石见穿多糖对结肠癌SW620细胞上皮间质转化的影响

目的研究石见穿多糖对结肠癌SW620细胞上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,探讨石见穿多糖抑制结肠癌侵袭转移的作用机制。方法采用不同浓度石见穿多糖对SW620细胞进行干预,干预时间分别为12小时和24小时;CCK-8法检测各组细胞的增殖,并选择后续实验的药物浓度和时间;细胞划痕和Transwell迁移实验来检测各组细胞的迁移能力;Transwell侵袭实验检测各组细胞的侵袭力;Western blot和qRT-PCR方法检测EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin及其mRNA,以及转录因子ZEB1、ZEB2、Twist1及其mRNA的表达。结果与对照组比较,石见穿多糖能够抑制SW620细胞的增殖,且浓度越高、干预时间越长,抑制作用越强,且呈浓度和时间依赖性。因此,在后续实验中,选择0.25 mg·mL^(-1)、1 mg·mL^(-1)、2 mg·mL^(-1)、3 mg·mL^(-1)作为干预浓度,选择24 h作为干预时间。与对照组比较,石见穿多糖能够抑制SW620细胞的迁移和侵袭,且浓度越高,抑制作用越强,呈浓度依赖性;与对照组比较,石见穿多糖能够上调E-cadherin及其mRNA的表达,且浓度越高,表达水平越高,呈浓度依赖性;同时下调Vimentin、ZEB1、ZEB2、Twist1及其mRNA的表达,且浓度越高,表达水平越低,呈浓度依赖性。结论石见穿多糖能够抑制SW620细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与上调E-cadherin的表达,下调Vimentin、ZEB1、ZEB2和Twist1的表达,从而抑制EMT过程有关。

王浆酸对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用及其网络药理学分析

目的:基于网络药理学探讨王浆酸(10-HDA)对人结肠癌SW620细胞增殖和迁移的影响,阐明其相关分子机制。方法:利用中药系统药理学(TMSCP)数据库和中医药综合数据库(TCMID)以关键词“蜂王浆”进行检索得到10-HDA等活性成分及对应靶点,采用Swiss Target Prediction数据库预测小分子靶点。采用Gene Cards数据库和在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库以关键词“Colon Cancer”获得靶点,利用String数据库和Cytoscape 3.8.0软件构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络,筛选核心靶点;利用Metascape数据库对基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路进行富集分析,筛选特有成分10-HDA进行体外活性实验。将生长状态良好的人结肠癌SW620细胞分为对照组和不同剂量(1、5、10、15和20 mmol·L^(-1))10-HDA组,采用MTT法检测各组细胞活性并计算细胞存活率。SW620细胞分为对照组、低剂量(5 mmol·L^(-1))10-HDA组、中剂量(10mmol·L^(-1))10-HDA组和高剂量(15mmol·L^(-1))10-HDA组,Hoechst33342染色法观察各组细胞形态表现,细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,流式细胞术检测各组不同细胞周期细胞百分率,生化法检测各组细胞中总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、β-连环蛋白(β-catenin)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达水平。结果:TCMSP数据库筛选得到蜂王浆6种活性成分,10-HDA治疗结肠癌核心靶点28个。GO功能富集分析主要涉及细胞增殖和细胞凋亡等信号通路;KEGG信号通路富集分析涉及细胞周期、前列腺癌、细胞衰老和p53等信号通路,GSK3β/β-catenin信号通路与细胞周期有密切关联。与对照组比较,5、10、15和20 mmol·L^(-1)10-HDA组细胞存活率呈剂量依赖性降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,不同剂量10-HDA组细胞中凋亡细胞数明显增多,细胞划痕愈合率明显降低(P<0.05或P<0.01),中和高剂量10-HDA组细胞中S期细胞百分率明显升高(P<0.05或P<0.01),不同剂量10-HDA组细胞中T-AOC和SOD活性明显降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,低剂量10-HDA组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.01),GSK3β蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与对照组比较,中和高剂量10-HDA组细胞中Bax、Caspase-3、Caspase-9和GSK3β蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),Bcl-2、β-catenin和Cyclin D1蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:10-HDA可明显抑制结肠癌细胞增殖和迁移,并可促进结肠癌细胞的凋亡和氧化水平,其作用机制可能与激活GSK3β/β-catenin信号通路有关。

