RNA聚合酶σ^(38)亚基缺失对假单胞菌抗生物质合成代谢的影响

设计引物从假单胞菌M18基因组DNA中扩增并获得rpoS基因的378bp保守区段。以此为探针,从假单胞菌基因组文库中克隆了包括rpoS基因全序列及其相邻序列的3·1kbEcoRⅠ-XhoⅠ片段。通过抗性基因(抗庆大霉素基因)的定点插入构建了σ38亚基缺失突变株M18S。HPLC检测结果显示,σ38亚基缺失引起该菌株的抗生物质合成代谢的显著变化。与野生株相比,缺失突变株的吩嗪-1-羧酸在PPM和KMB中2种培养基中合成量由58μg/mL和10·2μg/mL分别减少到20·4μg/mL和0μg/mL;而缺失突变株的藤黄绿脓菌素则相反,在PPM和KMB两种培养基中合成量由0·5μg/mL和20·5μg/mL分别提高到75·4μg/mL和185·6μg/mL。表明σ38亚基可区别性调控假单胞菌M18的抗生物质合成代谢。rpoS基因的互补实验和两种抗生素基因与β-半乳糖苷酶基因的翻译融合表达实验进一步验证了上述的结果:σ38亚基正调控吩嗪-1-羧酸的表达,而负调控藤黄绿脓菌素的表达。

慢性HBV感染者CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR表达的变化和意义

目的检测慢性HBV感染者外周血CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR表达水平,探索HBV感染过程中CD8^+T细胞活化与耗竭的相关性。方法收集未经抗病毒治疗的HBV感染者76例及健康对照者14例外周血,根据外周血HBV DNA水平分为高病毒载量组与低病毒载量组;使用流式细胞术检测HBV感染者CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR的表达以及共表达水平,同时进行相关性分析。结果与健康对照组比较,慢性HBV感染者CD8^+T细胞CD95、HLA-DR的表达、CD38和HLA-DR的共表达水平显著升高(P<0.01);CD8^+T细胞CD95与HLA-DR表达呈正相关(P<0.05)。结论慢性HBV感染过程中CD95的表达可能对外周血CD8^+T细胞的耗竭过程发挥重要作用,而HLA-DR的表达升高和CD38+HLA-DR+CD8^+T细胞频率的升高提示CD8^+T细胞仍然维持着一定的效应潜能。

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞CD8^+CD38^+的检测意义

目的:通过测定慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞CD8+CD38+的表达及门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、凝血酶原时间(PT),旨在为治疗慢性乙型肝炎提供有用的参考指标。方法:流式细胞术检测38例慢性乙型肝炎、14例肝硬化患者外周血淋巴细胞CD8+CD38+细胞的百分率;同时测定AST、TBIL和PT。结果:(1)慢性乙型肝炎组CD8+CD38+、CD38+细胞均明显高于正常组(P<0.01,P<0.01),肝硬化组CD8+CD38+、CD38+细胞均明显高于正常组(P<0.05,P<0.05)。肝硬化组CD8+CD38+、CD8+细胞均明显低于慢性乙型肝炎组(P<0.05,P<0.05)。(2)慢性乙型肝炎轻、中、重各组之间比较,中度组CD8+CD38+高于轻度组(P<0.05),重度组CD8+CD38+、CD8+、CD38+均高于轻度组(P<0.05,P<0.05,P<0.05);重度组CD38+高于中度组(P<0.05);肝硬化组CD8+CD38+均明显低于轻、中、重各组(P<0.05,P<0.01,P<0.01),肝硬化组CD8+低于重度组(P<0.01)。(3)慢性乙型肝炎患者AST、TBIL、PT不正常组CD8+CD38+均高于AST、TBIL、PT正常组。结论:慢性乙型肝炎患者CD8+CD38+细胞明显升高,表明慢性乙型肝炎患者细胞免疫处于异常激活状态,并与肝功能损伤有一定的相关性。慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞CD8+CD38+的测定,对病情分析和诊断有一定的临床参考价值。

