γ-亚麻酸通过下调氧化应激反应抑制NLRP3介导的焦亡并改善脑梗塞小鼠认知障碍

目的:探究γ-亚麻酸(GLA)对脑梗塞小鼠认知障碍的影响及机制。方法:选取18只雄性小鼠,分为对照组6只、模型组6只和GLA组6只,对模型组以及GLA组以大脑中动脉闭塞术进行脑栓塞小鼠认知障碍模型制作,对照组进行假手术,即手术过程相同但不插入线栓。对照组和模型组每日以1mg/kg生理盐水灌胃,GLA组每日以1mg/kg GLA灌胃14d。以Morris水迷宫评估小鼠的认知障碍情况。处死小鼠并取小鼠大脑组织,以HE染色观察小鼠脑梗死面积,以TUNEL染色观察小鼠神经元凋亡情况,以Western Blot实验检测小鼠海马体中P22、P47、NLRP3、IL-1β、GSDMD以及Caspase-1蛋白表达水平。结果:模型组小鼠的逃逸潜伏期短于GLA组以及对照组,GLA组则短于对照组,模型组的穿越环次数最多,GLA组次之,对照组最少;模型组大脑梗死面积以及神经元凋亡数目最多,GLA组次之,对照组大脑无梗死且无神经元凋亡;模型组P22、P47、NLRP3、IL-1β、GSDMD以及Caspase-1蛋白表达高于GLA组和对照组,GLA组的蛋白表达水平则高于对照组。结论:GLA通过下调氧化应激反应抑制NLRP3介导的焦亡并改善脑梗塞导致的小鼠认知障碍。

γ-亚麻酸对糖尿病小鼠记忆衰退的影响及机制

目的 探究γ-亚麻酸(GLA)对糖尿病小鼠记忆衰退的影响及机制。方法 选取16只8周龄野生型小鼠,雌雄各半,分成GLA组及对照组,对所有小鼠使用1 g/kg D-果糖加10%饮用水饮食(持续40 d)诱导糖尿病小鼠记忆衰退模型。对照组小鼠给予每日1 mg/kg生理盐水灌胃,GLA组小鼠给予每日1 mg/kg GLA灌胃。干预7 d后,以Morris水迷宫评估小鼠的学习和记忆障碍情况,处死小鼠取大脑皮层及海马组织,以HE染色检查二者病理改变,以透射电镜观察小鼠海马神经元超微结构变化,以Western Blot实验检测小鼠海马组织中GRP78、GRP94、NOX2和NOX4蛋白表达水平。结果 GLA组小鼠的逃逸潜伏期短于对照组,穿越环次数高于对照组(P<0.05)。GLA组小鼠大脑皮层和海马组织病理变化以及海马神经元超微结构损伤程度均较对照组轻。GLA组小鼠海马组织GRP78、GRP94、NOX2和NOX4蛋白表达水平低于对照组(P<0.05)。结论 GLA能通过抑制海马神经元内质网应激反应,进而改善糖尿病小鼠记忆衰退。

γ-亚麻酸的富集及其生理功效研究进展

γ-亚麻酸(GLA)是含有三个双键的多不饱和脂肪酸,因其具有多种生物学活性而备受关注。GLA目前主要的植物来源为琉璃苣、月见草和黑加仑等,微生物来源大多为藻类和真菌。现有的GLA分离纯化技术各有优缺点,单一的富集方法无法满足高纯度GLA的要求,采用不同方法综合使用、结合现代化分离提取技术是未来制备GLA的方法。同时,多项研究表明,GLA在机体的物质代谢和生理调控上发挥着十分重要的作用,对血脂、抗血栓性心血管疾病、癌症和糖尿病等慢性疾病具有很好的预防效果,但具体的作用机理仍需进一步研究。综上所述,GLA是一种对人体有益的脂肪酸,但其人体内的代谢途径和生理功效仍然需要进一步挖掘,从而为GLA作为功能性保健食品的开发提供理论支撑。

