雷公藤甲素对佐剂性关节炎大鼠外周血单个核细胞核因子κB受体激活剂配基表达的影响

目的探讨雷公藤甲素(TP)对佐剂性关节炎(AA)大鼠外周血单个核细胞(PBMC)核因子κB受体激活剂的配基(RANKL)mRNA表达的影响及其可能机制。方法建立大鼠AA模型,随机分成TP组和甲氨蝶呤(MTX)组,分别给予TP和MTX治疗,并设AA组作对照。运用逆转录聚合酶链式反应,测定各组PBMC中RANKL mRNA的表达,同时用酶联免疫吸附法测定外周血中TNF-α和IL-1β水平。结果TP组和MTX组RANKL mRNA表达水平低于AA组(P<0.01),并且其外周血TNF-α和IL-1β水平低于AA组(P<0.01)。结论TP能够抑制AA大鼠PBMCRANKL mRNA表达,其机制可能与下调AA大鼠外周血TNF-α、IL-1β水平有关。

雷公藤多苷对佐剂性关节炎模型大鼠关节中核因子κB受体激活剂配基表达的影响

目的探讨雷公藤多苷对佐剂性关节炎大鼠关节中核因子κB受体激活剂配基(RANKL)和护骨素(OPG)表达的影响。方法建立大鼠佐剂性关节炎模型,关节炎起病后分别灌胃给予雷公藤多苷和甲氨蝶呤,关节炎病程高峰期运用免疫组化和图像分析技术测定关节滑膜和骨组织RANKL和OPG的表达,同时测定胫骨关节端骨密度。结果给予雷公藤多苷和甲氨蝶呤的大鼠骨密度均高于模型组(均P<0.05),大鼠关节滑膜、软骨下骨和小梁骨区域中RANKL表达量均低于模型组(P<0.01或P<0.05),OPG关节骨组织表达量均低于模型组(均P<0.05)。结论抑制炎性关节中RANKL表达可能是雷公藤多苷和甲氨蝶呤抑制类风湿关节炎关节骨侵蚀的机制之一。

雷公藤内酯醇对佐剂关节炎模型大鼠关节中核因子-κB受体激活剂配基表达的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇对佐剂关节炎大鼠关节中核因子-κB受体激活剂配基(RANKL)和护骨素(OPG)表达的影响。方法:复制大鼠佐剂关节炎模型,关节炎起病后分别灌胃给予雷公藤内酯醇和甲氨蝶呤,关节炎病程高峰期运用免疫组化和图像分析技术测定关节滑膜和骨组织RANKL和OPG的表达,同时测定胫骨关节端骨密度。结果:给予雷公藤内酯醇和甲氨蝶呤的大鼠骨密度均高于模型组(P<0.05),大鼠关节滑膜、软骨下骨和小梁骨区域中RANKL表达量均低于模型组(P<0.05,P<0.01),OPG关节骨组织表达量均低于模型组(P<0.05)。结论:抑制炎性关节中RANKL表达可能是雷公藤内酯醇和甲氨蝶呤抑制类风湿关节炎关节骨侵蚀的机制之一。

人胚胎间充质干细胞的生长特性及骨髓瘤细胞对其表达核因子κB受体激活剂配体/护骨素的影响

业已证实,骨髓基质细胞支持骨髓瘤（MM）细胞生长及存活,MM患者的骨髓间充质细胞异常表达的黏附分子及细胞因子对MM细胞的生长是必需的。近年来,将人胚胎股骨植入重症联合免疫缺陷（SCID）小鼠皮下建立的SCID-人鼠模型已成功运用于人MM细胞系与骨髓基质细胞（BMSC）的相互作用、

核因子-κB受体激活剂配体-核因子-κB受体激活剂信号传导通路在骨髓瘤骨病中的研究进展

多发性骨髓瘤是一种恶性克隆性浆细胞疾病,目前仍无法治愈,约90%多发性骨髓瘤患者在疾病的进程中出现骨髓瘤骨病,严重影响了患者的生活质量和疾病预后。骨髓瘤骨病的传统治疗包括双膦酸盐、放疗、手术治疗等。近年来随着研究证实核因子-κB受体激活剂配体(RANKL)-核因子-κB受体激活剂(RANK)信号传导通路在骨髓瘤骨病中发挥重要作用,为治疗骨髓瘤骨病提供了新靶点。本文就RANKL-RANK信号传导通路在骨髓瘤骨病中的发病机制及靶向治疗新进展进行综述。

