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转录因子7-like 2在宫颈癌中表达水平及其与顺铂化疗敏感性关系研究
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作者 冯敏娟 蔡东阁 李虹 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第10期1335-1339,共5页
目的:探究转录因子7-like 2(TCF7L2)在宫颈癌患者中表达水平及其与顺铂化疗敏感性的相关性。方法:收集68例宫颈癌患者(观察组)和68例体检正常者(对照组)为研究对象。留取两组晨起静脉血样用于血清TCF7L2和β-catenin表达水平测定。分析... 目的:探究转录因子7-like 2(TCF7L2)在宫颈癌患者中表达水平及其与顺铂化疗敏感性的相关性。方法:收集68例宫颈癌患者(观察组)和68例体检正常者(对照组)为研究对象。留取两组晨起静脉血样用于血清TCF7L2和β-catenin表达水平测定。分析血清中TCF7L2和β-catenin与患者临床特征及顺铂化疗敏感性的关系。结果:观察组患者血清TCF7L2和β-catenin表达水平显著高于对照组(均P<0.05)。观察组患者FIGO分期Ⅳa期、肿瘤低分化者血清中TCF7L2、β-catenin表达水平明显高于FIGO分期Ⅱb期、Ⅲ期和肿瘤高分化者,FIGO分期Ⅲ期明显高于FIGO分期Ⅱb期,出现淋巴转移者高于无淋巴转移者(均P<0.05);同时顺铂化疗不敏感者血清TCF7L2、β-catenin表达水平明显高于敏感者(均P<0.05)。Logistic回归分析显示,血清中TCF7L2、β-catenin高表达是顺铂化疗不敏感的危险因素(均P<0.05)。结论:宫颈癌患者中TCF7L2异常高表达,且其高表达可能是导致患者顺铂化疗耐药的原因之一。 展开更多
关键词 宫颈癌 化疗 顺铂 转录因子7-like 2 预后 耐药性
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T4-like coliphage ΦKAZ14 virulent to pathogenic and extended spectrum β-lactamase-producing Escherichia coli of poultry origin 被引量:1
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作者 Kaikabo Adamu Ahmad Abdulkarim Sabo Mohanmmed +1 位作者 Faridah Abas Sieo Chin Chin 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2015年第1期73-75,共3页
Dear Editor,Bacteriophages(otherwise called phages)are a type of virus that infect bacteria.This viral type has found useful applications in the control of bacterial pathogens in foods and food processing environments... Dear Editor,Bacteriophages(otherwise called phages)are a type of virus that infect bacteria.This viral type has found useful applications in the control of bacterial pathogens in foods and food processing environments.In addition,phages may be useful to prevent colonization and shedding of bacteria into the surrounding environment. 展开更多
关键词 producing PATHOGENIC LACTAMASE ESBL otherwise environments phage chicken POULTRY avian
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A novel transposable Mu-like prophage in Bacillus alcalophilus CGMCC 1.3604(ATCC 27647) 被引量:1
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作者 Junjie Yang Yimeng Kong +1 位作者 Xuan Li Sheng Yang 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2015年第1期63-65,共3页
Dear Editor,Transposable phages,which are reproduced by transposition(Harshey,2012;Taylor,1963),have been widely applied in the field of biotechnology to manipulate operon/gene fusions,in vivo cloning,randomion mutage... Dear Editor,Transposable phages,which are reproduced by transposition(Harshey,2012;Taylor,1963),have been widely applied in the field of biotechnology to manipulate operon/gene fusions,in vivo cloning,randomion mutagenesis,and integration of DNA into bacterial genomes(Abalakina et al.,2008;Akhverdyan et al.,2011).One of the best-studied transposable phages is 展开更多
关键词 cloning biotechnology reproduced MUTAGENESIS phage sequencing DNA http Sanger CHROMOSOME
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Chitinase 3-like 1 secreted by peritumoral macrophages in esophageal squamous cell carcinoma is a favorable prognostic factor for survival 被引量:2