高效液相色谱法检测葡萄糖酸-δ-内酯

葡萄糖酸-δ-内酯常通过葡萄糖酸水溶液蒸发浓缩制备,所得产品常含有少量的葡萄糖酸和葡萄糖酸-γ-内酯。为了检测产品中葡萄糖酸-δ-内酯的质量分数,文中建立了可快速分离分析葡萄糖酸-δ-内酯、葡萄糖酸和葡萄糖酸-γ-内酯的高效液相色谱法,并优化了葡萄糖酸-δ-内酯的分析条件。以SPD-M20A二极管阵列检测器,采用Titank Hilic色谱柱分离葡萄糖酸-δ-内酯、葡萄糖酸和葡萄糖酸-γ-内酯,以0.01 mol/L乙腈-磷酸水溶液(体积比90∶10)为流动相进行等度洗脱,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为205 nm,进样量为20μL。结果表明,葡萄糖酸-δ-内酯在7 min内可实现较好的分离;在0.5—2.5 mg/mL内具有良好的线性关系(r>0.999),检出限为0.002 mg/mL,定量限为0.5 mg/mL,3个水平的平均加标回收率为98.8%—99.9%,相对标准偏差0.1%—0.4%(n=5)。此方法分析时间短、灵敏度高、分离效果好,可用于葡萄糖酸-δ-内酯、葡萄糖酸和葡萄糖酸-γ-内酯的同时检测。

β,γ-不饱和-α-酮酸酯参与的[3+3]环加成反应:多取代四氢吡啶类化合物的多样化合成

多取代四氢吡啶类化合物是一类重要的含氮杂环骨架,广泛存在于天然产物中,还可以通过简单反应转化为其他含氮杂环化合物,因此其多样化合成方法始终是化学家研究热点。通过β,γ-不饱和-α-酮酸酯与烯胺类化合物的[3+3]环加成反应,对一系列含多个手性中心的多取代1,2,3,4-四氢吡啶类化合物进行了多样化合成,产率最高可达92%,非对映选择性最高可达>20∶1。

β,γ-不饱和-α-酮酸酯在有机合成中的应用研究进展

β,γ-不饱和-α-酮酸酯是一类具有特殊共轭结构的有机中间体,其在有机合成中可以充当C1、C2、C3和C4合成子,可以用于合成具有手性结构或者非手性结构的化合物,因此,β,γ-不饱和-α-酮酸酯已成为现代有机合成中极具吸引力且用途广泛的合成子。本文重点介绍了β,γ-不饱和-α-酮酸酯作为不同合成子在有机合成中的应用,如不对称1,4-加成反应、[2 + 3]环加成反应、[3 + 2]环加成反应以及构建螺环化合物和六元杂环化合物的应用。

血清甲胎蛋白、异常凝血酶原、γ-谷氨酰转肽酶与丙氨酸氨基转移酶比值变化对早期原发性肝癌患者疾病严重程度的影响

目的 探究早期原发性肝癌(PLC)患者血清甲胎蛋白(AFP)、异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)水平及γ-谷氨酰转肽酶与丙氨酸氨基转移酶比值(GGT/ALT)变化及其与疾病严重程度的关系,为临床PLC早期诊断和治疗提供参考依据。方法 回顾性分析2020年5月至2023年5月镇江市第三人民医院收治的70例存在肝功能异常患者的临床资料,根据疾病不同将其分为两组,PLC组(35例,为PLC患者)和肝炎组(35例,为慢性肝炎患者),另选取同期在本院进行健康体检人员35例的体检资料作为对照组。观察比较3组研究对象血清AFP、PIVKA-Ⅱ水平及GGT/ALT、阳性率,PLC组不同肿瘤直径患者上述指标水平。结果 与对照组比,肝炎组和PLC组患者血清AFP、PIVKA-Ⅱ水平及GGT/ALT及AFP、PIVKA-Ⅱ、GGT/ALT阳性率均呈逐渐升高趋势,且PLC组患者均较肝炎组、对照组更高,肝炎组患者血清PIVKA-Ⅱ水平高于对照组;与肿瘤直径<5 cm比,肿瘤直径≥5 cm的PLC组患者血清AFP、PIVKA-Ⅱ水平均更高(均P<0.05);不同肿瘤直径PLC组患者GGT/ALT比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 在早期PLC患者的诊断中,血清AFP、PIVKA-Ⅱ水平及GGT/ALT均较高,可为疾病诊治和后续治疗提供参考依据。

