γ-CGTase突变体制备及其产γ-CD条件优化

采用定点突变法将来自Bacillussp.G-825-6的γ-CGTase的211位的酪氨酸突变为亮氨酸,并利用突变体Y211L催化淀粉制备γ-CD,分别研究了底物种类、底物质量分数、反应时间、反应温度、加酶量对γ-CD产率的影响,并在单因素的基础上进行了正交优化,优化后的反应条件为:木薯淀粉质量分数为6%,加酶量为4 U/g,反应温度50℃,反应时间为24 h,在此条件下催化产生γ-CD的产率可达到14%,以总环糊精质量分数为100%计,催化产γ-CD的比率为97%。

R6G@γ-CD-MOFs复合物的制备及其在Fe^(3+)离子传感中的应用

利用γ‑环糊精(γ‑CD)、氢氧化钾、甲醇和水,制备了γ‑CD‑MOFs,并使用X射线粉末衍射、热重分析和扫描电镜对其结构、稳定性和形貌进行表征。由于γ‑CD‑MOFs的结构中含有一维孔道,在其孔道中引入黄光发射的罗丹明6G(R6G)染料,获得了荧光复合材料R6G@γ‑CD‑MOFs,并探索了其对不同金属离子的荧光响应情况。实验结果表明,R6G@γ‑CD‑MOFs能够从12种金属离子中选择性传感Fe^(3+)离子,在2×10^(-4)~2.0×10^(-2)mol·L^(-1)范围内其荧光猝灭常数(K_(sv))为1.03×10^(4)L·mol^(-1)。

适配双链与非适配单链包结γ-CD聚准轮烷嵌段共聚物合成与表征

首先在精准控制摩尔投料比条件下,通过缓慢加料方式制备出以2-溴异丁酰基为端基的双三缩四乙二醇偶氮苯二甲酸酯(Br-EG_4-AZO-EG_4-Br,1)作为引发剂,然后在[γ-CD]/[1]=4的条件下,将1与γ-环糊精(γ-CD)在水溶液中进行自组装制备得到双链包结聚准轮烷(i PPR),进而用该聚准轮烷原位引发N-异丙基丙烯酰胺(NIPAAm)进行原子转移自由基聚合(ATRP)得到聚准轮烷嵌段共聚物(PPRs).分析结果表明,该类共聚物以γ-CD与偶氮苯和折叠三缩四乙二醇链自组装形成的适配双链包结结构的形式存在,而在与由1引发NIPAAm进行ATRP聚合所制备的PNIPAAm-EG_4-AZO-EG_4-PNIPAAm进行自组装包结时,γ-CD则均匀分布在整条共聚物链上生成非适配单链包结聚准轮烷嵌段共聚物(a PPRs).与引发剂1和a PPRs相比,PPRs中代表反式偶氮苯基团的紫外吸收峰发生明显红移,但紫外光照射产生的顺式异构化几乎不导致γ-CD滑脱下链,说明γ-CD与偶氮苯和折叠三缩四乙二醇包结形成的适配双链包结结构不仅稳定性高,而且还能可逆地转化为γ-CD与双三缩四乙二醇链包结形式的适配双链包结结构.

芜菁固体饮料制备工艺优化

针对芜菁产品辛辣味严重的问题,以γ-环糊精对芜菁提取物进行包埋,根据Box-Benhnkend的中心组合设计试验原理,以感官评分为响应值,确定其最佳工艺,并通过正交试验优化芜菁固体饮料配方工艺。结果表明:最佳包埋工艺为在55℃下,添加γ-环糊精2 g,包埋4 h。固体饮料最佳配比为芜菁膏粉3.8 g、白砂糖4%、苹果酸0.04%,用200 mL水冲泡。γ-环糊精能够对芜菁提取液中辛辣气味有效包埋,以其为主要原料的芜菁固体饮料,酸甜可口,香味浓郁,可为高原抗缺氧产品研发及芜菁深加工提供参考依据。

