微粒体谷胱甘肽S-转移酶1在恶性肿瘤中的研究进展

微粒体谷胱甘肽S-转移酶1(microsomal glutathione S-transferase 1,MGST1)是谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)超家族和花生四烯酸与谷胱甘肽代谢中的膜相关蛋白(membrane-associated proteins in eicosanoid and glutathione metabolism,MAPEG)超家族的共同成员,它通过催化外源性物质的II相解毒过程,从而保护细胞膜免受氧化应激的损伤。众多研究发现MGST1与恶性肿瘤的发生发展密切相关,有望成为癌症治疗的新型分子靶点。本文就MGST1在恶性肿瘤中的研究进展予以综述。

槲皮素对B型烟粉虱羧酸酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响

采用人工饲料添加法,研究植物防御性次生物质槲皮素对B型烟粉虱Bemisiatabaci(Gennadius)成虫主要解毒酶系羧酸酯酶(CarE)和谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)影响的剂量效应和时间效应。用低剂量槲皮素(0.01%,wv)处理B型烟粉虱成虫24h后,其羧酸酯酶(CarE)和谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)比活力分别为51.09mOD(min·头)和2.249OD(mgpro.min),是对照的1.233倍和2.20倍;而高剂量的槲皮素对2种解毒酶没有诱导增加作用,甚至还有抑制作用。低剂量的槲皮素短时间处理烟粉虱后,可诱导2种酶活性增加,谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)在0.005%的槲皮素处理30min后,比活力值达到8.454OD(mgpro·min),为对照的8.30倍。

条斑紫菜Mu型谷胱甘肽S-转移酶基因克隆与分析

谷胱甘肽S-转移酶是动植物重要的解毒酶,分布广泛,类型众多。本研究利用生物信息学方法和RT-PCR技术获得了条斑紫菜一条新谷胱甘肽S-转移酶(PyGST2)基因的cDNA序列,该基因含有完整的开放阅读框,并且受到铅胁迫的诱导表达。PyGST2蛋白具有谷胱甘肽S-转移酶家族的保守结构域和保守氨基酸残基,与Mu型谷胱甘肽S-转移酶的序列一致性最高,与Alpha、Sigma和Pi型谷胱甘肽S-转移酶的次之,在进化树上远离高等植物的各型谷胱甘肽S-转移酶,而与动物的Mu型谷胱甘肽S-转移酶聚为一支。该Mu型谷胱甘肽S-转移酶的克隆为后续研究条斑紫菜抗逆机制奠定了基础。

山新杨谷胱甘肽S-转移酶编码基因PdbGSTU功能分析

【目的】本研究旨在通过分析山新杨谷胱甘肽S-转移酶编码基因PdbGSTU的抗病功能,为林木抗性育种提供基因资源与抗性种质。【方法】克隆PdbGSTU基因序列并对其进行生物信息学分析,利用荧光定量PCR技术分析该基因的组织特异性表达及植物激素诱导下的表达模式。利用转基因技术获得山新杨的过/抑制表达PdbGSTU基因植株,通过观察比较接种细链格孢菌后各植株叶片的表型和病斑面积,验证该基因的抗病功能;同时测定接种病原菌前后,野生型和转基因山新杨植株内过氧化氢含量和抗氧化相关酶活性。【结果】(1)山新杨PdbGSTU基因开放阅读框全长753 bp,编码氨基酸250个,对应的蛋白质相对分子质量为29.01 kDa,为稳定的酸性亲水蛋白,定位于细胞质中;系统进化分析显示,PdbGSTU蛋白与银中杨的蛋白KAJ6918316亲缘关系最近;启动子序列分析显示,PdbGSTU基因启动子序列含多种响应植物激素和逆境胁迫的顺式作用元件。(2)RT-qPCR结果显示,PdbGSTU基因在山新杨顶芽表达量最高,在其根部表达量最低,且该基因受茉莉酸甲酯、水杨酸和1-氨基环丙基-1-羧酸3种植物激素诱导,均上调表达。(3)接种细链格孢菌后,野生型和抑制表达PdbGSTU基因植株的叶片上,病斑面积分别为6.42和16.46 mm2,而过表达PdbGSTU基因的植株叶片上,少部分接种点出现明显病斑,其余接种部分仅出现褪色。【结论】PdbGSTU正向参与山新杨对细链格孢菌侵染的抵御过程,可通过清除活性氧提高杨树对病原菌的抗性。