绝经后骨质疏松患者血清护骨素/细胞核因子κB受体活化因子配基水平与骨硬化蛋白的相关性

目的探讨绝经后骨质疏松患者血清护骨素(OPG)、细胞核因子κB受体活化因子配基(RANKL)及骨硬化蛋白(SOST)水平,评估SOST与OPG/RANKL通路的相关性。方法利用Real-time PCR的方法检测60例绝经后骨质疏松患者(PMOP组)及60例健康受试者(对照组)SOST基因的mRNA水平,ELISA法测定血清OPG、RANKL及SOST水平并做相关性分析。结果 PMOP组SOST基因的mRNA水平较对照组显著升高(P<0.01),患者血清中OPG含量升高,而RANKL水平明显下降。相关性结果显示,SOST与OPG及OPG/RANKL呈正相关(r=0.432、0.413);SOST与RANKL呈负相关(r=-0.370)。结论 PMOP患者血清OPG/RANKL通路的代偿性激活与SOST密切相关。

Toll样受体2和4在脂多糖诱导人牙周膜成纤维细胞表达细胞核因子-κB受体活化因子配基中的作用

目的观察在脂多糖(LPS)刺激下,人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)中Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)表达水平的抑制对其表达细胞核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)的影响。方法选用100 ng.mL-1、1μg.mL-1、10μg.mL-1大肠杆菌LPS分别刺激HPDLFs,刺激6、12、24、48 h后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HPDLFs表达RANKL的水平。分别运用不同滴度的anti-TLR2+anti-TLR4、anti-TLR2、anti-TLR4抗体预处理HPDLFs,观察1μg.mL-1LPS刺激下,其RANKL表达水平的变化。结果 LPS刺激HPDLFs 6 h后,即可检测到RANKL的表达,24h达到顶峰,然后逐渐下降;各LPS质量浓度组的规律基本一致。分别用anti-TLR2+anti-TLR4、anti-TLR2、anti-TLR4抗体预处理HPDLFs,在1μg.mL-1LPS刺激下,其产生RANKL的水平明显下降(P<0.05);3组中,RANKL的表达水平有明显差异(P<0.05),其中anti-TLR2+anti-TLR4抗体处理组RANKL表达量最少,anti-TLR4抗体处理组次之,anti-TLR2抗体处理组RANKL的表达量最高。结论 TLR2、TLR4均参与了LPS诱导HPDLFs表达RANKL的过程;与anti-TLR2抗体相比,anti-TLR4抗体能更有效地抑制LPS刺激后HPDLFs表达RANKL的能力。

破骨细胞核因子κB受体活化因子配基和骨保护因子在种植体周围软组织及骨组织的表达

目的研究破骨细胞核因子κB受体活化因子配基(RANKL)及其伪受体骨保护因子(OPG)在非负荷期种植体周围软组织和骨组织中的表达变化及时间分布特点。方法选用6只1～2岁龄的雄性Beagle犬建立种植义齿动物模型,分别观测种植体植入后3、7、15、30、60、90 d种植体周围的骨改建情况。取种植体周围软组织进行实时荧光定量聚合酶链反应(PCR);取犬下颌骨进行大体标本观察拍摄X线片;取种植体周围骨组织进行免疫组化染色,检测RANKL和OPG随时间的表达变化及分布特点。结果骨改建的最活跃期为种植体植入后的第7天,种植体周围软组织中的RANKL和OPG mRNA及骨组织中的RANKL和OPG均随种植体植入时间的增加而增加,第7天达高峰,而后均逐渐降低。RANKL和OPG在种植体周围软组织及骨组织中的表达变化规律一致。结论 OPG和RANKL能在种植体周围软组织中表达,且变化规律与种植体周围骨组织改建过程一致。种植体周围组织可以通过OPG/RANKL系统参与破骨细胞的形成,调节骨质吸收,影响骨组织代谢微环境。