脐血中CD34^+CD38^+细胞含量对急性白血病患者移植后造血重建的影响

为了探讨非亲缘脐血移植中CD34+ CD38+ 细胞回输量对造血重建的影响 ,采用流式细胞术分析复苏后的CD34+ CD38+ 细胞数 ,并对 2 0例急性白血病患者的体重、中性粒细胞 (ANC)和血小板 (Plt)恢复时间进行测定。结果表明 :2 0例接受的CD34+ CD38+ 细胞输入量为 (9.85 - 32 5 .71)× 10 4/kg ,其ANC恢复 >5× 10 8/L的中位时间为 18 5 (11- 32 )天。在 19例患者中Plt恢复 >2× 10 10 /L的中位时间为 4 5 (12 - 118)天。CD34+ CD38+ 细胞输入量与ANC和Plt恢复时间存在相关 ,r值分别为 - 0 .5 77(P <0 .0 1)和 - 0 .5 0 3(P <0 0 5 )。结论 :CD34+ CD38+细胞含量与造血恢复时间相关 ,足量输入CD34+ CD38+

白藜芦醇对CD34^+CD38^- KG-1a白血病细胞凋亡的诱导作用

目的观察白藜芦醇(RES)诱导CD34+CD38-KG-1a白血病细胞凋亡的效应,初步探讨其作用机制。方法流式细胞术检测急性髓系白血病KG-1a细胞CD34和CD38的表达。以未加药物为对照,台盼蓝计数检测不同浓度(12.5、25.0、50.0、100、200μmol/L)RES对KG-1a细胞和外周血单个核细胞增殖的影响。选择KG-1a细胞抑制率约为50%的RES浓度作为后续实验的干预因素。AnnexinV-FITC/PI染色流式细胞术检测RES诱导KG-1a细胞的凋亡效应,real-time RT-PCR检测RES对KG-1a白血病细胞Bcl家族抗凋亡Bcl-2/Bcl-xl基因和促凋亡基因Bid/Bax表达的影响,分光光度法检测RES对KG-1a细胞Caspase-3活性的影响。结果 KG-1a细胞中CD34+CD38-细胞比例占(90.23±2.57)%。RES能抑制KG-1a白血病细胞生长,呈浓度依赖性。25.0μmol/L RES对KG-1a细胞的抑制率约为50%,而该浓度对正常单个核细胞增殖无抑制作用。25.0μmol/L RES能诱导KG-1a细胞发生早期凋亡(AnnexinV-FITC+PI-)和晚期凋亡(AnnexinV-FITC+PI+)。25.0μmol/L RES作用后的KG-1a细胞,抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl表达下调,促凋亡基因Bid和Bax表达升高,Caspase-3活性增强。结论 RES能调节Bcl-2家族,诱导CD34+CD38-KG-1a白血病细胞凋亡。