NEDD4L增强IGF2BP2的泛素化对结直肠癌细胞SW620增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的:探讨NEDD4L对人转移性结直肠癌细胞SW620迁移和侵袭的影响及其可能的作用机制。方法:生物信息学分析筛选IGF2BP2/NEDD4L泛素化作用轴并构建NEDD4L过表达的SW620细胞株,实时荧光定量(RT-qPCR)检测NEDD4L mRNA表达水平;CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡;细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,CHX和MG132处理SW620细胞,Western blot检测IGF2BP2蛋白的表达。同时构建Flag-IGF2BP2、His-NEDD4L、HA-Ub重组质粒并在293T细胞中采用免疫共沉淀检测NEDD4L对IGF2BP2的泛素化水平的影响。结果:SW620细胞中成功实现NEDD4L过表达,并且导致细胞增殖能力显著降低(P<0.05),凋亡能力显著上升(P<0.01);同时抑制细胞周期进程(P<0.05)。细胞迁移率显著降低(P<0.01),细胞侵袭数量显著降低(P<0.01);Western blot结果显示,过表达NEDD4L能够显著降低IGF2BP2、YAP、VEGFA的蛋白表达水平,Co-IP结果显示NEDD4L增强IGF2BP2与Ub的结合能力。结论:NEDD4L在结直肠癌细胞中通过增强IGF2BP2的泛素化,进而降低YAP、VEGFA的蛋白表达来实现抑癌功能。

槲皮素提高人结直肠癌细胞SW480和SW620对顺铂的敏感性

目的本研究旨在探究槲皮素对顺铂耐药人结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞SW480和SW620的抑制作用及其可能的机制。方法培养SW480和SW620细胞的顺铂耐药亚型,并用MTT法测定槲皮素对细胞增殖和化疗敏感性的影响。流式细胞术用于检测细胞凋亡,蛋白质印迹法用于检测相关蛋白质的表达。结果MTT实验显示,80μmol/L和160μmol/L浓度的槲皮素显著抑制了SW480和SW620细胞的增殖。流式细胞术结果表明,顺铂联合槲皮素组的细胞凋亡率明显高于其他3组。蛋白质印迹法结果显示,顺铂联合槲皮素组的裂解型半胱天冬酶-3(cleaved-caspase-3)和半胱天冬酶-9(caspase-9)表达显著增加。化疗药物敏感性检测结果表明,耐药细胞的IC_(50)升高,而在槲皮素给药后显著下降(P均<0.05)。结论本研究明确了槲皮素能够提高人CRC细胞对顺铂的敏感性。这种效应可能与其影响细胞增殖、凋亡和自噬等方面的作用机制有关。

姜黄素对人结直肠癌SW-620细胞抗肿瘤效果的研究

目的:研究姜黄素(Cur)对人结直肠癌SW-620细胞生长、迁移的抑制作用。方法:不同浓度Cur(2、5、10μg/mL)处理SW-620细胞后,采用MTT法检测细胞增殖能力变化,流式细胞仪分别结合Rh123、DCFH-DA、Annexin V-FITC/PI染色检测细胞线粒体膜电位(Δψ_(m))变化、活性氧簇(ROS)生成及细胞凋亡情况,彗星电泳观察细胞DNA损伤情况,荧光显微技术观察细胞凋亡特征,Transwell实验检测细胞迁移能力,扫描电子显微镜观察细胞表面结构变化。结果:与对照组相比,5、10μg/mL Cur处理24、48 h可显著抑制细胞增殖(t=5.28、21.8、18.19、33.19,均P<0.01),半数抑制浓度分别为6.46、3.75μg/mL。药物处理4 h,与对照组相比,2、5、10μg/mL Cur组细胞内ROS生成分别增加至15.8%、30.2%和45%(t=3.64、7.4、13.8,均P<0.05);Δψ_(m)下降的细胞比例分别为22.7%、38.5%和72.7%(t=7.7、11.32、45.26,均P<0.01);药物处理12、24 h,2、5、10μg/mL Cur组凋亡细胞比例分别为6.6%(t=3.79,P=0.11)、32.6%、68.7%(t=21.3、64.39,均P<0.01)和16.9%(t=10.37,P<0.05)、47.2%、78.9%(t=23.46、19.8,均P<0.01);药物处理12 h,2、5、10μg/mL Cur组迁移细胞的数量分别减少至79.66%(t=7.14,P<0.05)、53.36%和39.45%(t=21.91、25.04,均P<0.01)。结论:Cur可抑制人结直肠癌SW-620细胞增殖和迁移。