核因子-κB受体活化因子配体在大鼠正畸牙压力侧骨改建中的作用

目的 :初步探讨在正畸牙移动压力侧核因子 -κB受体活化因子配基 (receptoractivatorofnuclearfactor-κBligand ,RANKL)的表达在破骨细胞诱导和骨改建中的调节作用。 方法 :建立大鼠正畸牙移动模型 ,利用免疫组化的方法对压力侧RANKL的表达及其变化进行检测 ;并进一步观察了RANKL对大鼠骨髓破骨细胞形成的影响。结果 :正畸牙移动压力侧组化结果显示 ,RANKL阳性表达位于牙周膜细胞和位于骨陷窝内的破骨细胞中 ,在正畸牙移动第 3、5和 7天时呈强阳性表达。体外破骨细胞诱导实验结果显示 ,在巨噬细胞集落刺激因子 (macrophageclonestimulatingfactor,M -CSF)协同作用下 ,RANKL呈剂量依赖型诱导TRAP阳性细胞生成。 结论 :大鼠正畸牙移动中 ,RANKL在压力侧的表达上调有诱导破骨细胞形成的作用 。

骨代谢中甲状旁腺激素对相关蛋白和核因子κB受体活化因子的调节

背景:甲状旁腺激素是影响骨代谢功能轴最主要的因素。同时也是调控骨保护素和核因子κB受体活化因子配基表达的重要激素。目的:通过查阅甲状旁腺激素对骨保护素、核因子κB受体活化因子配基调控作用的相关文章,并对其进行综述。方法:以"甲状旁腺激素,骨保护蛋白,核因子κB受体活化因子"或"Parathyroid hormone,osteoprotegerin,receptor activator of nuclear factor κB ligand"为检索词,由第一作者通过计算机检索CNKI、HighWire数据库中关于"甲状旁腺激素与骨保护素/核因子κB受体活化因子配基/核因子κB受体活化剂"的相关的论文报告。选择的文章内容与甲状旁腺激素对信号通路的影响有关、近期发表的文献,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入31篇文章。结果与结论:甲状旁腺激素是调节骨代谢最主要的因素,通过增强破骨细胞活动增强而实现的。核因子κB受体活化因子配基是调节骨吸收的关键因子,它通过与核因子κB受体活化剂结合发挥功能。核因子κB受体活化因子配基与核因子κB受体活化剂结合后,启动核因子κB受体活化因子配基信号转导,骨保护素则与核因子κB受体活化因子配基竞争性结合核因子κB受体活化剂,核因子κB受体活化因子配基/骨保护素比值决定破骨细胞分化、成熟及功能。长时间、大强度的运动条件下,机体内甲状旁腺激素的变化是否对于骨保护素、核因子κB受体活化因子配基有影响,进而调节骨代谢的吸收与合成?还有待进一步的研究。

雷公藤甲素对佐剂性关节炎大鼠核因子κB受体激活剂配基表达的影响

目的探讨雷公藤甲素对佐剂性关节炎(AA)大鼠核因子κB受体激活剂配基(RANKL)和护骨素(OPG)表达的影响及其与抑制关节炎大鼠骨侵蚀的关系。方法AA大鼠经雷公藤甲素治疗后,测定关节中RANKL、OPG的表达,并测定外周血单个核细胞(PBMC)RANKLmRNA的表达水平和外周血中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1#水平,同时测定胫骨关节端骨密度,并作关节骨侵蚀病理积分。结果雷公藤甲素组和甲氨蝶呤组骨密度高于模型组(P<0.01),关节骨侵蚀积分低于模型组(P<0.01)。雷公藤甲素组大鼠关节滑膜(P<0.01)及骨组织(P<0.05)RANKL表达量低于模型组,滑膜OPG表达量低于模型组(P<0.05)。雷公藤甲素组PBMC中RANKLmRNA表达水平低于模型组(P<0.01),并且TNF-α和IL-1$水平低于模型组(P<0.01)。结论雷公藤甲素可能通过抑制RANKL表达而抑制AA大鼠骨质侵蚀。未见雷公藤甲素对OPG表达有促进作用。

γ-氨基丁酸B受体的临床意义

γ-氨基丁酸（GABA）是哺乳动物中枢神经系统的主要抑制性神经递质。早期的研究主要集中在该递质的合成、储存和释放，对其突触后受体的研究较少。随着放射性配基结合实验技术的发展及分子生物学方法的应用，对GABA受体的研究逐渐深化。