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作者 Shan Xing Xin Zheng +7 位作者 Tao Zeng Mu-Sheng Zeng Qian Zhong Yue-Song Cao Kai-Lu Pan Chu Wei Fan Hou Wan-Li Liu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2017年第43期7693-7704,共12页
AIM To identify whether chitinase 3-like 1(CHI3 L1) serves as a suitable biomarker for the prognosis of esophageal squamous cell carcinoma(ESCC) and to analyze this protein's cellular source.METHODS An ELISA was c... AIM To identify whether chitinase 3-like 1(CHI3 L1) serves as a suitable biomarker for the prognosis of esophageal squamous cell carcinoma(ESCC) and to analyze this protein's cellular source.METHODS An ELISA was conducted to detect the concentration of CHI3 L1 in the serum of 150 ESCC patients diagnosed between January 2001 and February 2005. The prognostic relevance of CHI3 L1 was evaluated by a Kaplan-Meier and Cox regression analysis. The immunohistochemistry was reanalyzed,and fluorescent staining was utilized to explore the cellular origins of CHI3 L1. We stimulated monocyte-derived macrophages(MDMs) with either IL-6 or the supernatant of the ESCC cell line Eca-109 and later investigated the level of CHI3 L1 by q PCR and ELISA.RESULTS The level of serum CHI3 L1 was higher in older patients(≥ 60) than in patients under the age of 60(P = 0.001). The patients with higher levels of CHI3 L1 had a significantly shorter overall survival,whereas the traditional markers,carcinoembryonic antigen and squamous cell carcinoma antigen,were less effective(P > 0.05). A multivariate Cox analysis(P = 0.001) indicated that CHI3 L1 was an independent prognostic factor for ESCC patients. Peritumoral macrophages in ESCC exhibited high levels of CHI3 L1. Interleukin-6(IL-6) and the supernatant of Eca-109 containing IL-6 stimulated MDMs to secrete CHI3 L1. The serum concentration of CHI3 L1 in the ESCC patients showed a weak correlation with the laboratory inflammatory parameters neutrophil(NEU,P = 0.045),neutrophil/lymphocyte rate(NLR,P = 0.016),and C-reactive protein(CRP,P < 0.001).CONCLUSION Our study first established a connection between the pretreated CHI3 L1 and patients with ESCC,and the serum CHI3 L1 was primarily secreted by ESCC-surrounded macrophages. 展开更多
关键词 Esophageal squamous cell carcinoma Prognostic biomarker Chitinase 3-like 1 Macrophage Esophageal squamous cell carcinoma
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苹果PRE6-like基因的克隆及在花青素合成中的功能分析
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作者 黄娟娟 黄亚萍 +2 位作者 李文芳 毛娟 陈佰鸿 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期812-823,共12页
【目的】通过验证苹果非典型成员多效唑抗性蛋白基因(PRE6-like)的功能,探索其在花青素生物合成中的调控作用。【方法】基于俄矮2号芽变枝条果皮转录组测序结果,筛选获得花青素合成相关调节基因MdPRE6-like,对其进行生物信息学分析,克隆... 【目的】通过验证苹果非典型成员多效唑抗性蛋白基因(PRE6-like)的功能,探索其在花青素生物合成中的调控作用。【方法】基于俄矮2号芽变枝条果皮转录组测序结果,筛选获得花青素合成相关调节基因MdPRE6-like,对其进行生物信息学分析,克隆CDS并构建过表达载体,瞬时表达金冠苹果果实,遗传转化苹果愈伤和拟南芥进行功能验证。【结果】MdPRE6-like cDNA全长279 bp,编码92个氨基酸,相对分子质量10450.75 Da,理论等电点(pI)为6.41,含有HLH结构域,亚细胞定位预测结果为细胞核。组织特异性表达分析表明,MdPRE6-like基因在花、果皮中的表达量显著高于根和叶。瞬时表达金冠苹果表明,MdPRE6-like显著促进了金冠苹果果皮注射部位花青素的积累,并显著提高了花青素合成通路相关结构基因的表达水平。MdPRE6-like基因在苹果愈伤组织和拟南芥过表达表明,转基因苹果愈伤组织和拟南芥叶脉中的花青素含量显著高于野生型,且花青素合成通路结构基因表达水平上调。【结论】MdPRE6-like基因能够正向调控花青素的合成和积累,为后续MdPRE6-like基因参与改良苹果果实品质提供理论参考。 展开更多