日本沼虾mu型可溶性谷胱甘肽S-转移酶的克隆与表达

利用简并引物从日本沼虾肝脏克隆mu型sGST基因cDNA核心片段获得其sGST氨基酸序列。序列分析表明日本沼虾肝脏mu型sGST基因cDNA核心序列长299bp,编码99个氨基酸。日本沼虾sGST与南美白对虾(Litopenaeus vannamei)、小鼠(Mus musculus)、大鼠(Rattus norvegicus)、肩突硬蜱(Ixodes scapu-laris)、扇头蜱(Rhipicephalus appendiculatus)、热带爪蟾(Xenopus tropicalis)、微小牛蜱(Rhipicephalus micro-plus)和太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)的mu型sGST基因核苷酸同源性为60%左右,表明所克隆的日本沼虾sGST亦属于mu型sGST。通过对日本沼虾活体浸泡MC-LR,发现微囊藻毒素对日本沼虾肝脏mu型sGST基因表达没有显著的诱导作用。

典型光活化毒素α-三噻吩对棉铃虫和亚洲玉米螟谷胱甘肽S-转移酶的影响

研究了典型光活化毒素α-三噻吩(简称α-T)对棉铃虫Helicoverpaarmigera和亚洲玉米螟Ostriniafurnacalis谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)的影响。结果表明:近紫外光照(300～400nm)对棉铃虫和亚洲玉米螟幼虫GSTs活性无显著影响,但两种昆虫GSTs对α-T的反应不同。无光照条件下,α-T对亚洲玉米螟离体GSTs活性没有影响,而高浓度α-T能抑制棉铃虫离体GSTs活性;高剂量α-T可使两种昆虫活体GSTs活性升高。光照条件下,高浓度和高剂量α-T抑制棉铃虫GSTs活性,而不影响亚洲玉米螟离体GSTs活性,但低剂量α-T抑制其活体活性,而高剂量α-T则诱导其活性增加。棉铃虫和亚洲玉米螟GSTs对α-T反应的差异,可能与它们对药剂的敏感性以及药剂在两者体内的穿透、运转、贮藏、代谢等生理特性上的差异有关。

藏红花红O对家兔谷胱甘肽S-转移酶亚型活性的影响

目的 :观察藏红花红O对家兔血清、尿谷胱甘肽S 转移酶 (GST)及亚型α、μ、π活性的影响。方法 :家兔静脉注射藏红花红O建立肾损模型 ,采用紫外分光光度法连续动态测定血中GST及其亚型α、μ、π活性。同时与尿GST亚型活性及血尿素氮 (BUN)水平进行比较。结果 :血清、尿GST均于给药 6h后开始升高 ,12h升至最高。血GST π也于给药 6h后升高 ,9h升至最高 ,达正常对照的 3.5倍 (P <0 .0 5 )。尿GST π、尿GST α与其改变基本一致。血清及尿GST μ均无明显改变。血BUN于 15h开始升高 ,此后持续升高并维持在高水平上 ,且与GST改变无相关性。结论 :藏红花红O肾损家兔血清及尿GST及其不同亚型水平的改变 ,提示GST可作为早期诊断肾功能受损的指标 。

肝细胞癌乙型肝炎病毒感染与人胎盘型谷胱甘肽S-转移酶的表达

背景与目的:许多肿瘤癌变过程中人胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(glutathioneS-transferases,GST-π)的表达会异常升高,其变化早于细胞的形态改变。探讨肝细胞癌乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)感染与GST-π表达的关系。方法:对肝细胞癌和相关慢性肝病及正常肝组织共86例用免疫组化染色方法检测乙型肝炎表面抗原(hepatitisBsurfaceantigen,HBsAg)、乙型肝炎核心抗原(hepatitisBcoreantigen,HBcAg)和GST-π,用原位分子杂交方法检测乙型肝炎病毒DNA(hepatitisBvirusDNA,HBVDNA)。结果:HBsAg,HBcAg和HBVDNA的阳性率在慢性肝炎分别为61.9%(13/21);42.9%(9/21)和75.0%(12/16);在肝硬化分别为64.0%(16/25),36.0%(9/25)和83.3%(15/18);在癌旁肝硬化分别为72.7%(16/22),61.1%(11/18)和85.7%(12/14);在肝细胞癌分别为45.2%(14/31),50.0%(14/28)和64.3%(9/14)。其中以癌旁肝硬化组阳性率最高。慢性肝炎、肝硬化和癌旁肝硬化HBVDNA阳性信号较肝细胞癌多而强。GST-π在慢性肝炎(25.0%,4/16)、肝硬化(17.6%,3/17)、癌旁肝硬化(53.3%,8/15)和肝细胞癌(60.0%,9/15)均有表达,但癌旁肝硬化组和肝细胞癌组阳性率明显增高,癌旁肝硬化组与不伴肝癌的肝硬化组差异有显著性(P<0.05),与肝细胞癌组差异无显著性(P>0.05)。结论:大多?