小白菊内酯抑制CD34^+CD38^-KG-1a白血病细胞的增殖并增强其被allo-NK细胞杀伤的敏感性

目的:探讨小白菊内酯(parthenolide,PTL)对CD34+CD38-KG-1a白血病细胞的增殖、Bcl-2表达及其被同种异体NK(allo-NK)细胞杀伤敏感性的影响。方法:免疫磁珠法从KG-1a细胞中分离CD34+CD38-KG-1a细胞。XTT法检测PTL对CD34+CD38-白血病细胞增殖的影响,Real-time PCR和Western blotting分别检测PTL对CD34+CD38-KG-1a细胞Bcl-2mRNA和蛋白表达的影响,LDH释放法观察PTL对CD34+CD38-KG-1a细胞被allo-NK细胞杀伤敏感性的影响。结果:PTL对CD34+CD38-KG-1a细胞增殖的抑制呈剂量(2.5~80μmol/L)依赖性。PTL浓度为2.5μmol/L时,PTL组CD34+CD38-KG-1a细胞的增殖抑制率显著高于对照组[(4.89±1.07)%vs 0,P<0.01];PTL杀伤CD34+CD38-KG-1a细胞的IC50为20μmol/L;PTL组CD34+CD38-KG-1a细胞Bcl-2 mRNA[(0.105±0.007)vs(0.307±0.013),P<0.01]与蛋白表达均显著低于对照组。在效靶比为10∶1,20∶1和40∶1时,allo-NK细胞对PTL组CD34+CD38-KG-1a细胞杀伤率逐步升高,且均高于阴性(无PTL处理)对照组[(19.76±1.01)%,(30.14±0.96)%和(51.48±3.15)%vs(12.50±1.42)%,(16.90±0.93)%和(31.70±1.53)%(均P<0.01)];效靶比为40∶1时,allo-NK细胞对PTL组细胞的杀伤效率显著高于阳性(Bcl-2抑制剂ABT-737处理)对照组[(51.48±3.15)%vs(43.08±2.81)%,P<0.05]。结论:PTL能抑制CD34+CD38-KG-1a细胞的增殖并增强其被allo-NK细胞杀伤的敏感性,这可能与PTL下调Bcl-2的表达有关。

AIDS患者高效抗逆转录病毒联合治疗后外周血CD_8^+CD_(38)^+T细胞与病毒载量同步变化

目的 了解艾滋病 (AIDS)患者高效抗逆转录病毒联合治疗 (HAART)前后外周血CD+ 3 8抗原在CD+ 8T淋巴细胞上的表达情况。方法 应用流式细胞仪采用双色荧光抗体检测技术检测CD+ 8CD+ 3 8T细胞 ;用罗式核酸扩增荧光定量聚合酶链反应 (PCR)法检测血浆病毒载量 (VL)。结果 HAART后 2周内CD+ 8CD+ 3 8T细胞数与VL开始同步下降 ,12周后 83%AIDS患者的VL降至 <5 0 0拷贝 /ml,同时CD+ 8CD+ 3 8T细胞计数与治疗前相比非常明显地降低 (P <0 0 0 1)。而且 6 3%的AIDS患者在血浆VL低于检测水平时 ,其CD+ 8CD+ 3 8T细胞数仍继续下降 (与VL开始达到检测水平以下时相比 ,P <0 0 0 1)。结论 AIDS患者在HAART开始后 ,CD+ 8CD+ 3 8T细胞数与VL快速下降 ,在 2 4周左右降至正常水平 ;并且CD+ 8CD+ 3 8T细胞数在VL达到检测不到时仍继续下降 ,提示在血浆VL低于检测水平时 ,CD+ 8CD+ 3 8T细胞数能够作为判断病毒是否复制的标记。

基于P38MAPK通路的复方参鹿颗粒含药血清对TNF-α诱导的正常骨髓CD34^+细胞凋亡的影响

目的基于P38MAPK途径探讨复方参鹿颗粒含药血清对TNF-α诱导的正常骨髓CD34+细胞凋亡的影响。方法 Wistar大鼠随机分为空白组和复方参鹿颗粒低、中、高剂量组,分别制备空白血清和不同浓度的含药血清。收集并分离8例正常的骨髓单个核细胞(BMMC),分别加入空白血清和10%不同浓度含药血清,与20 ng/ml人重组TNF-α共同培养。流式细胞术检测CD34^+细胞凋亡率,Western blot检测骨髓单个核细胞P38、p-P38、P53、p-P53、Bcl-xl、Bcl-2蛋白表达,荧光定量PCR检测P38、P53、Bcl-xl、Bcl-2mRNA表达。结果与空白组相比,复方参鹿颗粒中、高剂量组CD34^+细胞凋亡率以及p-P38、p-P53蛋白表达显著下降,Bcl-xl蛋白和mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论复方参鹿颗粒含药血清可有效抑制TNF-α诱导的正常骨髓CD34^+细胞凋亡,下调p-P38和p-P53蛋白表达,上调Bcl-xl表达。其机制可能与P38MAPK通路介导的凋亡途径有关。