关键词 苹果 MdPRE6-like 花青素合成 遗传转化 表达水平
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香猪ZNF805-like基因结构变异与皮肤皱褶性状的关联研究
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作者 梁才康 黄世会 +2 位作者 牛熙 王嘉福 冉雪琴 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期282-289,共8页
基于比较基因组学分析,从皱皮香猪锌指蛋白805-like(Zinc Finger Protein 805-like,ZNF805-like)基因外显子4中检测到一个81 bp的结构变异(Structure Variant,SV),缺失型基因产生的转录本是NCBI记录的转录本变异体X2(XM_021097285.1)。... 基于比较基因组学分析,从皱皮香猪锌指蛋白805-like(Zinc Finger Protein 805-like,ZNF805-like)基因外显子4中检测到一个81 bp的结构变异(Structure Variant,SV),缺失型基因产生的转录本是NCBI记录的转录本变异体X2(XM_021097285.1)。为解析该SV对香猪皮肤皱褶形成的影响,本研究首先建立特异性PCR检测方法,明确普通香猪和皱皮香猪群体中该SV的分布;采用RT-qPCR方法分析了ZNF805-like基因在不同组织中的表达水平,并比较了具有不同基因型的皮肤组织中该基因的表达差异,进一步克隆出香猪ZNF805-like基因的CDS区;在此基础上,采用生物信息学方法分析SV对编码蛋白的理化性质、三维结构和对靶基因的影响。结果显示,在皱皮香猪和普通香猪群体中,ZNF805-like基因的E4-sv81位点存在2种基因型:Ⅱ型和ID型(D为缺失基因,Ⅰ与参考基因一致),皱皮香猪的D等位基因频率显著高于普通香猪,且皮肤组织中ID型的基因表达量显著高于Ⅱ型。基因克隆结果显示,野生型蛋白由725个氨基酸组成,突变型蛋白异构体2的肽链较短,由698个氨基酸组成。SV导致突变型蛋白异构体2的极性氨基酸减少,丢失了一个磷酸化位点,第1个锌指结构与其他锌指的间距拉大。本文研究结果提示,皱皮香猪的缺失型SV可上调皮肤ZNF805-like基因转录本X2的表达,产生较短的蛋白异构体2,可能通过改变蛋白异构体的高级结构和靶基因谱,参与香猪皱皮的形成过程。本研究将有助于在香猪群体中识别并淘汰携带皱皮基因的个体,从而为优质香猪的选择性育种提供科学依据和技术支持。 展开更多
关键词 香猪 皱皮 ZNF805-like 结构变异 转录本
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油菜素内酯对低温胁迫下冬小麦Rab15-like基因表达的影响
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作者 张军保 陈宇姝 +7 位作者 田诗 于梦迪 王雪松 曹佳昂 邵庆一 杨森 金忠民 刘丽杰 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期28-34,45,共8页
探索低温胁迫下油菜素内酯(Brassinosteroid,BR)对冬小麦叶片和分蘖节中Rab15-like基因表达的影响,以寒地冬小麦品种“东农冬麦1号”为试验材料,利用RT-PCR法克隆Rab15-like基因CDS序列,运用生物信息学方法分析该序列基本理化性质、二... 探索低温胁迫下油菜素内酯(Brassinosteroid,BR)对冬小麦叶片和分蘖节中Rab15-like基因表达的影响,以寒地冬小麦品种“东农冬麦1号”为试验材料,利用RT-PCR法克隆Rab15-like基因CDS序列,运用生物信息学方法分析该序列基本理化性质、二级结构和三级结构特征、Rab15-like蛋白保守性,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测BR处理对不同温度条件下冬小麦分蘖节和叶片中Rab15-like基因表达的影响。结果表明,Rab15-like基因编码区序列长度为1 265 bp,Rab15-like基因含有一个453 bp开放阅读框,编码150个氨基酸序列,Rab15-like蛋白为LEA家族第二大类蛋白,主要分布在细胞膜上,为稳定亲水性蛋白。RT-qPCR分析结果表明,Rab15-like基因表达量与温度变化相关,在叶片中,随着环境温度降低,Rab15-like基因表达先上调后下调,当环境温度达-10℃时表达量最高;在分蘖节中,随着温度降低,Rab15-like基因表达持续上调,-25℃时表达量最高。BR处理促进低温条件下该基因在叶片中表达,对5、0和-10℃条件下分蘖节中该基因表达影响较小,但显著促进-25℃条件下该基因表达(P<0.05)。Rab15-like基因表达受温度影响,说明Rab15-like基因可能参与冬小麦响应低温胁迫的信号途径。外源BR处理促进低温条件下该基因在冬小麦叶片和分蘖节中表达。 展开更多
关键词 油菜素内酯 低温胁迫 冬小麦 Rab15-like基因
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蓖麻RcNAC100-like基因克隆及表达特性分析
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作者 李艳肖 王丽娜 +2 位作者 朱贵爽 刘鹏 向殿军 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期67-76,共10页
NAC(NAM,ATAF1/2,CUC2)基因是胁迫信号转导网络中重要的调节因子,克隆蓖麻NAC基因,研究其分子特征及表达特性,旨在为研究蓖麻NAC基因的潜在功能提供数据支持。采取RT-PCR技术克隆通篦5号的RcNAC100-like基因并分析其分子特征,包括生物... NAC(NAM,ATAF1/2,CUC2)基因是胁迫信号转导网络中重要的调节因子,克隆蓖麻NAC基因,研究其分子特征及表达特性,旨在为研究蓖麻NAC基因的潜在功能提供数据支持。采取RT-PCR技术克隆通篦5号的RcNAC100-like基因并分析其分子特征,包括生物信息学、亚细胞定位、表达模式和转录激活域分析。结果表明,RcNAC100-like基因的cDNA全长1 244 bp,包含1 086 bp的CDS,共推导361个氨基酸,该蛋白质的不规则卷曲和α-螺旋结构较多,是1个亲水的、非分泌性蛋白质;系统进化分析结果表明,RcNAC100-like蛋白质与木薯和橡胶树NAC蛋白质的亲缘关系最近,且motif组成及位置高度相似;RcNAC100-like蛋白的亚细胞定位结果与预测结果一致,定位在细胞核;RcNAC100-like启动子的顺式作用元件预测结果显示,该区域有多个环境响应类元件和生长发育类相关元件;基因表达模式分析结果表明,RcNAC100-like基因有组织表达特异性,在根中的相对表达量最高;另外,该基因能够对不利环境(干旱、盐、冷和ABA胁迫)迅速做出反应并积极地表达,说明RcNAC100-like基因可能是蓖麻对逆境响应的关键基因;转录激活试验结果表明,RcNAC100-like转录因子在酵母中具有转录激活活性。综上,RcNAC100-like基因可能在蓖麻的抗逆境过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 蓖麻 RcNAC100-like基因 生物信息学 克隆 表达