镉胁迫下γ-氨基丁酸对喜树幼苗光合色素含量和抗氧化酶活性的影响

为提高喜树(Camptotheca acuminata)对镉(Cd)胁迫的抗性,为镉污染地区的喜树栽培提供参考,采用盆栽试验,研究Cd胁迫下γ-氨基丁酸(GABA)对喜树幼苗光合色素含量和抗氧化酶活性的影响。结果表明,Cd处理(1 mg/L)降低了喜树幼苗的叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性。Cd胁迫下,随GABA浓度增加,喜树幼苗的叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量及SOD、CAT和POD活性均呈上升趋势,GABA浓度为2 mmol/L时均最大。相关性分析表明,Cd胁迫下施加GABA,光合色素含量与抗氧化酶活性均呈极显著正相关。因此,GABA能提高Cd胁迫下喜树幼苗的抗性,缓解Cd胁迫对喜树幼苗的毒害。

γ-环糊精工业化生产的研究进展

γ-环糊精(γ-cyclodextrin,γ-CD)是淀粉底物经酶法转化获得的产品,在食品、药品和化妆品等领域展现了良好的功能特性和应用价值。目前,γ-CD的生产技术被欧美日等发达国家垄断,价格居高不下。为了突破瓶颈,探索γ-CD国产化道路,该文先从γ-CD的理化特性、应用原理、市场潜力和法律法规等方面概述了产品的核心要义,再从淀粉预处理、环糊精葡萄糖基转移酶(cyclodextrin glycosyltransferase,CGT酶)筛选、络合剂选择与去除以及产物鉴定等流程总结了生产工艺的流程关键点,最后就γ-CD工业化生产中的限制性因素展开系统性的分析与讨论。该文旨在梳理瓶颈问题,为γ-CD的国产化和规模化应用推广提供参考和支撑。

γ-环糊精诱导的2-萘甲酸酯光二聚反应

本文研究了水溶液中γ-环糊精诱导2-萘甲酸酯的光二聚反应.γ-环糊精的限制性疏水空腔能够容纳两个2-萘甲酸甲酯(或乙酯)分子形成稳定的2:1包结复合物NA@γ-CD,光照NA@γ-CD包结物水溶液能高效、快速、高选择地生成2-萘甲酸酯的类立方烷光二聚体,并且该反应有一定程度的对映体选择性.

γ-环状糊精葡萄糖基转移酶产生菌32-3-10产酶条件及酶促反应条件的研究

筛选到一株芽胞杆菌 32 - 3- 10 ,它所产γ -环状糊精葡萄糖基转移酶可以淀粉为底物生成γ -环状糊精 ,对其产酶条件及酶促反应条件进行了研究。

两种环糊精蓝萼甲素包合物的制备与抗肿瘤作用比较

目的制备羟丙基-β-环糊精、γ-环糊精蓝萼甲素包合物,比较其体外溶解性能及体内抗肿瘤作用。方法分别用羟丙基-β-环糊精、γ-环糊精制备蓝萼甲素包合物。差示热分析法鉴定,紫外分光光度法测定含量,从相溶解度、溶解度、体外溶出速率以及对小鼠S180移植瘤瘤重的影响方面比较两种包合物。结果蓝萼甲素采用环糊精包合后,相溶解度、溶解度、体外溶出速率均提高,其中γ-环糊精包合作用更好,对小鼠S180移植瘤的抑瘤率43.87%,羟丙基-β-环糊精包合的蓝萼甲素抑瘤率30.66%。结论γ-环糊精包合在改善蓝萼甲素体外溶解性能方面优于羟丙基-β-环糊精,且对S180移植瘤生长的抑制作用更明显。