电针激活Nrf2/γ-GCS通路改善大鼠脑出血急性期脑损伤的研究

研究电针对大鼠脑出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)急性期的保护作用,及其与核因子红细胞相关因子2/γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(Nrf2/γ-GCS)信号通路活性的相关性。方法:50只SD大鼠随机分为5组(n=10):假手术组、3 d模型组、3 d电针组、7 d模型组和7 d电针组。除假手术组外均采用脑内注射自体血建立大鼠ICH模型,电针组分别电针连续治疗3 d、7 d,采用Zea-longa评分、改良神经严重程度评分(mNSS)和旷场试验(OFT)评价各组大鼠神经功能。流式细胞术检测组织活性氧(ROS)水平。通过酶联免疫吸附测定分析组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。Western blot检测组织Nrf2、γ-GCS蛋白表达。采用免疫组织化学方法观察小胶质细胞的激活水平。结果:与假手术组比较,3 d和7 d模型组Zea-longa和mNSS评分、静止时间、ROS水平、TNF-a水平、Nrf2和γ-GCS蛋白表达、小胶质细胞激活水平均增加,总路程和运动速度均减少(P<0.05)。与3 d模型组对比,7 d模型组的Zea-longa评分、mNSS、ROS水平、TNF-a水平、Nrf2和γ-GCS蛋白表达、小胶质细胞激活水平均增加(P<0.05),提示ICH急性期进展;3 d电针组组织Nrf2和γ-GCS蛋白表达水平高于3 d模型组,ROS水平、TNF-a水平和小胶质细胞激活水平低于3 d模型组(P<0.05)。与7 d模型组对比,7 d电针组的Zea-longa和mNSS评分、静止时间、ROS水平、TNF-a水平、小胶质细胞激活水平均下降,Nrf2和γ-GCS蛋白表达、总路程和运动速度均增加(P<0.05)。结论:电针可能通过激活Nrf2/γ-GCS信号通路,抑制小胶质细胞激活发挥抗氧化应激作用,进而改善大鼠ICH急性期脑损伤。

玻璃苣中γ-亚麻酸药理作用的研究进展

玻璃苣油是从玻璃苣( Borago officinalis Linn.)的种子中萃取出来的一种植物油。玻璃苣油含有较高水平的Omega-6等必需脂肪酸,这些脂肪酸对皮肤的结构和功能至关重要。玻璃苣油中的γ-亚麻酸有助于其在特应性皮炎(AD)中的治疗作用。玻璃苣种子油已被用作治疗各种退行性疾病。这种油的众多功能特性归因于其高γ-亚麻酸含量。γ-亚麻酸(GLA)是一种omega-6、十八碳多不饱和脂肪酸,存在于几种种子油中,包括月见草和玻璃苣中。虽然许多类型的研究表明,含γ-亚麻酸的植物可减少炎症过程并影响炎症性疾,如类风湿性关节炎、哮喘和特应性皮炎等,但目前玻璃苣中γ-亚麻酸的药理作用还需进一步研究。本文通过查阅近年来关于玻璃苣中γ-亚麻酸药理作用的相关文献,探究其研究进展,为今后玻璃苣的临床应用提供可靠性参考。