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Temperate Stutzerimonas Phage Encoding Toxin-Antitoxin System Genes Represents a Novel Genus
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作者 ZHANG Hong GUO Ruizhe +14 位作者 GAO Chen ZHENG Kaiyang XIONG Yao DONG Yue LIU Yundan WANG Ziyue CHEN Ying WANG Hongmin SHAO Hongbing SUNG Yeong Yik MOK Wen Jye WONG Li Lian MCMINN Andrew WANG Min LIANG Yantao 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2024年第4期1087-1101,共15页
Stutzerimonas have been extensively studied due to their remarkable metabolic and physiological diversity.However,research on its phages is currently limited.In this study,we isolated a novel double-stranded DNA(dsDNA... Stutzerimonas have been extensively studied due to their remarkable metabolic and physiological diversity.However,research on its phages is currently limited.In this study,we isolated a novel double-stranded DNA(dsDNA)phage,vB_SstM-PG1,from the marine environment that infects Stutzerimonas stutzeri G1.Its dsDNA genome is 37204 bp long with a G/C content of 64.14%and encodes 54 open reading frames.The phage possesses a tail packaging structure that is different from known Stutzerimonas stutzeri phages and exhibits structural protein characteristics similar to those of temperate phages.In addition,two genes of toxin-antitoxin system,including YdaS_antitoxin and HEPN_SAV_6107,were found in the vB_SstM-PG1 genome and play important roles in regulating host growth and metabolism.With phylogenetic tree and comparative genomic analysis,it has been determined that vB_SstM-PG1 is not closely related to any phages previously identified in the GenBank database.Instead,it has a connection with enigmatic,uncultured viruses.Specifically,the vB_SstM-PG1 virus exhibits an average nucleotide identity of over 70%with six uncultivated viruses identified in the IMG/VR v4 database.This significant finding has resulted in the identification of a novel viral genus known as Metabovirus. 展开更多
关键词 Stutzerimonas vB_SstM-PG1 Metabovirus temperate phage genomic and phylogenetic analysis
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CmMYB3-like negatively regulates anthocyanin biosynthesis and flower color formation during the post-flowering stage in Chrysanthemum morifolium
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作者 Lijie Zhou Shenhui Liu +6 位作者 Yiguang Wang Yuxi Wang Aiping Song Jiafu Jiang Sumei Chen Zhiyong Guan Fadi Chen 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CAS CSCD 2024年第1期194-204,共11页