五氯苯酚对淡水双壳类背角无齿蚌ρ型谷胱甘肽S-转移酶表达的影响

谷胱甘肽S-转移酶(GST)在机体抗击氧化应激中发挥重要作用。前期研究表明,五氯苯酚(PCP)处理对背角无齿蚌(Anodonta woodiana)具有显著的氧化应激和急性毒性效应。为了探讨PCP慢性毒性效应,本研究将背角无齿蚌随机分为对照组和PCP处理组,PCP处理组和对照组分别用13.9 mg·L^-1和相同体积二甲亚砜处理;同时,克隆出ρ型谷胱甘肽S-转移酶并命名为ρ-GST,分析PCP对ρ-GST表达的影响。ρ-GST全长cDNA包含一个57 bp的5’端非编码区,291 bp的3’端非编码区和678 bp的开放阅读框。ρ-GST在背角无齿蚌斧足、外套膜、闭壳肌、心脏、肝胰腺、血淋巴和鳃中广泛表达。与对照组相比,PCP处理后肝胰腺ρ-GST mRNA在第1天、第3天和第15天分别增加18.18%、82.88%(P<0.05)和2.43倍(P<0.01);PCP处理后鳃中ρ-GST mRNA水平增加1.44倍以上(P<0.05);PCP处理后血淋巴中ρ-GST mRNA水平显著上调。背角无齿蚌ρ-GST表达水平上调有助于对抗PCP处理所产生的应激效应,提高动物环境耐受能力。

胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶和DNA拓朴酶在人骨肉瘤中的表达及其与预后的关系

目的 探讨骨肉瘤组织中胎盘型谷胱甘肽 S 转移酶 (GST π)和DNA拓朴酶Ⅱ (TopoⅡ )的表达及其与预后的关系。方法 应用免疫组化SP法检测GST π、TopoⅡ在 40例骨肉瘤中的表达 ,并结合临床资料分析其对预后的影响。结果 40例骨肉瘤中GST π和TopoⅡ的阳性表达率分别为 82 5 % (3 3 40 )和 5 2 5 % (2 1 40 ) ,其中术前化疗组TopoⅡ阳性表达率为 3 8 5 % (5 13 ) ,显著低于术前无化疗组 77 8% (2 1 2 7) (P <0 0 5 ) ,GST π的阳性表达率在两组间无显著差异 ;GST π和TopoⅡ的阳性表达率与患者的预后显著相关。结论 GST π主要参与骨肉瘤原发性耐药 ,TopoⅡ不仅参与骨肉瘤原发性耐药 ,同时也参与骨肉瘤继发性耐药 ;GST π和TopoⅡ是影响骨肉瘤预后的重要因素 ,可能成为评估骨肉瘤预后的有价值的指标。

胎盘型谷胱甘肽S-转移酶研究新进展

主要介绍了近年来关于胎盘型谷胱甘肽S-转移酶的生化特性、基因结构和调节、在癌及癌前病变中的表达以及与肿瘤细胞耐药性关系研究的新进展。

胎盘型谷胱甘肽S-转移酶在人乙型肝炎肝硬化肝癌中的表达及其意义

应用抗胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(GST-π)单克隆抗体,PAP免疫组化染色,对肝癌、肝硬化及乙型肝炎进行了研究。42例肝癌(包括肝细胞型肝癌和胆管型肝癌),GST-π阳性率为85.7%,乙型肝炎和肝硬化阳性率分别为30%,65%。高分化肝细胞癌和胆管型肝癌全部呈阳性表达,而低分化肝细胞癌呈阴性表达。正常肝组织GST-π仅在部分胆管上皮呈弱阳性表达。结果提示:GST-π可能是高分化肝细胞型肝癌和胆管型肝癌的标志酶,GST-π用来鉴别低分化肝细胞癌和胆管型肝癌可能有一定价值。