σ^(38)和RMF对有关基因表达调控的研究

将大肠杆菌的rpoS和rmf基因突变型和野生型菌株分别培养在营养丰富的LB培养基和成分有限的EP培养基上。在相同条件下,进入稳定期后的突变型菌株的活细胞数低于野生菌株。采用 Western blot方法测定了不同基因产物在稳定期的变化。σ^(38)对RNA聚合酶核心酶亚单位结构基因 rpoA、rpoB、rpoC以及groEs和tufA基因的表达影响不大,能抑制crp和促进rmf的表达。RMF在营养丰富的条件下对rpoA、rpoD,groEl、rho、tufA和ompA基因的表达有促进作用,而在EP条件下的影响并不明显,对crp和rpoS的表达分别有抑制和促进作用。

microRNA在人脐血CD34^+CD38^-、CD34^+CD38^+细胞中的差异性表达

为进一步探讨microRNA(miRNA)在造血调控中的作用奠定基础,比较了miRNA在人脐血CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞中的差异性表达。从人脐血中分离单个核细胞(MNC),应用FACSVantage分选流式细胞仪分选CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞;抽提miRNA后与miRNA芯片杂交,应用生物信息学技术分析miRNA芯片的表达结果。结果发现,miRNA在人脐血CD34+CD38+细胞的表达水平比在CD34+CD38-细胞的表达水平降低至1/2以下者共11个,表达水平升高至2倍以上者共73个,以上84个miRNA被称为"干细胞性"miRNA。经比较Georgantas等和芯片表达结果,发现有12个(14.29%,12/84)相同的miRNA。部分miRNA经历了类似于CD34在造血细胞表面的发展历程。应用生物信息学技术可寻找到新的与造血调控相关的miRNA簇及miRNA的下游靶基因。结论:"干细胞性"miRNA在正常造血中发挥着重要作用,即miRNA的系统表达模式→造血干/祖细胞基因表达谱→造血干/祖细胞的自我更新和系列定向分化。

脐血CD34^+CD38^-早期造血祖细胞的体外增殖和凋亡

为了从适龄产妇脐血中分离出CD34+CD38-细胞,在体外较长时间培养后观察分析CD34+CD38-细胞分 裂增殖、凋亡以及干细胞因子对CD34+CD38-细胞增殖的影响,用流式细胞仪从10例健康产妇脐血中分选出 CD34+和CD38-标记的脐血原始细胞,在添加IL-3、IL-6、GM-CSF、EPO、IGF-1和SCF 6种混合因子的干细胞培养基 中培养6个月,观察细胞并绘制生长曲线,用单细胞凝胶电泳检测干细胞因子对CD34+CD38-细胞生长的影响和 用流式细胞仪检测CD34+ CD38-细胞凋亡情况。结果表明:脐血CD34+CD38-细胞可在体外较长时间培养增殖, 无异常或过度的细胞凋亡发生。结论:通过控制培养条件,脐血CD34+CD38-早期造血祖细胞可在体外较长时间 培养增殖,以作为大量脐血原始细胞移植的细胞来源。