Color fading caused by a decrease in anthocyanin accumulation during the post-flowering stage significantly affects postharvest quality of chrysanthemum.However,the underlying mechanism by which anthocyanin accumulati... Color fading caused by a decrease in anthocyanin accumulation during the post-flowering stage significantly affects postharvest quality of chrysanthemum.However,the underlying mechanism by which anthocyanin accumulation decreases during the post-flowering stage still unclear,which greatly restricts design of molecular breeding in chrysanthemum.Here,a chrysanthemum SG7 R2R3 MYB transcription factor(TF),CmMYB3-like,was identified to have a function in regulating anthocyanin biosynthesis during the post-flowering stage.Quantitative real time PCR(qRT-PCR)assays showed that the expression of CmMYB3-like was gradually downregulated when anthocyanin content increased during the flowering stage and was significantly upregulated during the post-flowering stage.Genetic transformation of chrysanthemum and dual-luciferase assays in N.benthamiana leaves showed that CmMYB3-like suppressed anthocyanin accumulation by inhibiting the transcription of CmCHS and CmANS directly and that of CmF3H indirectly.However,overexpression or suppression of CmMYB3-like did not affect the biosynthesis of flavones or flavonols.Genetic transformation of chrysanthemum revealed that the overexpression of CmMYB3-like inhibited anthocyanin accumulation,but its suppression prevented the decrease in anthocyanin accumulation during the post-flowering stage.Our results revealed a crucial role of CmMYB3-like in regulating the color of petals during the post-flowering stage and provided a target gene for molecular design breeding to improve the postharvest quality of chrysanthemum. 展开更多
关键词 Post-flowering stage Color fading Anthocyanins CmMYB3-like CHRYSANTHEMUM Molecular breeding
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薰衣草JAZ和MYC2-like基因家族生物信息学及表达模式分析
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作者 尼格拉·阿布都外力 魏修振 +3 位作者 门婧婕 陈凌娜 陈永坤 黄耿青 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期79-90,共12页
JAZ蛋白和MYC2-like转录因子是茉莉酸(jasmonate,JA)类物质信号转导途径的关键调节因子,在植物的生长发育和次级代谢中发挥重要作用。以拟南芥13个JAZ蛋白和11个MYC2-like蛋白的氨基酸序列为参考序列,检索薰衣草基因组中的LaJAZ和LaMYC2... JAZ蛋白和MYC2-like转录因子是茉莉酸(jasmonate,JA)类物质信号转导途径的关键调节因子,在植物的生长发育和次级代谢中发挥重要作用。以拟南芥13个JAZ蛋白和11个MYC2-like蛋白的氨基酸序列为参考序列,检索薰衣草基因组中的LaJAZ和LaMYC2-like基因家族成员,并对其进行生物信息学分析。结果表明,在薰衣草基因组中共鉴定到26个LaJAZ和26个LaMYC2-like基因,这些基因不均匀的分布在22条染色体上。LaJAZ和LaMYC2-like基因启动子的顺式作用元件涉及植物对光、茉莉酸、脱落酸、防御和胁迫反应的响应。qRT-PCR显示,选择的6个LaJAZ基因在深紫色萼片中表达较高,而LaMYC2-like基因在浅紫色萼片中表达较高。此外,有15个LaJAZ和LaMYC2-like基因受茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)诱导。以上研究结果为薰衣草LaJAZ和LaMYC2-like基因的功能分析及其对JA信号的响应机理研究奠定了基础。 展开更多
关键词 薰衣草 JAZ家族 MYC2-like家族 生物信息学 表达模式 MEJA
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The BEL1-like transcription factor GhBLH5-A05 participates in cotton response to drought stress
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作者 Jing-Bo Zhang Yao Wang +4 位作者 Shi-Peng Zhang Fan Cheng Yong Zheng Yang Li Xue-Bao Li 《The Crop Journal》 SCIE CSCD 2024年第1期177-187,共11页
