苏云金芽孢杆菌δ-内毒素基因穿梭质粒的构建

在农业生产中长期使用化学农药已对环境和生态平衡造成一定破坏作用,同时有不少害虫也逐渐产生抗药性从而引起某些害虫的大流行,给农业生产带来巨大损失。应用苏云金杆菌杀虫蛋白基因(Bt基因)可构建具有抗虫作用的抗虫工程菌,这样通过拌种或植物叶面喷雾可达到快速、经济、有效的防治虫害的目的。国际上抗虫工程菌研究应用很快,如美国将BI基因转入到一种正常情况下定居在植物组织中的棒杆菌,将这种工程菌拌玉米种子,这样随植物生长该菌在植物体内大量繁殖,当玉米螟在茎和叶取食时,即因食用表达苏云金杆菌毒蛋白的工程菌而死亡。 田颖川等已克隆了苏云金芽孢杆菌内毒素基因CryIA(b)和CryIA(c)。本文将Bt基因CryIA(c)插入到大肠-枯草穿梭载体pBE-2中构建成Bt毒蛋白基因穿梭质粒pAMY,利用电穿孔法转人大肠杆菌DH5a,枯草芽孢杆菌B.subtilis BR151,IA511,野生型蜡状芽孢杆菌B.cereusa-47,短芽孢杆菌B.brevis A-5和枯草芽孢杆菌90-8,获得了具有较高杀虫活性的工程菌克隆。

杀鞘翅目幼虫Bt菌株YM-03的δ-内毒素基因定位

苏云金芽孢杆菌（Bacillusthuringiensis）的morrisoni亚种YM－03（8a8b）是本实验室分离的对鞘翅目幼虫有高毒力的菌株。经PCR产物分析它含有cry3A基因，产生68ku的毒素蛋白。经质粒图谱分析，该菌株含有3个质粒，其大小分别为83，72，9Mu。以cry3A基因的PCR产物片段为模板标记探针，与YM－03总DNA杂交，结果显示该菌的δ－内毒素基因定位于染色体上，有望构建出稳定遗传的广谱工程菌。

转δ-内毒素基因棉与药剂对斜纹夜蛾活性的协同作用

[目的]为斜纹夜蛾的综合治理提供科学依据。[方法]以转δ-内毒素基因棉(苏抗103)和普通棉花(苏棉12)为材料,比较了两种棉花与4种药剂配合饲喂对斜纹夜蛾生长发育及其对化学药剂敏感性的影响。[结果]连续饲养3代后的斜纹夜蛾3龄幼虫对氰戊菊酯、灭多威、敌百虫、Bt可湿粉的敏感性,用苏抗103饲喂的是用苏棉12的0.54、0.610、.80、0.48倍,幼虫用苏抗103浸渍药剂饲喂及用苏棉12浸渍药剂饲喂,前者比后者对药剂的敏感性增强。与取食苏棉12相比,取食苏抗103的斜纹夜蛾幼虫。存活率降低了30%,幼虫期延长了9.6 d,龄数由6龄增加到8龄,且体内乙酰胆碱酯酶及羧酸酯酶的比活力明显提高。[结论]苏抗103与化学药剂配合使用后使得斜纹夜蛾的敏感性增强。