慢性髓系白血病患者CD34^+ CD38^-细胞水平JunB和CDH13基因启动子区域的甲基化状态研究

慢性髓系白血病(CML)是骨髓造血干细胞恶性增殖的克隆性疾病,在CML患者细胞水平由于JunB和CDH13基因启动子区甲基化而使这2个抑癌基因的表达受损。为了探讨正常人和CML患者CD34+ CD38-细胞水平JunB和CDH13(cadhe rin-13)基因启动子区域甲基化状态及表达水平的差异,应用流式细胞仪分选出CD34+ CD38-细胞,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测5例正常人和8例CML患者骨髓CD34+ CD38-细胞JunB和CDH13基因启动子区域甲基化状态,用实时定量PCR(RT-PCR)检测JunB和CDH13基因的表达情况。结果表明:JUNB和CDH13基因在正常人骨髓CD34+ CD38-细胞中呈完全性非甲基化状态,CML患者骨髓CD34+ CD38-细胞中JunB和CDH13基因启动子区甲基化比例分别为87.5%(7/8)和50%(4/8),明显高于正常人(p<0.05)。CML患者骨髓CD34+ CD38-细胞中JunB和CDH13基因mRNA相对表达水平与正常人的相比明显降低(2-??CT分别为1/5.21和1/10.63)。结论:在CML患者骨髓CD34+ CD38-细胞中JunB和CDH13基因启动子区域都发生了高度的甲基化,它们的mRNA表达水平也明显降低,JunB和CDH13基因启动子区域甲基化在CML的发病机制中起到一定的作用,甲基化检测对CML的靶向治疗及新的治疗方法具有重要意义。

CD34^+CD38^+造血干细胞移植MISTRG小鼠的人源化免疫特征研究

目的研究人脐带血CD34^+CD38^+造血干细胞移植入MISTRG免疫缺陷小鼠体内的人源化免疫特征。方法利用Ficoll密度梯度离心法从新生儿脐带血中分离单个核细胞,并结合免疫磁珠法分选hCD34^+造血干细胞,然后经体外扩增培养后利用流式细胞技术检测CD34^+CD38^+细胞的比例。取2×105细胞数注射至辐照后的新生MISTRG小鼠肝脏内,分别于第3、6、9、12周采血检测人源免疫细胞的分化与表达情况。结果免疫磁珠法分选人的CD34^+CD38^+造血干细胞纯度高达92.0%。移植小鼠外周血中的hCD45^+细胞初始浓度水平大于10.0%,淋巴细胞群包含人源T(hCD3^+CD45^+)、B(hCD3-CD19^+)和NK(hCD3-CD56^+)淋巴细胞,其中B(hCD3-CD19^+)淋巴细胞所占比值最大(初始水平为49.0%±7.4%),髓系细胞群则主要由巨噬细胞组成(初始水平为82.3%±4.5%)。小鼠外周血中hCD45^+细胞比值和T细胞占免疫细胞的比值随着时间的推移逐渐下降,B淋巴细胞和巨噬细胞所占的比例逐渐升高,而NK细胞基本完全消失。结论人源CD34^+CD38^+造血干细胞在新生MISTRG小鼠中可有效分化为人源淋系和髓系免疫细胞。在移植后的12周内hCD45^+细胞的比例逐渐下降,MISTRG免疫缺陷小鼠最佳的人源化免疫系统维持时间为第3～6周。

CD34^+CD38^-KG1a白血病干细胞对同种异体自然杀伤细胞的抵抗作用及其机制

目的探讨CD34^+CD38^-KG1a白血病干细胞抵抗同种异体自然杀伤(NK)细胞杀伤作用的机制。方法采用免疫磁珠法(MACS)分选CD34^+CD38^-KG1a细胞和4例健康个体外周血中NK细胞,并采用流式细胞术检测纯度;乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞在不同效靶比(5∶1,10∶1,20∶1)下对K562和CD34^+CD38^-KG1a细胞的杀伤作用;聚合酶链式反应-序列特异性引物法分析NK细胞KIR和CD34^+CD38^-KG1a细胞HLA-Ⅰ基因分型;流式细胞术检测K562和CD34^+CD38^-KG1a细胞表面主要组织相容性复合体(MHC)-I类链相关分子A/B、人巨细胞病毒UL16结合蛋白(ULBP)1~3和人类白细胞抗原(HLA)-Ⅰ类分子的表达。结果分选的CD34^+CD38^--KG1a细胞和NK细胞纯度分别为(94.25±2.16)%、(91.70±2.05)%。NK细胞在各效靶比下对CD34^+CD38^-KG1a细胞的杀伤率均低于K562细胞(P<0.05)。4例健康个体NK细胞KIR基因型为KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1和KIR3DL2,CD34^+CD38^-KG1a细胞HLA-Ⅰ基因型为A30、30,B51、78,Cw4、16。K562细胞高表达NKG2D配体,CD34^+CD38^-KG1a细胞几乎不表达NKG2D配体,CD34^+CD38^-KG1a细胞中NKG2D配体表达率显著低于K562细胞(P<0.05);K562细胞中几乎不表达HLA-Ⅰ,CD34^+CD38^-KG1a细胞高表达HLA-Ⅰ,CD34^+CD38^-KG1a细胞中HLA-Ⅰ的表达率显著高于K562细胞(P<0.05)。结论CD34^+CD38^-KG1a细胞明显抵抗同种异体NK细胞的杀伤作用,其机制可能与高表达HLA-Ⅰ分子和低表达NK2D配体有关。