Drought stress impairs crop growth and development.BEL1-like family transcription factors may be involved in plant response to drought stress,but little is known of the molecular mechanism by which these proteins regu... Drought stress impairs crop growth and development.BEL1-like family transcription factors may be involved in plant response to drought stress,but little is known of the molecular mechanism by which these proteins regulate plant response and defense to drought stress.Here we show that the BEL1-like transcription factor GhBLH5-A05 functions in cotton(Gossypium hirsutum)response and defense to drought stress.Expression of GhBLH5-A05 in cotton was induced by drought stress.Overexpression of GhBLH5-A05 in both Arabidopsis and cotton increased drought tolerance,whereas silencing GhBLH5-A05 in cotton resulted in elevated sensitivity to drought stress.GhBLH5-A05 binds to cis elements in the promoters of GhRD20-A09 and GhDREB2C-D05 to activate the expression of these genes.GhBLH5-A05 interacted with the KNOX transcription factor GhKNAT6-A03.Co-expression of GhBLH5-A05 and GhKNAT6-A03 increased the transcription of GhRD20-A09 and GhDREB2C-D05.We conclude that GhBLH5-A05 acts as a regulatory factor with GhKNAT6-A03 functioning in cotton response to drought stress by activating the expression of the drought-responsive genes GhRD20-A09 and GhDREB2C-D05. 展开更多
关键词 Cotton(Gossypium hirsutum) BEL1-like transcription factor Drought stress Transcriptional regulation Drought tolerance
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Anti-tumor efficacy of Calculus bovis: Suppressing liver cancer by targeting tumor-associated macrophages
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作者 Ishita Kathuria Bhupesh Singla 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2024年第38期4249-4253,共5页
Despite significant advances in our understanding of the molecular pathogenesis of liver cancer and the availability of novel pharmacotherapies,liver cancer remains the fourth leading cause of cancer-related mortality... Despite significant advances in our understanding of the molecular pathogenesis of liver cancer and the availability of novel pharmacotherapies,liver cancer remains the fourth leading cause of cancer-related mortality worldwide.Tumor relapse,resistance to current anti-cancer drugs,metastasis,and organ toxicity are the major challenges that prevent considerable improvements in patient survival and quality of life.Calculus bovis(CB),an ancient Chinese medicinal drug,has been used to treat various pathologies,including stroke,convulsion,epilepsy,pain,and cancer.In this editorial,we discuss the research findings recently published by Huang et al on the therapeutic effects of CB in inhibiting the development of liver cancer.Utilizing the comprehensive transcriptomic analyses,in vitro experiments,and in vivo studies,the authors demonstrated that CB treatment inhibits the tumor-promoting M2 phenotype of tumor-associated macrophages via downregulating Wnt pathway.While multiple studies have been performed to explore the molecular mechanisms regulated by CB,this study uniquely shows its role in modulating the M2 phenotype of macrophages present within the tumor microenvironment.This study opens new avenues of future investigations aimed at investigating this drug’s efficacy in various mouse models including the effects of combination therapy,and against drug-resistant tumors. 展开更多