3种不同食性淡水鱼类谷胱甘肽S-转移酶Pi、Mu、Theta型cDNA序列的克隆分析及表达

鱼类谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferase，GST）是鱼类一种重要的Ⅱ相去毒酶，在催化毒素与还原谷胱甘肽（GSH）加合去毒代谢过程中具有关键作用。采用RT-PCR及RACE法，分离、克隆得到草鱼、尼罗罗非鱼pi、mu、theta型GST（GSTpi、GSTmu、GSTtheta）基因、鲢鱼GSTmu、GSTtheta基因的cDNA部分序列并推测各自对应的氨基酸序列。氨基酸序列同源性比较和系统进化分析均表明，鲢鱼、草鱼、尼罗罗非鱼与鱼类GST同源性较高，与哺乳类、鸟类、两栖类GST同源性较低，可能与鱼类GST基因在水环境毒素去毒代谢中承担的特殊功能有关。而不同种鱼类GSTtheta的同源性明显要较GSTpi、GSTmu的同源性低，可能与不同淡水鱼类食性及对毒素耐受性不同有关。用实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测三种鱼肝脏中三型GST基因组成型表达水平，发现三种鱼各型之间皆有一定差异，尼罗罗非鱼肝脏整体GSTs基因表达很低，GSTtheta显著低于草鱼（P〈0．05），GSTmu显著低于鲢鱼（P〈0．05）。本研究为从分子水平上研究不同型谷胱甘肽S-转移酶基因在不同食性淡水鱼类体内代谢去毒过程中的作用提供了基础。

增殖细胞核抗原、胎盘型谷胱甘肽S-转移酶在肝细胞癌及癌周组织中的表达

目的探讨增生结节与肝细胞癌发生的关系。方法应用免疫组织化学方法，分别检测７０例肝细胞癌及癌周组织中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，以及７７例肝细胞癌和癌周组织中胎盘型谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴπ）的表达。结果ＰＣＮＡ和ＧＳＴπ在肝细胞癌中的阳性表达率显著高于癌周组织，且ＰＣＮＡ与肝细胞癌Ｅｄｍｏｎｄｓｏｎ分级密切相关；癌周组织中，增生结节ＰＣＮＡ和ＧＳＴπ阳性表达显著高于肝硬变及正常组织。结论ＧＳＴπ可作为肝细胞癌前病变的标志酶；增生结节可能为肝细胞癌的癌前病变。

联苯胺接触人群中谷胱甘肽S-转移酶基因型的多态性分布

为了探讨与膀胱癌发生危险有关的谷胱甘肽S -转移酶 (GSTs)M 1和T1基因型的多态性在有联苯胺接触的膀胱癌高危人群中的分布状况 ,对上海市染料化工行业的联苯胺接触人群与上海市某制造行业的健康对照人群作各种基因型构成比的比较 ,在接触人群中进行工种和工龄的职业因素分层分析。结果表明 ,接触人群中T10 / 0型、M 10 / 0型、和T10 / 0 -M10 / 0型的构成比均高于对照人群 ,在T10 / 0 -M10 / 0型的构成比上出现统计学意义 (OR =1 5 8,χ2 =5 41)。职业因素分层分析未发现显著的趋势或差异。结果中 ,职业性膀胱癌高危人群中GSTs 0 / 0基因型的构成比向高比例方向移动可以理解。但研究中该人群虽是一个特殊职业人群 ,可从根本上说仍应属于健康人群 ,而健康人群中GSTs 0 / 0基因型的构成比会产生漂移 ,在过去的研究中尚未见过。联苯胺的接触强度和接触程度未影响整个接触人群GSTs 0 / 0基因型的构成比漂移的基本情况 。

吸烟人群细胞色素P4501A1和谷胱甘肽-S-转移酶M1的基因型

采用分子流行病学的方法 ,研究吸烟人群细胞色素 P450 1 A1基因 (CYP1 A1 )和谷胱甘肽 - S-转移酶 M1基因 (GST M1 )的多态性特征 .吸烟人群与同性别及同年龄 (年龄 <2周岁 )健康人群一对一配对 .提取血液基因组 DNA. PCR扩增 CYP 1 A1Exon7位点片段和 GST M1部分片段 .限制性酶切片段长度多态性 (RELP)分析 P450 1 A1片段和GST M1片段多态性特点 .结果显示吸烟组人群中CYP 1 A1 Exon 7Val/Val型 (mm型 )人群数增高 ,并有统计学差异 .吸烟组人群中 :GST M1缺失人群数略有升高 ;CYP1 A1 wm型人群数略有升高 ;CYP 1 A1 wm型 +mm型人群数略有升高 。