苦豆子生物碱抗结肠腺癌细胞株SW620的作用筛选

目的：对苦豆子提取物中的总生物碱（TBSA）、苦参碱（MT）、氧化苦参碱（OMT）、槐果碱（SC）、槐定碱（SRI）等进行初步抗结肠癌的体外筛选实验。方法：应用MTT法测定各生物碱对SW620细胞株增殖活性的影响，药物终浓度从0～2mg／ml作用于细胞，检测其抑制SW620的剂量效应关系；应用光学显微镜、荧光显微镜进行细胞形态学观察，流式细胞仪检测生物碱对SW620细胞凋亡的作用，检测细胞凋亡率。结果：5种生物碱对结肠癌SW620细胞株具有不同程度的增殖抑制作用，其作用TBSA〈OMT〈SC〈MT〈SRI；深入研究表明苦参碱、槐定碱对结肠腺癌细胞株SW620有显著的生长抑制及促进凋亡作用，其作用呈时间-剂量依赖性；其中以槐定碱促进凋亡作用最为明显。结论：苦参碱和槐定碱对结肠腺癌细胞株SW620的增殖显著抑制并诱导细胞凋亡，为进一步开展抗结肠癌苦豆子生物碱有效成分的开发和研发中药治疗结肠癌的靶向新药提供实验依据。

槐定碱对人结肠腺癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响

目的考察槐定碱对人结肠癌SW620细胞的增殖影响及探讨其诱导凋亡作用。方法MTT法测定槐定碱对SW620细胞的半数抑制浓度;光学显微镜、荧光显微镜及电镜观察细胞凋亡形态变化;流式细胞仪分析细胞周期变化及细胞凋亡率。结果实验结果显示槐定碱对体外培养的SW620细胞增殖具有明显抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性,48hIC50=2.8mmol.L-1。凋亡细胞表现为细胞固缩、变圆、核染色质聚集或碎裂、胞质空泡化。DNA ladder结果显示有凋亡引起的"梯状"条带出现。流式细胞仪细胞周期分析结果表明,随着槐定碱作用时间的延长,G0-G1期细胞增多,同时S期细胞比例也相应增高。结论槐定碱对体外培养SW620细胞生长增殖有明显抑制作用,其作用机制与阻滞细胞周期的进程,诱导细胞凋亡相关。

重楼活性单体PP-26抑制结肠癌SW620细胞增殖并诱导细胞凋亡

目的:探讨重楼活性单体PP-26对人结肠癌SW620细胞增殖抑制作用及其机制.方法:采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度的重楼单体PP-26对人结肠癌SW620细胞增殖抑制作用;PI单染及Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blotting检测PP-26对细胞周期、细胞凋亡相关蛋白以及Akt和ERK蛋白的表达.结果:与正常肝LO2细胞相比,重楼单体PP-26能显著抑制SW620细胞的生长,作用呈剂量-效应关系;随着PP-26浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与细胞对照组相比有显著差异;不同浓度PP-26作用后,细胞阻滞于G1期;PP-26作用细胞24 h后,CDK4、CDK6表达下降,P15、cyclin D1表达增加;不同浓度PP-26作用后,细胞晚期凋亡率增加,随浓度增加有上升趋势;PP-26作用细胞24 h后,线粒体相关凋亡信号通路蛋白Caspase-9、Caspase-3表达下降,PARP切割条带增加,细胞促凋亡蛋白Bax的表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-x L减少,p-Akt和p-ERK蛋白表达均下降.结论:重楼活性单体PP-26通过上调p15促进结肠癌SW620细胞阻滞于G1期,通过抑制P13K/Akt信号通路及ERK信号通路,活化线粒体凋亡通路,诱导细胞凋亡.