核因子κB受体活化因子配体/骨保护素在骨髓瘤中的表达

目的研究核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)在多发性骨髓瘤(MM)中的表达情况。方法运用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测人骨髓瘤细胞系(8226、XG1、XG7细胞)、患者MM细胞及MM患者骨髓基质细胞对RANKL/OPG的表达。结果 MM细胞系(8226、XG1、XG7细胞)及患者MM细胞均不表达RANKL及OPG m RNA;伴有骨病的MM患者骨髓基质细胞RANKL表达明显增加,OPG表达减低。结论 MM细胞不直接表达RANKL/OPG,可能通过调节RANKL/OPG的平衡间接参与MM骨病的发生。

地高辛素标记探针原位杂交法检测B淋巴瘤CD23基因的表达

目的 :研究B淋巴瘤CD2 3基因表达。方法 :SP免疫组化选出 2 0例B淋巴瘤并进行CD2 3基因蛋白(膜CD2 3)检测 ,地高辛素标记CD2 3DNA探针原位杂交检测CD2 3mRNA。结果 :膜CD2 3的阳性率 90 % ,CD2 3mRNA的阳性率 90 %。结论 :CD2 3在B淋巴瘤中高表达 ,这为研究CD2 3在B淋巴瘤中的发病机制和临床诊治提供了重要资料。

C57BL/6小鼠骨髓单核细胞分离、培养、纯化及向破骨细胞的分化

背景:目前骨髓单核细胞的分离提取国内外文献报道,大多是利用RAW264.7细胞诱导分化为破骨细胞。目的:探讨分离、培养、纯化和鉴定C57BL/6小鼠骨髓单核细胞的方法,观察小鼠骨髓单核细胞体外生长特征,诱导其向破骨细胞分化。方法:无菌分离C57BL/6小鼠股骨和胫骨,取出骨髓细胞,提取过程中先用红细胞裂解液去除红细胞;骨髓细胞过夜培养后(大于16 h),第2天分离出悬浮细胞,在含有巨噬细胞集落刺激因子的培养基中继续培养获得贴壁的小鼠骨髓单核细胞。通过换液对小鼠骨髓单核细胞进行纯化和扩增培养。进行形态学观察,测定生长曲线,用流式细胞仪检测原代小鼠骨髓单核细胞细胞表面抗原,加入巨噬细胞集落刺激因子和核因子κB受体活化因子配基诱导分化为破骨细胞。结果与结论:新分离的小鼠骨髓单核细胞呈小圆形,两端伸出触角,培养5 d后,细胞成椭圆形,两端的触角更明显,增殖依赖巨噬细胞集落刺激因子。流式结果显示分离的小鼠骨髓单核细胞纯度较高,能够诱导分化为破骨细胞。利用间充质干细胞与单核细胞的贴壁能力不同及巨噬细胞集落刺激因子显著促进单核细胞贴壁增殖的特性能有效分离获得稳定生长的小鼠骨髓单核细胞。培养的小鼠骨髓单核细胞性状稳定,表型稳定均一,适于做进一步研究。

肿瘤坏死因子受体和配体超家族的新成员

骨原蛋白(OPG)/核因子_κB受体激活剂的配体(RANKL)/核因子_κB的受体激活剂(RANK)是肿瘤坏死因子受体和配体起家族成员。RANKL由成骨细胞前体/骨髓基质细胞和激活的T淋巴细胞合成,通过结合破骨细胞或树突状细胞表面的RANK受体,促进破骨细胞的形成、融合、激活和存活,并有助于树突状细胞对抗原的提呈作用,OPG作为RANKL的假受体,对此过程具有抑制作用。此外,OPG/RANKL/RANK系统在调节淋巴系统发育、哺乳期动物乳腺腺泡的形成以及大动脉钙化中也起着重要的作用,是一组多功能的细胞因子系统。

rhBMP-2对下颌牵引成骨区的影响及RANKL的表达

目的观察加入外源性的重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)在不同时间对兔下颌骨牵引成骨区新骨中核因子κB受体活化因子配基(RANKL)表达的变化及对牵引成骨区新骨生成的影响。方法在30只成年大耳白兔的一侧下颌骨前部行骨切开术,分别将空白胶原、rhBMP-2 3 mg胶原复合物植入下颌骨切开处,用牵引器延长一侧下颌骨4 mm,稳定期第1、7、14、21、28天分别处死各组动物,游离下颌骨,取牵引区新生骨痂行组织学及RANKL免疫组化染色,通过细胞图像分析仪测量牵引区新骨中RANKL表达情况。结果下颌牵引延长后牵引间隙均有新骨形成,免疫组化染色RANKL在成骨细胞、髓腔衬里细胞和新形成的骨细胞内表达。两组均在第7天RANKL表达增加,第14天表达最高;在稳定期第7天,实验组较对照组RANKL表达的阳性细胞率及阳性面积百分比有差异(P<0.05),第14天更显著(P<0.01)。结论 rhBMP-2在牵引早期能上调RANKL的表达,从而能促进兔下颌骨牵引成骨区新骨的生成。