山新杨谷胱甘肽S-转移酶PdbGST基因的克隆与胁迫表达分析

在植物中,谷胱甘肽S-转移酶是一类多功能酶,能够在其响应非生物胁迫中发挥作用。为研究该基因在杨树中的功能,本研究克隆了山新杨谷胱甘肽S-转移酶基因Pdb GST及其启动子序列,对其进行生物信息学分析和表达特征分析。结果显示,Pdb GST基因的开放阅读框(ORF)全长666 bp,编码221个氨基酸,其形成的蛋白质相对分子质量为25.57 k Da,为稳定亲水性酸性蛋白,定位于细胞质中。系统进化分析表明,山新杨Pdb GST蛋白与山新杨中的XP_034926648蛋白的同源性最高。对克隆获取的2 000 bp启动子序列进行分析,结构显示该启动子序列中,含有多种响应非生物胁迫的顺式作用元件。荧光定量PCR分析显示Pdb GST基因在山新杨根部表达量最高,其次在山新杨叶部也有较高表达量,相反在山新杨顶芽中表达量最低。此外,对Pdb GST基因响应非生物胁迫分析显示,山新杨根部Pdb GST基因受诱导后即出现持续且大量的表达。

胎盘型谷胱甘肽S-转移酶在人肝癌及癌旁组织的表达

①目的探讨胎盘型谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴπ）在肝癌及癌旁组织的表达及意义。②方法应用抗人ＧＳＴπ多克隆抗体，以ＬＳＡＢ免疫组织化学方法检测７７例肝细胞癌及癌旁组织中ＧＳＴπ的表达。③结果７７例肝细胞癌中，ＧＳＴπ阳性表达率为８９．６％；癌旁组织中，增生结节ＧＳＴπ阳性表达率为７１．１％（２７／３８），肝硬化组织为２２．９％（８／３５）；肝癌及增生结节中ＧＳＴπ阳性表达率显著高于肝硬化组织（χ２＝４４．９，１６．９；Ｐ＜０．００１）；且肝癌与增生结节两组间ＧＳＴπ阳性表达率亦有显著性差异（χ２＝６．３５，Ｐ＜０．０２）。ＧＳＴπ表达与Ｅｄｍｏｎｄｓｏｎ组织分级无关（χ２＝１．９６，Ｐ＞０．２５）。④结论ＧＳＴπ可作为肝细胞癌及癌前病变的标志酶。

血清谷胱甘肽-S-转移酶在慢性乙型肝炎临床疗效观察中的价值

目的 探讨慢性乙型病毒性肝炎血清GSTs表达与干扰素抗病毒治疗的关系.方法 35例符合干扰素治疗指征的慢性乙型肝炎患者,分别给予干扰素α-2b（IFNα-2b）300万单位治疗12周,化学比色法测定患者血清谷胱甘肽-S-转移酶（gultathione S transferases,GSTs）水平,核酸杂交-酶联免疫吸附法测定乙肝病毒基因分型.结果 在IFNα-2b治疗应答组患者,治疗前谷胱甘肽-S-转移酶活性显著高于无应答组（P〈0.05）,且治疗后基本上能够恢复到健康对照组的水平（P〉0.05）,而无应答组患者谷胱甘肽-S-转移酶活性活性仍显著低于健康对照组（P〈0.05）.结论 在慢性乙型肝炎患者,治疗前血清GSTs水平与干扰素抗病毒疗效相关.

胎盘型谷胱甘肽S-转移酶在人胃癌、大肠癌及肾癌细胞中异常表达的免疫电镜定位

用抗胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(GST-π)抗体和胶体金免疫电镜方法进行了3例胃癌、2例大肠癌、1例肾癌和6例癌旁组织细胞内GST-π的定位,实验结果,胃癌、大肠癌细胞中GST-π胶体金颗粒主要分布于癌细胞的线粒体、粗面内质网及核内(常染色质内分布为主),而在肾癌细胞中GST-π胶体金颗粒分布于溶酶体和核(异染色质内分布为主),但是在癌旁组织中,除1例结肠癌的癌旁组织腺上皮细胞胞浆内GST-π胶体金颗粒阳性外,其余5例均为阴性。因此,我们认为GST-π在胃癌、大肠癌及肾癌细胞的超微结构中异常表达反映出GST-π在这些癌细胞内处于应激状态。