组蛋白脱乙酰基酶抑制剂对X线照射前列腺癌细胞系放射增敏实验研究

目的体外观察组蛋白脱乙酰基酶抑制剂Panobinostat对前列腺癌细胞系LNCaP、PC-3的X线放射增敏效应，并初步探讨其作用机制。方法用四甲基偶氮哇蓝染色法确定Panobinostat对两种细胞的20％药物抑制浓度（IC20），并将其用于3种实验研究中。用6MVX线单次照射2、4、6、8Gy用于放射增敏实验，单次2Gy用于蛋白印记法和流式细胞仪法实验。用成克隆分析法进行放射增敏实验，求出用多靶单击模型拟合后的放射增敏比。用蛋白印记法检测两组照射前后γH2AX表达水平，流式细胞仪法检测细胞照射前后细胞周期分布。结果LNCaP、PC-3细胞的IC20分别为2．5、10．0μmol／L。IC20的Panobinostat扣除毒性效应后的放射增敏比LNCaP细胞为1．37（D0值比）或1．11（D。值比），PC-3细胞为1．78（D0值比）或1．17（Dq值比）。两种细胞单纯照射后7H2AX表达水平逐渐减少，72h时明显下降；IC20的Panobinostat处理24h后即有少量γH2AX表达，联合照射后表达水平较单纯照射相应时间点高，且无明显减少趋势。单纯2Gy照射后6～12h细胞有明显的G，＋M期阻滞，IC20的Panobinostat处理24h后即有明显G2＋M期阻滞，联合照射后细胞周期分布改变不明显。结论Panobinostat对前列腺细胞系LNCaP、PC-3具有放射增敏作用，其作用町能与Panobinostat增加DNA双链断裂和抑制修复、改变细胞周期分布有关。