B细胞骨免疫在牙周炎中的作用

牙槽骨吸收是牙周炎最为重要的病理特征,也是导致牙齿松动脱落、口腔功能异常的最主要原因。最新研究表明,宿主免疫是牙周炎过程中导致牙槽骨吸收的最主要因素。这一过程中所涉及的抗体、免疫细胞及炎症因子可引发局部成骨-破骨平衡紊乱,造成骨破坏。这种骨系统与免疫系统间的密切交互作用称为骨免疫。鉴于牙周炎宿主的主要免疫类型为适应性体液免疫,B细胞骨免疫在牙周炎发生发展过程中就显得尤为重要。因此,探索、揭示B细胞骨免疫,就成为深度解析牙周炎发生、发展与转归的有效途径。已有研究证实B细胞的发育过程伴随着骨密度或形态的改变,笔者回顾B细胞骨免疫在牙周炎病理进程中的作用相关研究表明,B细胞通过转录因子(如RANKL、PU.1、E2A等)调控骨细胞系的发育过程,此外,由B细胞所表达的多种细胞因子(如IFN-γ、IL-17、IL-10、TGF-β等)亦可参与骨系统细胞的调节。

核因子κB受体激活因子配基在成釉细胞瘤中的表达及意义

目的研究核因子κB受体激活因子配基(RANKL)在成釉细胞瘤(AM)中的表达及其在AM骨吸收机制中的作用。方法收集多囊或实性型AM石蜡标本34例、新鲜标本17例及由新鲜标本培养的AM细胞标本12例,采用免疫组化及Western blot方法检测RANKL在AM组织和细胞中的表达水平。结果 AM标本中,RANKL阳性表达率为86.27%(41/51)。RANKL在AM组织及体外培养的AM细胞中稳定表达。结论 RANKL在AM的骨吸收机制中可能发挥重要作用。

关于慢性心力衰竭患者外周血淋巴细胞β肾上腺素能受体密度的研究──附92例分析

目的观察慢性心力衰竭(chronicheartfailure,CHF)患者外周血淋巴细胞β肾上腺素能受体(βadrenergicreceptor,βAR)密度的变化及卡维地洛对其的干预效果。方法92例心功能Ⅱ～Ⅳ级CHF患者随机分成卡维地洛组47例、美托洛尔组45例,分别于治疗前、治疗12周后行UCG测定左心室舒张末期内径(leftventricularenddiastolicdimension,LVEDd)、左心室收缩末期内径(leftventricularendsystolicdimension,LVEDs)、左心室射血分数(leftventricularejectionfraction,LVEF)、左心室内径缩短率(fractionalshortening,FS)、右心室内径(rightventriculardimension,RVD)及左心房内径(leftatrialdimension,LAD)。用同位素氢[3H]双氢烯丙洛尔(3Hdihydroalprenolol,3HDHA)放射配基结合分析法测定外周血淋巴细胞βAR密度最大值(themaximumoflymphocyteβARdensity,βmax)。结果治疗后两组患者LVEDd、LVEDs、RVD及LAD均显著缩小(均为P<0.01),LVEF、FS显著增加(均为P<0.01),且卡维地洛对LVEDs、LVEF、RVD的改善作用更优于美托洛尔(均为P<0.01)。CHF患者的βmax水平随着心功能的加重而降低(P<0.01)。经治疗后,美托洛尔组和卡维地洛组的βmax均较治疗前升高(均为P<0.01),且前者升幅高于后者(P<0.01)。结论CHF患者外周血淋巴细胞βmax水平下降,并与其严重程度密切相关。卡维地洛的非选择性βAR阻断作用使其对βmax的增高作用不如美托洛尔显著。