二萜类化合物excisanin A诱导人结肠癌SW620细胞凋亡及机制研究

目的本文研究大萼香茶菜有效单体exc isan in A诱导人结肠癌SW 620细胞株凋亡及其分子机制。方法MTT法检测细胞增殖抑制作用,AnnexinV/PI双染法检测细胞早期凋亡率,W estern b lot法检测exc isan in A对PARP、caspase-3、caspase-9剪切片断的影响,及对MAPKs通路相关蛋白,包括p-ERK、ERK、p-JNK、JNK、p-p38、p38、c-Jun表达的影响。结果Excisanin A对结肠癌SW620细胞株生长具有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性,其IC50值为8.22μmol.L-1。用8.71μmol.L-1excisanin A处理SW620细胞12、24、36 h,AnnexinV/PI双染检测细胞的早期凋亡,其凋亡率分别为17.2%、20.5%、13.8%,而对照组细胞的凋亡率仅为1.9%(P<0.05)。不同浓度的excisanin A作用于SW620细胞48h后,Western blot法检测发现PARP、caspase-3,caspase-9 3种蛋白均出现断裂片断,并随着浓度的增加断裂更明显。进一步研究发现,excisanin A处理SW620细胞后,JNK、p38的磷酸化水平明显升高,c-Jun的表达亦增高。结论Excisa-nin A具有明显的细胞毒作用,能诱导SW620细胞凋亡,JNK和p38途径的激活可能是其诱导凋亡的分子机制之一。

苦参碱体外诱导人结肠腺癌SW620细胞凋亡的实验研究

目的观察苦参碱(MT)诱导结肠腺癌细胞株SW620凋亡的作用并探讨其可能机制。方法采用MTT法检测MT对SW620细胞的增殖抑制作用,应用流式细胞仪检测MT对SW620细胞生长周期的影响,光学显微镜、荧光显微镜、电镜下观察细胞形态学变化,AnnexinⅤ-FITC法检测MT对SW620细胞凋亡的影响。结果MT抑制SW620细胞增殖和诱导SW620细胞的凋亡作用均呈剂量和时间依赖性,其48hIC50=0.934mg/ml。与对照组相比,苦参碱处理后的SW620细胞G0/G1期百分比明显增高,S期细胞比例下降。细胞爬片HE染色以及透射电镜可见实验组细胞出现典型的细胞凋亡形态改变:细胞皱缩,体积减小,胞浆凝聚,空泡化明显,凋亡小体形成以及所谓的"印戒"细胞。结论MT在体外能抑制SW620细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其诱导作用具有明显的量效和时效关系。

三棱、莪术提取物联合热疗对结肠癌SW620细胞凋亡及迁移、侵袭能力的影响

目的:研究三棱、莪术提取物联合热疗对结肠癌SW620细胞凋亡及迁移、侵袭能力的影响。方法:采用MTT法检测不同质量浓度的三棱提取物(1.25、2.5、5、7.5、10μg/mL)、莪术提取物(5、10、15、20、25μg/mL)对SW620细胞的毒性,计算其30%细胞生长抑制浓度(IC_(30))和50%细胞生长抑制浓度(IC_(50))。采用CFSE/PI双荧光染色法、Annexin V/PI双染色法+流式细胞术考察IC50三棱提取物、IC_(50)莪术提取物分别单用或联合热疗(42℃条件下处理90 min)对SW620细胞死亡情况和凋亡率的影响;采用划痕实验和Transwell侵袭实验考察IC_(30)三棱提取物、IC_(30)莪术提取物分别单用或联合热疗对SW620细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:三棱提取物IC_(30)为3.24μg/mL,IC_(50)为4.69μg/m L;莪术提取物IC_(30)为11.27μg/mL,IC_(50)为16.81μg/m L。与IC_(50)三棱提取物组或IC_(50)莪术提取物组比较,IC_(50)三棱提取物+热疗组或IC_(50)莪术提取物+热疗组的死亡细胞显著增多,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。与0 h时比较,IC_(30)三棱提取物组、IC_(30)莪术提取物组、IC_(30)三棱提取物+热疗组、IC_(30)莪术提取物+热疗组细胞划痕实验的愈合间距均未见明显变窄。与IC30三棱提取物组或IC_(30)莪术提取物组比较,IC_(30)三棱提取物+热疗组或IC_(30)莪术提取物+热疗组侵袭实验的跨膜细胞数均显著减少(P<0.05)。结论:联用热疗能显著增强三棱或莪术提取物对SW620细胞的杀伤作用,并能显著提高两种提取物对SW620细胞迁移和侵袭能力的抑制作用。

