目的原核表达纯化幽门螺杆菌σ^(54)蛋白,并制备σ^(54)蛋白的多克隆抗体。方法以幽门螺杆菌26695基因组为模板扩增完整的rpo N基因片段,并将其克隆到含有His标签编码序列的原核表达载体p Tri ExTM-4上,将重组质粒转化大肠杆菌JM109DE...目的原核表达纯化幽门螺杆菌σ^(54)蛋白,并制备σ^(54)蛋白的多克隆抗体。方法以幽门螺杆菌26695基因组为模板扩增完整的rpo N基因片段,并将其克隆到含有His标签编码序列的原核表达载体p Tri ExTM-4上,将重组质粒转化大肠杆菌JM109DE感受态细胞,在IPTG诱导下表达带有His标签的融合蛋白,利用His-Bind亲和柱进行蛋白的纯化,将纯化的蛋白辅以佐剂免疫家兔,制备σ^(54)蛋白的多克隆抗体。结果σ^(54)蛋白在大肠杆菌JM109DE菌株中有较高表达,纯化后进行SDS-PAGE获得了与预期融合蛋白大小一致的单一条带。获得的σ^(54)蛋白多克隆抗体具有较好的σ^(54)蛋白结合性和特异性。结论成功表达和纯化了σ^(54)蛋白并制备了多克隆抗体。展开更多
文摘目的原核表达纯化幽门螺杆菌σ^(54)蛋白,并制备σ^(54)蛋白的多克隆抗体。方法以幽门螺杆菌26695基因组为模板扩增完整的rpo N基因片段,并将其克隆到含有His标签编码序列的原核表达载体p Tri ExTM-4上,将重组质粒转化大肠杆菌JM109DE感受态细胞,在IPTG诱导下表达带有His标签的融合蛋白,利用His-Bind亲和柱进行蛋白的纯化,将纯化的蛋白辅以佐剂免疫家兔,制备σ^(54)蛋白的多克隆抗体。结果σ^(54)蛋白在大肠杆菌JM109DE菌株中有较高表达,纯化后进行SDS-PAGE获得了与预期融合蛋白大小一致的单一条带。获得的σ^(54)蛋白多克隆抗体具有较好的σ^(54)蛋白结合性和特异性。结论成功表达和纯化了σ^(54)蛋白并制备了多克隆抗体。