亚微米C18键合硅胶固定相加压毛细管电色谱法同时拆分3种手性三唑类农药

采用改良Stber法制备420 nm亚微米单分散二氧化硅微球,采用C18硅烷化修饰后装填成毛细管色谱柱。采用该色谱柱,在加压毛细管电色谱平台上成功地实现了3对手性三唑类农药烯效唑、烯唑醇和丙环唑的同时拆分和分离。考察了各因素对手性分离效果的影响,优化后的色谱条件为:流动相为乙腈-20 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH=6.8)(45∶55,v/v),其中缓冲液中含20 mmol/L羟丙基-γ-环糊精(HP-γ-CD);泵流速为0.04 mL/min;施加电压-9.4 kV;检测波长220 nm。在上述条件下,烯效唑、烯唑醇和丙环唑3种对映体同时得到拆分和分离,相邻两峰之间的分离度依次为4.20、12.9、4.41、4.09、1.70,分离时间仅为12 min,柱效最高达到310 000 plates/m。该研究为手性三唑类农药的同时分离提供了新的分离分析思路。

相溶解度法研究两种不同类型环糊精对吲达帕胺的包合作用

目的:研究两种不同类型环糊精羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)、γ-环糊精(γ-CD)对吲达帕胺的包合增溶作用,并进行包合物的鉴定。方法:运用相溶解度法考察不同类型环糊精对药物的增溶作用,并用差示扫描量热(DSC)法和红外光谱(IR)法对包合物进行鉴定。结果:确定了吲达帕胺与HP-β-CD和γ-CD包合物的相溶解度图,并计算了表观稳定常数,用DSC法和IR法确证2种不同类型环糊精的包合物均已形成。结论:2种不同类型环糊精对吲达帕胺都有显著的增溶作用,且都能形成包结比为1:1的包合物,γ-CD的增溶作用更强,形成的包合物更稳定。

重组ChIFN-γ增强鸡球虫细胞免疫作用的研究

初步探讨了重组鸡γ干扰素(rChIFN_γ)对鸡体抗球虫细胞免疫的增强效果,分别给7日龄和14日龄雏鸡邓E.tenella孢子化卵囊免疫并同时肌肉注射5 00 U rChIFN_γ后,于21日龄以同源E.tenella攻虫。试验结果显示:rChIFN_γ处理组的试验雏鸡脾脏和胸腺免疫器官指数显著高于免疫对照组(P<0.05),在21日龄时的淋巴细胞转化水平(1.14)也显著高于卵囊免疫对照组(0.95)(P<0.05);ABC染色结果表明rChIFN_γ可以显著增加试验雏鸡脾脏和盲肠的CD4+、CD8+T淋巴细胞数量;Griess(NO2-)结果表明:rChIFN_γ处理组在21日龄的NO2-含量(2.77 ug/mL)显著高于免疫对照组(2.14 ug/mL)(P<0.05);溶菌酶(LSZ)试验表明,21日龄时rChIFN_γ处理组的LSZ含量(22.80 ug/mL)显著高于免疫对照组(19.79 ug/mL)(P<0.05)。结果提示rChIFN_γ具有抗球虫免疫的增强效果,能显著提高鸡体抗球虫保护性细胞免疫水平。

^(109)Cd核素及其低能γ和X射线源的研制

本文介绍了在国产1.2m回旋加速器上通过^(109)Ag(d,2n)^(109)Cd核反应,从12.3MeV氘核辐照过的天然银靶中分离与制备无载体^(109)Cd的程序。银靶用HNO_3溶解后,利用金属铜经过电化学置换把银除去,再在混合的HNO_3/HBr介质中通过阴离子交换将^(109)Cd与Cu,^(65)Zn等其它元素定量分离。在制得的^(109)Cd产品中无其它放射性杂质存在(^(109)Cd>99.9%),^(109)Cd的回收率为99%。用陶瓷片吸附或电镀法制得了^(109)Cd的低能Υ和X射线源。