萝卜硫素对结直肠癌SW620细胞增殖、凋亡及迁移的影响

目的:观察萝卜硫素(SFN)对结直肠癌SW620细胞增殖、凋亡及迁移的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用CCK-8法检测0、5、10、15、20μmol/L SFN处理48、72 h对SW620细胞增殖能力的影响,采用流式细胞术检测0、5、10、15、20μmol/L SFN处理24、48 h对SW620细胞凋亡的影响,采用细胞划痕实验观察20μmol/L SFN处理24 h对SW620细胞迁移的影响,并采用Western blot法检测细胞中STAT3、NF-κB、p-STAT3、p-NF-κB及MMP-2、MMP-9蛋白的表达。结果:随着SFN浓度的升高,SW620细胞增殖受到抑制,细胞凋亡率升高(P<0.05)。同时20μmol/L SFN可明显减弱SW620细胞的迁移能力,降低p-STAT3、p-NF-κB与MMP-2及MMP-9蛋白的表达(P<0.05)。结论:SFN抑制SW620细胞增殖、促进其凋亡的机制可能与降低p-STAT3、p-NF-κB的表达有关,抑制侵袭及转移的机制可能与其降低MMP-2及MMP-9蛋白的表达有关。

大蒜提取液抑制人结肠癌细胞SW480和SW620的增殖和扩散

研究了天然大蒜提取液对人结肠癌细胞SW 480和SW 620的扩散、粘附和增殖的影响.结果表明:将SW 480和SW 620加入1μL/孔大蒜提取液的DMEM中,癌细胞扩散率降低了40%;培养96 h,增殖率分别降低8.6倍和10.8倍.表明大蒜提取液能抑制人结肠癌细胞SW 480和SW 620的增殖和扩散.

姜黄素对人结肠癌SW620细胞凋亡机制的影响

目的探讨体外姜黄素对人结肠癌SW620细胞生长及凋亡的影响。方法体外培养SW620细胞,用不同浓度的姜黄素作用为实验组,同时设对照组,以CCK8法测细胞增殖抑制作用、流式细胞仪检测细胞凋亡及p53和Bcl-2蛋白表达情况。结果不同浓度姜黄素作用SW620细胞24 h增殖抑制显著(P﹤0.05),其抑制效应具有剂量依赖性,同时诱导SW620细胞凋亡、上调p53基因表达、下调Bcl-2基因表达(P﹤0.05)。结论姜黄素可抑制SW620细胞的生长且具有剂量依赖性,并可诱导肿瘤细胞凋亡,其抗肿瘤效应可能与细胞凋亡相关基因表达的调控有关。

槲皮素对SW620细胞迁移和侵袭的影响

目的探索槲皮素对结直肠癌细胞SW620迁移和侵袭的影响。方法不同浓度(0、25、50、100μmol/L)槲皮素处理SW620细胞后,MTT法检测细胞存活率,Transwell法检测细胞迁移和侵袭,RT-PCR、Western blot分别检测STAT3 mRNA、蛋白表达。结果槲皮素呈剂量和时间依赖性地降低SW620细胞存活率、STAT3 mRNA表达。最佳浓度、处理时间分别为50μmol/L、48 h,细胞迁移和侵袭显著降低(P<0.05)。敲低STAT3,SW620细胞存活率、迁移和侵袭数目明显减少(P<0.05)。STAT3过表达显著逆转槲皮素对细胞存活率、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论槲皮素可通过调控STAT3表达来抑制SW620细胞迁移和侵袭。

肿瘤相关巨噬细胞对人结肠癌SW620细胞生物学功能的影响

目的研究肿瘤相关巨噬细胞(TAM)对人结肠癌SW 620细胞生物学功能的影响。方法采用白细胞介素(IL)-4体外诱导人M2型巨噬细胞,W estern blot检测其标志分子CD68、巨噬细胞甘露糖受体(MMR)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达情况。Transwell非接触式共培养TAM和SW 620细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)检测TAM分泌的细胞因子IL-10、IL-12、IL-23和转化生长因子-β(TGF-β)水平;活性凝胶电泳迁移分析法(EMSA)检测SW 620细胞中核因子-κB(NF-κB)活性;四氮甲唑蓝法(XTT)和荧光激活细胞分选术(FACS)双标记法分别检测培养后SW 620细胞的增殖和凋亡情况。结果 IL-4诱导的人M2型巨噬细胞可表达CD68和MMR,不表达iNOS。SW 620与M2型巨噬细胞共培养24、48 h后,培养上清液中M2型巨噬细胞分泌的IL-10和TGF-β水平较培养前明显升高(P均<0.01),IL-12和IL-23水平与培养前差异无统计学意义(P均>0.05)。与M2型巨噬细胞共培养24、48 h后,SW 620的NF-κBDNA结合活性较培养前分别降低了72%和75%(P均<0.01),细胞增殖活性分别下降了48%和59%(P均<0.01);凋亡率分别为6.37%和7.68%,明显高于对照组的0.37%(P均<0.01)。结论 TAM可能通过抑制SW 620细胞的NF-κB活性,抑制SW 620细胞增殖,促进SW 620细胞凋亡。

