重组人骨靶向干扰素γ-1b在大肠杆菌中的表达

目的建立人骨靶向干扰素γ-1b的高效原核表达体系。方法从Drug Bank数据库下载人干扰素γ-1b氨基酸序列,在羧基端加上10个天冬氨酸标签作为骨靶向分子。采用大肠杆菌偏爱密码子,DNA Star软件分析获得骨靶向性干扰素γ-1b的基因序列。人工合成基因序列并克隆入pET3c质粒表达载体。将上述pET3c-rhIFNγ-1b-D10重组表达载体转入大肠杆菌BL21,筛选高效表达菌株。分离包涵体,8mol/L尿素溶解,利用镍柱亲和层析纯化重组蛋白。Western blot检测目的蛋白的特异性表达。结果测序结果显示所克隆的骨靶向rhIFNγ-1b基因序列正确,筛选出高效表达菌株。经SDS-PAGE显示在相对分子质量19KD处出现特异的目的蛋白表达带,表达量约占全菌蛋白的30%。表达产物以包涵体形式存在,8mol/L尿素变性后经镍柱亲和层析纯化,纯度大于90%,浓度为0.8mg/mL。Western检测显示在19KD处出现特异性目的条带。结论成功在大肠杆菌中表达了人骨靶向干扰素γ-1b,为研究其生物学活性及用于骨硬化症的治疗奠定基础。

INSPIRE研究：干扰素γ-1b对特发性肺纤维化患者存活时间的影响

背景及目的：特发性肺纤维化目前尚缺乏有效的治疗方法。本研究评估了干扰素γ-1b治疗对于提高特发性肺纤维化患者和轻中度肺功能损害患者存活时间的作用。本临床研究被命名为INSPIRE。

04010 2004年FDA批准的新BLA和sBLA批准的新BLA（生物技术产品许可申请）

批准的sBLA(生物技术产品补充许可申请)，3月18日，Intermune公司的interferon gamma—1b(干扰素γ-1b)新资料获准sBLA(Y)，包括用于儿科慢性肉芽肿性疾病(CGD)患者的安全性和疗效数据。

美国FDA发布干扰素γ-1b的公众警告

2007年3月5日，干扰素γ-1b（商品名actimmune）的生产商InterMune公司决定停止之前进行的一项用actimmune治疗特发性肺纤维化（IPF）的启示性研究，因阶段性分析发现actimmune对IPF患者没有益处。该试验比较了actimmune治疗和安慰剂治疗患者的存活率。分析显示，actimmune组有14．5％的患者死亡，而安慰剂组的病死率则只有12．7％。FDA并未批准其治疗IPF。