GST-π的表达情况。结果 GST-π的表达率为52.4%(77/147),在G1级68例中表达率为39.7%(27/68);在G2级49例中表达率为57.1%(28/49);在G3级30例中表达率为73.3%(22/30);117例初发膀胱癌中阳性表达率57.3%(67/117);30例羟喜树碱膀胱内灌注化疗失败的复发膀胱癌中表达率96.7%(29/30)。结论 GST-π的表达水平与膀胱癌的病理分级和恶性度成正相关。

膀胱癌P糖蛋白、谷胱甘肽S转移酶-π、DNA拓扑异构酶Ⅱ-α表达及其意义

目的 :探讨膀胱癌中 P糖蛋白 (Pgp)、谷胱甘肽 - S-转移酶 -π(GST-π)、DNA拓扑异构酶 -α(Topo -α)表达情况及其临床意义。方法 :采用免疫组织化学 SP法 ,检测 10 7例原发性膀胱移行细胞癌中 Pgp、GST-π、Topo - α的表达情况。结果 :Pgp、GST- π总阳性表达率分别为 6 3.6 %、72 .9% ,二者的表达与该肿瘤的病理分级、临床分期和术后腔内化疗的复发密切相关。所有膀胱癌细胞均有不同程度的 Topo - α表达降低 ,其中 Topo - α指数 、 、 、 级分别为 45 .0 %、36 .3%、12 .5 %、6 .3% ,Topo - α指数与病理分级有关、但与临床分期和术后腔内化疗的复发无关。 Pgp与 GST- π、GST- π与 Topo - α指数密切相关 ,Topo - α指数与 Pgp表达无关联。结论 :Pgp、GST-π表达情况和 Topo -α指数是判定原发性膀胱移行细胞癌恶性程度的客观指标 ;在预测以塞替派和丝裂霉素为主的术后腔内化疗敏感性方面 ,Pgp、GST-π表达情况较 Topo -α指数更为有效。

血清谷胱甘肽-S-转移酶在慢性乙型肝炎临床疗效观察中的价值

目的 探讨慢性乙型病毒性肝炎血清GSTs表达与干扰素抗病毒治疗的关系.方法 35例符合干扰素治疗指征的慢性乙型肝炎患者,分别给予干扰素α-2b（IFNα-2b）300万单位治疗12周,化学比色法测定患者血清谷胱甘肽-S-转移酶（gultathione S transferases,GSTs）水平,核酸杂交-酶联免疫吸附法测定乙肝病毒基因分型.结果 在IFNα-2b治疗应答组患者,治疗前谷胱甘肽-S-转移酶活性显著高于无应答组（P〈0.05）,且治疗后基本上能够恢复到健康对照组的水平（P〉0.05）,而无应答组患者谷胱甘肽-S-转移酶活性活性仍显著低于健康对照组（P〈0.05）.结论 在慢性乙型肝炎患者,治疗前血清GSTs水平与干扰素抗病毒疗效相关.

谷胱甘肽-硫-转移酶M2基因在小鼠生殖器官中的表达

利用半定量RT-PCR和原位杂交的方法检测Gstm2基因在成年雄性和雌性小鼠生殖器官中的表达,并初步评价其在生殖过程中的作用。在雄性小鼠的睾丸、附睾、输精管和雌性小鼠的卵巢、输卵管、子宫、胎盘中,半定量RT-PCR的方法均检测到Gstm2的表达,在胎盘中表达水平较低,其余组织表达水平较高。利用原位杂交的方法在睾丸的间质细胞检测出较强的信号,在附睾中有微弱的信号,而输精管上皮细胞没有检测到信号;在输卵管上皮细胞和妊娠第3d的子宫上皮细胞中检出较强的信号。由于Gstm2在RNA水平在小鼠的生殖器官中广泛表达,因此我们推测Gstm2可能在小鼠精子发生、睾酮合成、精子的成熟和运输、卵子的发生和运输、胚胎着床等生殖过程中发挥作用,此结果为深入研究Gstm2在生殖生理中的功能打下基础。

河北汉族人群谷胱甘肽硫-转移酶Z1的基因多态性研究

目的探讨河北汉族人群谷胱甘肽硫-转移酶Z1(glutathione S-transferase zeta 1,GSTZ1)基因多态性的分布情况。方法应用聚合酶链式反应-限制性酶切片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法,对210例河北汉族正常人进行GSTZ1Lys32Glu基因多态性分析。结果河北汉族人群GSTZ1Lys32Glu基因多态性符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律,具有代表性。河北汉族人群GSTZ1Lys32Glu基因型频率分布和等位基因频率分布与伊朗人群、澳大利亚人群、德国人群、美国人群差异有统计学意义(P<0.05);伊朗人群GSTZ1Lys32Glu基因型频率分布和等位基因频率分布与澳大利亚人群、德国人群、美国人群差异有统计学意义(P<0.05);澳大利亚人群、德国人群、美国人群GSTZ1Lys32Glu基因型频率分布和等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论河北汉族人群GSTZ1Lys32Glu基因型频率分布和等位基因频率有其独特性。GSTZ1Lys32Glu的基因多态性在地域和人种中的分布明显不同。