肿瘤细胞HLA分子的表达及IFN-γ的调控作用

目的研究肿瘤细胞表面HLA分子表达及IFN-γ的调控作用。检测TIL细胞中T细胞亚群的变化,并与PBMC比较。方法采用FACS检测细胞表面的CD抗原,采用ABC免疫组化染色检测肿瘤细胞HLA-I、II类分子的表达。以IFN-γ诱导建系的卵巢癌细胞表达HLA分子。结果肾细胞癌患者TIL细胞中的T细胞明显多于大肠癌患者。肿瘤患者PBMC中的T细胞数少于正常对照;肿瘤组织HLA-I类抗原的表达明显低于正常组织,HLA-II类抗原的表达高于正常组织。与正常组织相比较,大肠癌患者比肾细胞癌患者HLA-I类抗原的表达更低。IFN-γ可诱导建系卵巢癌细胞表达HLA-I类抗原,但不能诱导HLA-II类抗原的表达。结论肿瘤组织HLA表达的变化与肿瘤组织中TIL的数有关;IFN-γ能选择性地诱导卵巢癌细胞表达HLA-I类分子,在抗肿瘤免疫中具有重要的意义。

γ射线辐照法制备CdS纳米棒及性能表征

在pH=3的酸性条件下,以硫酸镉和硫代乙酰胺(TAA)为反应前驱体,采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)自组装形成的管状胶束(PVAC)为模板,通过γ射线辐照法成功合成了CdS纳米棒,并通过XRD、UV-Vis、SAED、TEM和PL等技术对反应中间产物及最终产物进行了表征。研究表明,该方法在Cd2+浓度为0.015mol·L^-1、辐照剂量为15～20kGy时,可获得直径在100nm以下,长度在3μm以上的CdS纳米棒;并且较低的辐照剂量和反应物浓度有利于获得较大长径比的CdS纳米棒。

一次伴随强沙尘暴天气飑线的多普勒雷达回波特征

利用新一代天气雷达和T213数值预报产品资料对2005年4月1日发生在内蒙古中部偏南地区的一次局地强沙尘暴和雷雨大风天气过程进行了连续的监测和分析。诊断分析表明:局地强沙尘暴发生前,动力、热力场条件和系统结构有利于强对流天气的发生发展,沙尘暴发生区域,低层散度的辐合中心和垂直运动的上升中心有很好的对应关系,并与雷达资料的逆风区相对应。物理量场的强度达到甚至超过了当地暴雨或强对流天气的强度,而在沙尘暴发生区域上空整层的相对湿度均特小,低层尤为干燥。进一步结合新一代天气雷达的探测结果,在对雷达回波逆风区沿入流方向(SW—NW)的空间剖面分析表明,沙尘暴区域的低层850hPa有强辐合中心,高层存在辐散中心,700hPa附近存在强上升中心,且上升高度一直达到350hPa附近。局地强沙尘暴和强风主要是雷暴内中-γ尺度系统强的辐合旋转造成的,反射率最大区与正负速度最大区接近或重叠,并由正速度区过渡到负速度区,产生了强烈的风切变,使中-γ尺度系统的辐合旋转加强,加之低层较强的垂直运动,造成了局地强沙尘暴天气。沙尘暴区域以外的强风是雷暴系统外部产生的,其最大风速出现在弓形回波突出的部位、出流回波区域及径向速度图上速度模糊区域,而强沙尘暴天气却出现在中-γ尺度的逆风区中。