脑溢安对新生大鼠海马神经干细胞缺氧损伤及p38MAPK活性的影响

目的探讨中药脑溢安颗粒(简称脑溢安)对神经干细胞缺氧损伤的影响及其保护作用机制.方法体外培养神经干细胞来自新生3～5 d SD大鼠海马组织,造缺氧损伤模型,用原位末端标记法(TUNEL)进行细胞凋亡检测,应用免疫共沉淀、激酶反应及Western blot技术研究脑溢安对缺氧损伤神经干细胞内p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 Mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)活性的影响.结果培养神经干细胞缺氧损伤后发生凋亡,脑溢安能促进缺氧损伤神经干细胞存活及减少神经干细胞凋亡;缺氧损伤后神经干细胞内p38MAPK活性增强,脑溢安血清组p38MAPK活性显著低于模型组和正常血清组(P＜0.01).结论脑溢安能保护缺氧损伤神经干细胞,抑制缺氧损伤激活的p38MAPK信号转导通路可能为其保护作用机制之一.

HIV-1感染者CD4^+CD127^-T细胞减少与PD-1高表达相关

目的通过检测HIV-1感染者CD4+CD127^-T细胞上PD-1、HLA-DR和CD38的表达水平,探究HIV-1感染者CD4+CD127^-T细胞的免疫状态。方法募集慢性HIV-1感染者70例,根据CD4^+T细胞计数绝对值,将慢性HIV-1感染者分为高CD4+计数组(CD4^+T细胞≥500 cells/μl)、中CD4+计数组(350 cells/μl≤CD4^+T细胞<500 cells/μl)和低CD4+计数组(CD4^+T细胞<350 cells/μl);同时设立健康对照组12例。利用流式细胞术检测HIV-1感染者和健康对照者外周血中CD4+CD127^-T细胞PD-1、CD38和HLA-DR的表达情况,并分析不同指标表达的相关性。结果在HIV-1慢性感染期间,外周血CD4+CD127^-T细胞百分比与CD4计数绝对值负相关(P<0.05);CD4+计数<350 cells/μl的HIV-1感染者CD4+CD127^-T细胞上HLA-DR与CD38表达水平显著升高,并且与CD4计数存在负相关关系(P<0.05)。HIV-1感染者PBMCs中CD4+CD127^-T细胞上高表达PD-1,并且PD-1与CD4计数存在负相关关系,与HLA-DR的表达存在正相关关系。结论在慢性HIV-1感染过程中,CD4^+T细胞数量的减少可能与CD4+CD127^-T细胞PD-1的表达相关。