关键词 Calculus bovis Liver cancer M2-like tumor associated macrophages Wnt/β-catenin pathway Tumor environment
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福建NADC30-like PRRSV FJLY01株的全基因组分子特征分析 被引量:10
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作者 魏春华 刘建奎 +4 位作者 戴爱玲 龚丽贞 李晓华 黄思琼 杨小燕 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第3期51-60,67,共11页
【目的】了解福建省NADC30-like PRRSV FJLY01株的分子生物学特征和遗传演化规律,为PRRSV的防控提供参考。【方法】对采自福建省规模化猪场的疑似病料进行PRRSV分离鉴定,以NADC30PRRSV毒株基因序列为参考设计并合成9对引物,分别对分离... 【目的】了解福建省NADC30-like PRRSV FJLY01株的分子生物学特征和遗传演化规律,为PRRSV的防控提供参考。【方法】对采自福建省规模化猪场的疑似病料进行PRRSV分离鉴定,以NADC30PRRSV毒株基因序列为参考设计并合成9对引物,分别对分离株序列进行分段PCR扩增,经克隆测序后进行序列拼接,采用MEGA 6.0软件进行核苷酸及氨基酸同源性比对,并绘制其与其他35株毒株的系统遗传进化树。【结果】FJLY01株基因组全长为15 016bp(不包含polyA),包含10个开放阅读框,5′-UTR长190bp,3′-UTR长148bp,Nsp2基因缺失393bp。Nsp2蛋白存在类似PRRSV MN184和NADC30株的131个氨基酸的缺失。核苷酸比对结果表明,FJLY01株与VR-2332、MLV RespPRRS/Repro、CH-1a和BJ-4株核苷酸的同源性为85.2%~86.3%,与JXA1、HuN4等HP-PRRSV株核苷酸的同源性为83.7%~84.1%,与MN184A、MN184B株核苷酸的同源性为87.9%~88.2%,与NADC30株核苷酸的同源性最高,为97.1%。系统进化树分析表明,该毒株属于NADC30-like毒株,与JXA1、VR2332和CH-1a的亲缘关系较远。【结论】福建省存在NADC30-like毒株,应该加强PRRSV的监测。 展开更多
关键词 PRRSV 全基因组 NADC30-like 福建省
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梅花PmSOC1-like基因的克隆与表达分析 被引量:8
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作者 李玉舒 杨炜茹 +2 位作者 程堂仁 王佳 张启翔 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第5期78-85,共8页
SOC1/TM3(Suppressor of overexpression of constans 1/Tomato MADS-box gene 3)是MADS-box家族一员,它能够整合多条开花途径的开花信号,调节植物由营养生长向生殖生长的转变。为了解梅花成花转变过程的分子机理,采用RT-PCR的方法从梅... SOC1/TM3(Suppressor of overexpression of constans 1/Tomato MADS-box gene 3)是MADS-box家族一员,它能够整合多条开花途径的开花信号,调节植物由营养生长向生殖生长的转变。为了解梅花成花转变过程的分子机理,采用RT-PCR的方法从梅花长蕊绿萼中克隆到3个SOC1的同源基因,分别命名为Pm SOC1-1、Pm SOC1-2和PmSOC1-3,并采用荧光定量PCR对3个基因的表达模式进行了分析。序列分析表明,3个基因的编码区长度分别为645 bp(Pm SOC1-1)、654 bp(Pm SOC1-2)和660 bp(Pm SOC1-3);编码的氨基酸长度分别为214,217,219 aa。系统进化结果显示,Pm SOC1-1、Pm SOC1-2和Pm SOC1-3分别与拟南芥SOC1/TM3亚家族中的SOC1、AGL42/71/72和AGL14/19聚为一组。实时荧光定量分析结果表明,3个Pm SOC1-like基因均在茎、叶等营养器官中表达量较高,在花、果实和种子等生殖器官中表达量较低;在梅花花芽分化过程中,3个Pm SOC1-like基因的表达量整体呈下降趋势,推测PmSOC1-like基因可能在诱导梅花由营养生长向生殖生长转变过程中起重要作用。 展开更多
关键词 梅花 PmSOC1-like 基因克隆 表达分析
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菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒EP-1-like基因克隆、原核表达与多克隆抗体制备方法 被引量:6
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作者 刘鹏程 时敏 +3 位作者 陈亚锋 黄芳 孟祥锋 陈学新 《环境昆虫学报》 CSCD 2008年第1期33-38,共6页
本实验提取被菜蛾盘绒茧蜂寄生后24h的小菜蛾幼虫体内总RNA,反转录合成cDNA,以此为模板PCR扩增出菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒(Cotesia vestalis polydnavirus,CvBV)EP-1-like基因,将其分别克隆到表达载体pET30a、pET28a中,转化宿主菌BL21(D... 本实验提取被菜蛾盘绒茧蜂寄生后24h的小菜蛾幼虫体内总RNA,反转录合成cDNA,以此为模板PCR扩增出菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒(Cotesia vestalis polydnavirus,CvBV)EP-1-like基因,将其分别克隆到表达载体pET30a、pET28a中,转化宿主菌BL21(DE3),获得单克隆重组质粒pET-30a-EP1L和pET-28a-EP1L。经IPTG诱导,pET-28a-EP1L成功表达了约34.8kDa的包涵体蛋白。将诱导条件优化以后,采用割胶回收的方法纯化包涵体,将纯化后的表达蛋白免疫新西兰大耳兔制备多克隆抗体。ELISA分析表明制备的抗体效价达1:128000,Western blot检测证明抗体具有良好的免疫反应特异性。 展开更多
关键词 CvBV EP-1-like 原核表达 多克隆抗体
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菊苣对高尿酸血症鹌鹑肾脏有机阴离子转运体OAT3-LIKE的影响 被引量:8