γ-亚麻酸及其生理生化功能研究进展

γ-亚麻酸是一种具有多种生物学活性的多不饱和脂肪酸。多年研究表明:γ-亚麻酸存在于多种草本植物、藻类和低等真菌中,可通过多种生物学机制发挥降血脂、杀菌、抗炎、抗高血压、抗动脉粥样硬化等一系列生理生化功能。综述了γ-亚麻酸生物资源、代谢、生理生化功能及相关机制的研究进展。

Δ~6-脂肪酸脱氢酶的分子生物学研究进展

包括γ_亚麻酸在内的多不饱和脂肪酸由于在人类健康中的重要作用而成为有价值的产品 ,目前市场上对γ_亚麻酸的需求持续增长 ,然而当前来源难以满足市场的需求 ,寻找合适的替代来源将有助于解决这一问题。Δ6 _脂肪酸脱氢酶是多不饱和脂肪酸合成途径中的限速酶 ,这里从Δ6 _脂肪酸脱氢酶的基因克隆、结构和功能的研究、系统进化和基因工程应用等方面探讨了Δ6 _脂肪酸脱氢酶的研究进展。

高山被孢霉ATCC16266Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达

Δ6 脂肪酸脱氢酶是形成γ 亚麻酸的关键酶。从含有高山被孢霉Δ6 脂肪酸脱氢酶基因的重组质粒pT MACL6中 ,酶切出 1 4kb的目的片段 ,亚克隆到大肠杆菌和酿酒酵母的穿梭表达载体 pYES2 .0 ,在大肠杆菌中筛选到含有目的基因的重组质粒 pYMAD6 ,用醋酸锂方法转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INCSc1中 ,在SC Ura合成培养基中 ,选择得到酿酒酵母工程株YMAD6。在合适的培养基及培养条件下 ,加入外源底物亚油酸 ,经半乳糖诱导后 ,收集菌体。通过GC MS对酵母工程株进行脂肪酸色谱分析 ,结果表明 ,产生了 31 6 %的γ 亚麻酸。这是迄今为止 ,国内外Δ6 脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中表达量最高的报道。

深黄被孢霉M_(6-22) Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达

应用PCR技术 ,从含有深黄被孢霉Δ6 脂肪酸脱氢酶基因的重组质粒pTMICL6中 ,扩增出 1 38kb的目的片段 ,亚克隆到大肠杆菌和酿酒酵母的穿梭表达载体pYES2 .0 ,在大肠杆菌中筛选到含有目的基因的重组质粒pYMID6,用醋酸锂方法转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INVSc1中 ,在SC Ura合成培养基中 ,选择到酵母工程株YMID6。在合适的培养基及培养条件下 ,加入外源底物亚油酸 ,经半乳糖诱导后 ,收集菌体。通过GC MS对酵母工程株所含的全部脂肪酸进行色谱分析 ,结果表明 ,γ 亚麻酸的含量占酵母总脂肪酸的 8 69%。

γ-亚麻酸以柱色谱和甲酯化纯化的正交试验

γ-Linolenic acid was purified by column chromatography and methyl esterification optimized by orthogonal design. The optimum conditions of the column chromatography were: using 75 - 150μm silica gel as the solid phase, chloroform-methanol(90∶10) as the eluent. The optimum conditions of the methyl esterification were: urea inclu- sion for three times, reduced pressure distillation at 200, 210 and 220℃, each maintaining 15min, extraction pH 3.5.