脐血CD34^+细胞体外短期培养扩增研究

为寻找更有效的体外扩增脐血CD34 + 细胞的造血细胞因子组合 ,采集健康产妇脐带血 ,用免疫磁珠法分选CD34 + 细胞。采用SCF、FLT3 L、TPO和IL 34种具有早期作用的细胞因子的不同组合进行脐血CD34 + 细胞短期无血清液体培养 ,观察培养前后有核细胞、CD34 + 细胞、CD34 + /CD38- 细胞、CFU GEMM、CFU GM和BFU E数量的变化。结果在 3种不同的细胞因子组合中 ,同时应用SCF、FLT3 L、TPO和IL 34种细胞因子培养 7d的扩增效果最好。突出的发现是在这种条件下CD34 + /CD38- 细胞亚群达到平均 1 97.9倍的扩增效果。提示 :SCF、FLT3 L、TPO和IL 34种细胞因子是脐血CD34 +

HIV/HCV共感染者T淋巴细胞亚群CD_(28)、CD_(38)分子表达特征的分析

目的通过观察HIV/HCV共感染者外周血T淋巴细胞亚群CD_(28)、CD_(38)分子的表达规律,探讨其与疾病进展的相关性。方法本研究选择本院2012年8月至2014年10月门诊HIV感染者40例、HIV/HCV共感染患者40例及体检中心2014年9~10月体检健康人群20例,采用流式细胞术检测HIV/HCV共感染患者(40例)、HIV感染者(40例)和健康人(20例)外周血CD_8^+T淋巴细胞表面CD_(28)、CD_(38)分子的表达,分析HIV/HCV共感染者CD_(28)、CD_(38)分子在T淋巴细胞亚群的表达特征;按照CD4^+T数值对HIV/HCV共感染者进行分组,分析不同CD4^+T水平CD_8^+CD_(28)^+、CD_8^+CD_(38)^+的表达差异,探讨CD_8^+T淋巴细胞CD_(28)、CD_(38)分子与疾病进展的相关性。结果与健康人群及HIV感染者比较,HIV/HCV共感染者CD_8^+CD_(38)^+T细胞的绝对计数与百分比明显升高,CD_8^+CD_(28)^+T细胞百分比明显降低;随着CD4^+T水平的降低,CD_8^+CD_(28)^+T有逐渐降低趋势,CD_8^+CD_(38)^+T有逐渐升高趋势。结论 HIV/HCV共感染者CD_8^+T淋巴细胞表面CD_(28)分子表达降低,CD_(38)分子表达升高,且这种变化与患者CD4^+T水平密切相关,可作为判断疾病进展的重要指标。

慢性HIV-1感染者CD8^(+)T细胞活化和耗竭水平与病程的相关性研究

目的:探讨HIV-1感染过程中CD8^(+)T细胞CD38、HLA-DR和T细胞上共抑制受体程序性死亡受体1(PD-1)表达水平与免疫活化和耗竭的相关性。方法:收集HIV-1感染者123例,其中未接受抗病毒治疗者96例,根据CD4^(+)T细胞计数分为低CD4^(+)T细胞计数组(<350个/μL,53例)、中CD4^(+)T细胞计数组(>350~499个/μL,21例)和高CD4^(+)T细胞计数组(≥500个/μL,22例)。同期选取健康志愿者30例作为健康对照组。采用流式细胞术检测HIV-1感染者CD8^(+)T细胞CD38、HLA-DR和PD-1表达水平,并分析不同指标表达的相关性。结果:与健康对照组相比,慢性HIV-1感染者CD8^(+)T细胞CD38、HLA-DR、PD-1的表达显著升高(P<0.05);CD38^(+)HLA-DR+CD8^(+)T细胞PD-1的表达显著升高(P<0.05);未治疗HIV-1感染者CD8^(+)T细胞PD-1的表达与CD4^(+)T细胞计数呈负相关关系(P<0.05);CD38^(+)HLA-DR+CD8^(+)T细胞PD-1的表达与CD4^(+)T细胞计数负相关关系(P<0.05)。结论:在慢性HIV-1感染过程中,CD8^(+)T细胞PD-1的表达上调,CD8^(+)T细胞的耗竭可能与免疫细胞过度活化有关。