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作者 李丽玉 林志健 +5 位作者 张冰 王雪洁 朱春胜 牛红娟 周月 董百惠 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期284-289,共6页
目的从肾脏转运蛋白角度探究中药菊苣降尿酸的药效机制。方法将40只雄性迪法克鹌鹑按体质量随机分为5组,正常组给予普通饲料,其余各组均给予含酵母饲料(15 g·kg-1·d-1)建立高尿酸血症模型,同时给药组分别给予菊苣5,7.5 g·... 目的从肾脏转运蛋白角度探究中药菊苣降尿酸的药效机制。方法将40只雄性迪法克鹌鹑按体质量随机分为5组,正常组给予普通饲料,其余各组均给予含酵母饲料(15 g·kg-1·d-1)建立高尿酸血症模型,同时给药组分别给予菊苣5,7.5 g·kg-1·d-1,苯溴马隆20 mg·kg-1·d-1,实验第35天处死。检测鹌鹑血清尿酸(Uric Acid,UA)、尿素氮(Urea Nitrogen,BUN)水平,并用Real-time RT-PCR(Real-time Reverse TranscriptionPolymerase Chain Reaction)方法检测其肾脏有机阴离子转运体OAT3-LIKE(Organic Anion Transporter3-LIKE)的mRNA表达水平,同时测定肝脏尿酸代谢相关酶活性。结果与正常组比较,实验第21天、28天、35天模型组鹌鹑血尿酸升高,第35天肾脏OAT3-LIKE m RNA表达水平下降。与模型组比较,实验第35天,菊苣可以降低鹌鹑血尿酸水平,上调其肾脏OAT3-LIKE mRNA表达水平并降低肝脏腺苷脱氨酶(ADA)活性。结论高嘌呤食饵可以成功诱导鹌鹑高尿酸血症;菊苣具有抑制高尿酸血症鹌鹑尿酸生成和促进尿酸排泄的双重作用;菊苣药效机制可能与降低ADA活性及上调OAT3-LIKE表达水平相关。 展开更多
关键词 菊苣 鹌鹑 高尿酸血症 肾脏有机阴离子转运体 OAT3-like
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玫瑰GASA4-like基因的克隆及其序列分析 被引量:3
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作者 张强 孟月娥 +3 位作者 李艳敏 王慧娟 王利民 王志勇 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第9期161-166,共6页
从大马士革玫瑰(Rosa damascena)中利用同源克隆结合RACE的方法首次获得了一个GASA4-like基因的cDNA和DNA序列全长(GenBank登陆号FJ595792,FJ595793),并利用TAIL—PCR的方法克隆了其部分启动予序列。结果表明,玫瑰GASA4-like基... 从大马士革玫瑰(Rosa damascena)中利用同源克隆结合RACE的方法首次获得了一个GASA4-like基因的cDNA和DNA序列全长(GenBank登陆号FJ595792,FJ595793),并利用TAIL—PCR的方法克隆了其部分启动予序列。结果表明,玫瑰GASA4-like基因包含4个外显子,3个内含子,开放阅读框为327bp,编码108个氨基酸序列。对推导的氨基酸序列分析发现,N末端1~26个氨基酸是一信号肽序列,c末端含有12个保守的半胱氨酸残基,具有GASA基因家族共同的一些结构特征。系统进化分析表明,玫瑰GASA4-like与分生组织中表达的GAsA蛋白聚为一类。启动子顺式作用调控元件分析表明,GASA4-like基因上游318bp的部分启动子含有诱导表达调控元件和一些转录因子的结合位点;最后,对GASA4-like基因可能的生物学功能进行了预测。 展开更多
关键词 玫瑰 GASA4-like 克隆 序列分析
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萼脊兰SeAP1-like基因的克隆与表达载体构建 被引量:4
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作者 蒋素华 袁秀云 +3 位作者 王洁琼 武振江 张国付 崔波 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第1期105-109,共5页
根据NCBI网站上萼脊兰AP1-like全长基因序列设计引物,采用RT-PCR法从萼脊兰花瓣中扩增Se AP1-like基因,对扩增产物进行克隆和测序。结果表明,获得的萼脊兰Se AP1-like基因为743 bp,编码247个氨基酸。将Se AP1-like基因插入p CAMBIA1304... 根据NCBI网站上萼脊兰AP1-like全长基因序列设计引物,采用RT-PCR法从萼脊兰花瓣中扩增Se AP1-like基因,对扩增产物进行克隆和测序。结果表明,获得的萼脊兰Se AP1-like基因为743 bp,编码247个氨基酸。将Se AP1-like基因插入p CAMBIA1304载体中,经PCR、双酶切鉴定,证实重组表达质粒中含有目的片段,表明成功构建了高效植物表达载体p CAMBIA1304-Se AP1。对Se AP1-like基因的结构域和所表达蛋白质的亲水性进行了分析,并预测了该基因所表达蛋白的二维结构。结果显示,该基因包含MADS-box和K-box保守域,属于MADS-box基因家族,该蛋白分子属于亲水性蛋白。二级结构分析表明,其包含57.49%的α螺旋、6.07%的延伸链、36.44%的不规则折叠。 展开更多
关键词 萼脊兰 SE AP1-like基因 克隆 载体构建
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大马士革玫瑰RdGASA4-like基因启动子的分离及其在甘蓝中的瞬时表达分析 被引量:2
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作者 张强 张晓伟 +3 位作者 孟月娥 李艳敏 王慧娟 王利民 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第8期123-127,共5页
在前期的研究中,一个玫瑰RdGASA4-like基因的cDNA和DNA序列全长利用同源克隆结合RACE的方法首次得到克隆。为深入了解该基因在赤霉素调控植物发育过程中的作用,通过TAIL-PCR的方法首次克隆该基因起始密码子ATG上游685bp的5’-UTR和部分... 在前期的研究中,一个玫瑰RdGASA4-like基因的cDNA和DNA序列全长利用同源克隆结合RACE的方法首次得到克隆。为深入了解该基因在赤霉素调控植物发育过程中的作用,通过TAIL-PCR的方法首次克隆该基因起始密码子ATG上游685bp的5’-UTR和部分启动子序列,在启动子序列分析的基础上,构建其与GUS基因融合表达载体,命名为pBI-GP685。通过农杆菌介导的方法对甘蓝外植体子叶-子叶柄进行启动子瞬时表达研究,结果表明分离得到的启动子具有启动报告基因GUS表达的活性。 展开更多
关键词 RdGASA4-like 分离 启动子 瞬时表达
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