人类重组免疫球蛋白λ轻链022与TOM1基因在2型糖尿病胰岛素抵抗患者网膜脂肪组织的表达

目的:探讨人类重组免疫球蛋白λ轻链(HSIGVL)022和TOM1基因在2型糖尿病胰岛素抵抗(T2DM-IR)患者网膜脂肪组织表达水平并鉴定HSIGVL022蛋白表达。方法:取2型糖尿病伴胰岛素抵抗(T2DM-IR组)与非糖尿病无胰岛素抵抗者(对照组)网膜脂肪组织,用荧光定量RT-PCR技术测定HSIGVL022和TOM1 mRNA的表达量,用免疫组化方法鉴定HSIGVL022蛋白表达。结果:荧光定量RT-PCR显示HSIGVL022和TOM1 mRNA的表达量T2DM-IR组和对照组分别为(34 140±6 160)(、4 440±617)和(5 930±661)(、1 360±82)拷贝/每百万看家基因(P<0.05);HSIGVL022较TOM1表达量高(P<0.01),且与HOMA-IR呈直线相关(P<0.05);免疫组化显示HSIGVL022蛋白在T2DM-IR组和对照组阳性率分别为(12.43±2.41)%(、2.31±0.48)%,强阳性率分别为(6.62±1.69)%(、2.12±0.34)%,P<0.05。结论:HSIGVL022和TOM1在人网膜脂肪组织中均有表达,HSIGVL022表达量较高;在T2DM-IR者中均呈上调表达,HSIGVL022蛋白表达相应增高;HSIGVL022 mRNA表达量与HOMA-IR呈直线相关;这2条基因可能与T2DM-IR有关。

抗骨髓瘤蛋白λ链IgM类单抗的纯化及其活性分析

本文应用Sephadex G200层析柱直接从小鼠腹水中纯化抗骨髓瘤蛋白λ链IgM类McAb,并对其在280nm波长各吸收峰蛋白的抗体活性进行了测定,现将结果报告如下。

以人IgG作免疫原同时获取抗人γ重链及κ、λ轻链单克隆抗体的研究

本文报道用纯化的IgG免疫BALB/c小鼠,同时获得抗人γ重链及抗κ、λ轻链三种单克隆抗体。经鉴定,抗人γ重链McAb只与IgG反应,不与其它Ig及轻链反应。抗κ及λ链McAb除分别与游离的κ、λ轻链反应外,也与和Ig分子中重链结合的κ、λ反应。免疫电转印法测定,抗γ链McAb识别分子量为50KD的重链抗κ、λMcAb识别分子量为22KD的轻链。将所得抗κ、λ单克隆抗体分别与正常人周血单个核细胞进行反应,染色结果表明κ链表达与λ链表达细胞之比为2∶1;两种抗体配对混合后的反应结果与多克隆抗体Sm Ig一致。实验结果表明所获抗体符合抗γ、κ、λ单克隆抗体的特点。

抗人Ig轻链系列单克隆抗体的研制1．抗人λ轻链亚型／亚群单克隆抗体的制备及特性鉴定

采用ＤＥＡＥ５２提取的多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者尿本周蛋白为免疫原，应用鼠－鼠杂交瘤技术，建立４株能分泌抗人λ轻链单克隆抗体细胞株，经鉴定，为抗人游离λ轻链亚型／亚群抗原决定簇单克隆抗体细胞株。

IgG_κ、IgG_λ水平及其比值测定对多发性骨髓瘤患者预后判断的意义

目的探讨多发性骨髓瘤患者IgGκ、IgGλ水平及IgGκ/IgGλ比值测定对预后判断的意义。方法采用HevyliteTM法测定18例多发性骨髓瘤患者及30例健康者血清IgGκ、IgGλ水平,并进行随访,计算不同IgGκ、IgGλ水平和IgGκ/IgGλ比值患者1年和3年总体生存率。结果上述多发性骨髓瘤患者血清IgGκ、IgGλ水平的中位数分别为25.90、24.35g/L,高于健康者。上述患者1年和3年的总体生存率的比较,IgGκ/IgGλ在0.4～13范围的患者高于IgGκ/IgGλ<0.40或大于13的患者(P<0.05);IgGκ<23.70g/L或IgGλ<22.15g/L的患者高于IgGκ≥23.70g/L或IgGλ≥22.15g/L的患者(P<0.05)。结论血清IgGκ、IgG水平及其比值测定有助于多发性骨髓瘤患者预后的判断。