少根根霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在转基因油菜中的表达

【目的】验证少根根霉△6-脂肪酸脱氢酶基因在转基因油菜中的表达情况,为进一步基因工程化生产γ-亚麻酸打下基础。【方法】将少根根霉△6-脂肪酸脱氢酶基因和植物表达载体pCPN2301连接,构建重组表达质粒pCPNRAD6,采用农杆菌介导的油菜子叶节转化法,将该基因导入甘蓝型油菜H165,获得转基因植株,最后通过气相色谱检测基因的表达情况。【结果】PCR、GUS组织化学染色和Southern杂交分析结果表明,目的基因已经整合到油菜基因组中,Northern杂交分析进一步表明目的基因在RNA水平获得表达,气相色谱分析检测到转基因油菜叶片中γ-亚麻酸和十八碳四烯酸生成,证明目的基因获得功能表达。同样,用改变少根根霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的转译起始密码子周边序列的基因RAD6-1所构建的转基因酵母中,也得到类似的结果,而且各种目的脂肪酸的含量均有提高。【结论】初步建立了少根根霉△6-脂肪酸脱氢酶基因在转基因油菜中的表达体系。

γ-亚麻酸包合工艺优化研究

目的:考察尿素包合工艺各因素对纯度和提取率的影响。方法:单因素实验和正交实验。结果:一次包合正交实验最佳组合为A2B3C2,随着包合次数增加,纯度提高,提取率降低。结论:最终通过正交实验综合指标分析确立了优化的包合工艺为ABC,即包合次数为3次,包合时间以24h,最佳温度为-20°C。

螺旋藻来源的γ-亚麻酸甲酯调血脂作用研究

利用从螺旋藻中提取的γ 亚麻酸甲酯 (GLAME) ,分别制成含GLAME0 .2 5 %、0 .5 %、1%的饲料喂饲正常大鼠和高脂膳食喂养形成的高脂血症大鼠 ,连续 4周 ,测定血脂、肝脂及血浆和肝脏丙二醛 (MDA)含量。结果表明 :GLAME能显著降低正常大鼠和高脂血症大鼠血浆TC、TG、LDL C含量和AI ,升高HDL C含量和HDL C/TC ,能降低正常大鼠和高脂血症大鼠血浆和肝脏MDA含量及肝胆固醇含量 ,降低高脂血症大鼠肝指数 (肝重 /体重 ) ,但对正常大鼠的肝指数无明显影响。

螺旋藻γ-亚麻酸的提取优化及体外抗氧化活性的研究

以螺旋藻粉为原料,采用溶剂萃取法提取不饱和脂肪酸γ-亚麻酸,研究了提取溶剂、提取料溶比、提取温度、提取时间等工艺条件对提取得率的影响,并优化提取条件。此外对其体外清除自由基、抗脂质过氧化能力及对H2O2氧化损伤人正常肝细胞HL-7702保护能力进行研究。结果表明:乙醇为溶剂、料溶比1∶12(w/v)、提取温度70℃,提取时间90min时能够得到最高的GLA产量(8.3±0.17)g·kg-1(GLA/干量),温度对提取率影响最大。GLA提取物显示出了较强的脂质抗氧化能力,10mg·L-1GLA提取物的抑制效果优于100mg·L-1VC,但其清除自由基能力较低,表明脂质环境能够促进其抗氧化效果,且螺旋藻GLA提取物具有保护H2O2所致氧化损伤HL-7702细胞的效果。

γ-亚麻酸产生菌的低能离子束诱变选育

为了得到γ-亚麻酸(GLA)高产菌株,以深黄被孢霉As3.3410为出发菌株,利用氮离子(N+)注入诱变,并采用马来酰肼抗性筛选和红四氮唑(TTC)法相结合对突变株进行筛选。试验结果表明:当能量为10 ke V时,最佳氮离子诱变剂量为1.56×1015cm-2;当马来酰肼的添加量为40 mg/L时,出发菌株的抑制率为100%;TTC法酶活测定的最佳条件为:温度35℃、p H为8.4、TTC浓度为8 g/L、反应时间为1 h,以此作为摇瓶初筛的条件。经过反复诱变筛选获得一株遗传稳定的高产突变株F312,其γ-亚麻酸产量为1 236 mg/L,比出发菌株(480 mg/L)提高了157.5%。