FⅦa依赖TF及FⅩ活化PAR2上调SW 620细胞IL-8表达

目的探讨凝血FⅦa、Ⅹ、Ⅱa在蛋白酶激活受体2(PAR2)活化及诱导SW620细胞IL-8表达中的作用。方法用PAR2激动剂(PAR2-AP)、FⅦa、Ⅹ、Ⅱa等不同刺激物处理SW620细胞,以ELISA法检测细胞上清IL-8水平,以实时定量PCR检测细胞IL-8mRNA表达。结果血浆浓度的Ⅶa需在FⅩ存在下才能促进细胞IL-8表达;单克隆抗TF及抗PAR2抗体均可抑制FⅦa的作用;FⅡa轻微下调细胞IL-8表达,Hirudin、抗PAR1及抗PAR2抗体均可阻断此作用。结论TF-FⅦa及TF-FⅦa-FⅩa复合物,而非FⅡa,活化PAR2上调SW620细胞IL-8表达,从而促进细胞增殖及迁移。

染料木黄酮对人结肠癌SW620细胞生长的抑制

目的:探讨染料木黄酮对人结肠癌SW620细胞增殖的影响.方法:采用MTT法、Giemsa染色法及Hoechst 33258荧光染色法检测染料木黄酮对SW620细胞生长的影响及形态学变化.结果:在一定浓度范围内染料木黄酮可抑制人结肠癌SW620细胞的增殖,其抑制率与作用时间和药物剂量呈依赖关系;光镜下可见,药物组细胞数量明显减少,细胞膜边界不清,胞浆内可见空泡样结构,核膜不清晰,染色质边缘化,染色质分割成块状;荧光显微镜下可见,药物组部分细胞核呈现亮蓝色荧光的为凋亡细胞,细胞核呈波纹状改变,个别细胞核可见碎块状荧光信号,凋亡指数为27.18%.结论:染料木黄酮对人结肠癌SW620细胞的增殖有明显的抑制作用,诱导细胞凋亡可能是染料木黄酮抗结肠癌的作用机制之一.

6个中药单体对结肠腺癌细胞SW620体外增殖活性的影响

目的考察并比较苦参中苦参碱、氧化苦参碱,大黄中大黄素、芦荟大黄素,三七中的人参皂苷Rh2、Rg1等6个成分对结肠腺癌细胞株SW620体外增殖活性的影响。方法采用MTT法检测不同浓度各成分分别作用24h、48h对体外培养的结肠腺癌细胞SW620增殖抑制率,并每天于显微镜下观察细胞生长情况。结果与对照组比较,各成分在一定剂量范围内均能不同程度地抑制细胞增殖,其作用呈剂量和时间依赖性。结论各成分均能抑制体外培养的细胞增殖,尤以芦荟大黄素的活性最强。

人大肠癌不同转移潜能细胞株SW620及SW480的差异蛋白质组分析

目的分析比较人大肠癌不同转移潜能细胞株的差异表达蛋白质图谱,筛选并探讨肿瘤转移相关蛋白与大肠癌发生发展转移的关系.方法利用双向凝胶电泳(2-DE)和基质辅助激光解析离子化-飞行时间-质谱技术,分析高低转移性细胞株SW620和SW480蛋白质图谱的差异表达,查询数据库筛选大肠癌转移相关蛋白质.结果MalenieⅢ软件分析3次相同条件下的2-DE图谱,结果显示重复性、匹配性较好.SW620检测到(1316±62)个蛋白点,平均匹配率82%;SW480检测到(1332±74)个蛋白点,平均匹配率80%;蛋白点分布以PI 4～7、相对分子质量20 000～70 000范围内最多.两种细胞株25个差异蛋白点(SW620 14个、SW480 11个)胰酶胶内酶解、质谱分析获得23张肽质量指纹谱;数据库查询结果高度匹配已知蛋白质3个,初步匹配已知蛋白质或片段14个.在这些差异表达的蛋白质中,部分与基因转录、细胞周期、信号转导、细胞凋亡有关,可能参与大肠癌的分化、增殖、侵袭、黏附和转移等多种生物学行为.结论人大肠癌不同转移潜能细胞株SW620和SW480的2-DE蛋白质图谱具有明显的差异表达,提示大肠癌转移过程的发生是多种蛋白质功能共同作用的结果.