慢性阻塞性肺疾病患者体内游离免疫球蛋白轻链的表达及其意义

目的 探讨游离免疫球蛋白轻链（FLC）在吸烟肺功能正常者和慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）患者肺部炎症机制中的作用及临床意义.方法 收集徐州医学院附属医院胸外科2012年8-12月因周围型肺癌行肺叶切除术患者32例,分为3组.不吸烟肺功能正常组（不吸烟组）10例,吸烟肺功能正常组（吸烟组）12例,吸烟慢阻肺稳定期组（慢阻肺组）10例.取术前清晨空腹血清及癌旁肺组织,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清和肺组织匀浆中FLC-λ和FLC-κ含量,免疫组织化学法检测FLC-λ和FLC-κ在气道上皮、肺泡壁和血管壁的表达,分析FLC表达与肺功能指标的相关关系.结果 慢阻肺组、吸烟组血清FLC-λ和FLC-κ含量分别为（35 ±11）、（38±12）和（26 ±9）、（26 ±8） mg/L,均显著高于不吸烟组[（16±7）和（16±5） mg/L],差异均有统计学意义（q值分别为3.590 ～7.482,P＜0.01）;慢阻肺组显著高于吸烟组（q值分别为3.209～ 4.198,P＜0.05和P＜0.01）.慢阻肺组和吸烟组肺组织匀浆中FLC-λ和FLC-κ含量分别为（1.29±0.31）、（1.32±0.30）和（0.86±0.42）、（0.85±0.37）μg/mg,均显著高于不吸烟组[（0.45±0.18）和（0.42±0.13） μg/mg],差异均有统计学意义（q值分别为4.178～9.795,P＜0.05和P＜0.01）;慢阻肺组显著高于吸烟组（q值分别为4.269 ～4.349,均P＜0.05）.在气道上皮、肺泡壁和血管壁中均有FLC-λ和FLC-κ表达.血清和肺组织匀浆中FLC-λ和FLC-κ含量与FEV1占预计值％均呈显著负相关（r值为-0.476 ～-0.591,均P＜0.01）.结论 慢阻肺患者和吸烟肺功能正常者血清和肺组织中FLC表达增加,与气流受限密切相关,提示FLC在慢阻肺患者和吸烟者肺部炎症反应发生机制中有促炎作用.

尿轻链检测在原发性高血压肾脏损伤中的诊断价值

目的 探讨尿轻链检测在原发性高血压肾脏损伤中的诊断价值.方法 参照〈中国高血压防治指南〉（2005年修订版）,根据原发性高血压肾脏损害诊断标准,结合病史及靶器官受损情况,选取原发性高血压患者60例,分为两组：无肾脏损伤组28例,肾脏损伤组32例 另设健康对照组30名.采用散射免疫比浊法原理检测尿蛋白谱、尿轻链,应用MNP底物法检测NAG.比较各组尿轻链水平,并与Alb及α1-MG进行相关分析.结果 高血压肾脏损伤组lamU为8.89（3.84～33.30）×10-3g/L,高于无肾脏损伤组的3.84（3.84～10.40）×10-3g/L和健康对照组的3.84（0.00～3.84）×10-3g/L,差异有统计学意义（H=37.97,P＜0.01） 高血压肾脏损伤组kapU为26.65（6.97～62.5）×10-3 g/L,高于无肾脏损伤组的6.97（6.97～23.7）×10-3g/L和健康对照组的6.97（6.97～7.20）×10-3g/L,差异有统计学意义（H=40.09,P＜0.01）.高血压肾脏损伤组其他指标（Alb、α1-MG、IgG、TRF及NAG）检测结果均高于无肾脏损伤组、健康对照组（H值分别为21.02、32.65、25.50、30.45和30.57,P均＜0.01）.相关分析结果显示,Alb与尿IgG、TRF的相关系数分别为0.911、0.965,呈高度相关（P均＜0.01） 尿轻链lamU、kapU与α1-MG相关系数分别为0.804、0.827,呈高度相关（P均＜0.01） 而NAG与α1-MG不相关（相关系数为0.398,P＞0.05）.结论 尿轻链lamU、kapU可以作为评价高血压肾脏损伤,特别是肾小管损伤的诊断指标.

人类重组免疫球蛋白λ轻链022在2型糖尿病患者网膜脂肪组织的表达

用荧光定量RT-PCR和免疫组化方法测定2型糖尿病患者网膜脂肪组织人类重组免疫球蛋白λ轻链(HSIGVL)022 mRNA和蛋白的表达量。结果显示在2型糖尿病患者网膜脂肪组织中HSIGYL022 mRNA和蛋白表达均上调,表达量与胰岛素抵抗指数呈直线相关,提示其可能与胰岛素抵抗、2型糖尿病的发病有关。