邻甲酚酞褪色分光光度法定量测定γ-环糊精含量

以邻甲酚酞(OCP)为探剂,首次建立了基于邻甲酚酞褪色反应的γ-环糊精含量分光光度测定方法。其原理是在碱性条件下,γ-环糊精(γ-CD)包络OCP分子使其发生褪色反应,并且其褪色程度△A与γ-CD浓度在一定范围内呈线性关系,符合朗伯比尔定律。研究了显色条件对γ-CD含量测定的影响。结果表明:当在30℃下显色15 min,加入OCP浓度为0.21 mmol/L,缓冲液pH=9.51时,γ-CD在0~15mmol/L范围内线性关系良好。回归方程为ΔA=0.032 5Cγ-CD(mmol/L),相关系数R2=0.997 5,检出限为0.066 mmol/L,表观摩尔吸光系数ε=3.06×10~3L·mol^(-1)·cm^(-1),灵敏度较高。样品平均实测回收率在99.1~101.5%之间,测定结果 RSD为1.47%(n=10)。该光度测定方法的准确度与HPLC法接近,且具有良好的稳定性与重现性,同时操作简便,测定快速,较HPLC法更易于推广普及。

γ-环糊精-茜素红S包合物与DNA的相互作用

以吖啶橙(AO)作为分子探针,在Tris-HCl(pH=7.40)缓冲溶液中,采用紫外光谱法、荧光光谱法和粘度法等研究了γ-CD-ARS包合物与DNA的作用机制。γ-CD与ARS包合的摩尔比为1:1,包合常数Kf=4.42×103L.mol-1。γ-CD-ARS包合物与DNA结合的摩尔比为6:1,在17℃时包合物与DNA的结合常数Kθ17℃=2.22×105L.mol-1。荧光探针法、磷酸盐法和粘度法研究综合表明γ-CD-ARS包合物与DNA以部分插入的混合模式相互作用。

喘可治注射液对大鼠抗炎和免疫调节机制的研究

目的:探讨喘可治注射液治疗支气管哮喘(简称哮喘)的作用机制。方法:60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0.5ml.kg-1.d-1,肌内注射),高、中、低剂量(10、5、2.5ml.kg-1.d-1,腹腔注射)喘可治注射液组。以2%卵蛋白为激发液,雾化吸入致敏,建立哮喘模型。治疗后,大鼠肺叶经HE染色后行病理切片,采用酶联免疫吸附(ELISA)法分别测定大鼠外周血中白介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)浓度,采用流式细胞仪测定大鼠外周血中CD4+CD25+T调节细胞和CD3-CD161a+自然杀伤(NK)细胞占淋巴细胞的百分比。结果:各剂量喘可治注射液组大鼠肺叶局部炎症反应均较模型组轻,IL-4浓度均明显下降,与模型组相比差异有显著性(P<0.01),但各治疗组间、治疗组和正常组间IL-4浓度无显著差异。各治疗组IFN-γ的浓度均较模型组有所上升,其中高剂量组上升最为明显,与模型组比较有显著差异(P<0.01)。高、中、低剂量喘可治注射液组CD4+CD25+T调节细胞百分比均明显上升,与模型组相比有显著差异(P<0.05)。CD3-CD161a+NK细胞的百分比各组间比较无显著性差异。结论:喘可治注射液可增加血中IL-4、IFN-γ浓度,及CD4+CD25+T调节细胞含量,纠正免疫失衡,这可能是其治疗哮喘的机制之一。

基于γ-环糊精包合作用的大分子自组装网络及其流变性能调控

将γ-环糊精(γ-CD)和3种不同长度烷基(Cn,n为12,16,18)分别按照一定的接枝率接枝于聚丙烯酸链上,利用环糊精与疏水烷基链之间的包合作用,成功制备了大分子自组装网络,并利用流变学手段对影响高分子网络结构的因素进行了系统研究。结果表明:γ-CD与Cn之间的包合作用主要以1∶2的量化模式进行,即1个γ环糊精空腔可以同时穿入2条烷基链。当聚合物的质量分数较低时(w≤1.7%),聚合物之间以包合作用交联为主;随着聚合物质量分数的增加并超过临界浓度,疏水缔合作用产生且迅速增大,并最终超过包合作用。单体γ-CD及表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)的加入可以调节聚合物的网络结构,从而对自组装体系的黏度起到调控作用。