固定化脂肪酶ANL-MARE催化酸解合成1-油酸-2-棕榈酸-3-亚油酸甘油三酯

1-油酸-2-棕榈酸-3-亚油酸甘油三酯(OPL)是人乳中主要的脂质组成,为满足婴幼儿配方食品母乳化需求,该试验探究了新型固定化脂肪酶ANL-MARE催化制备OPL的方法。试验成功制备和表征了固定化酶ANLMARE,并以ANL-MARE为生物催化剂,建立了一种用三棕榈酸甘油三酯(PPP)、油酸(OA)和亚油酸(LA)高效酶催化制备富含OPL结构脂的方法。经单因素和响应面试验优化,获得OPL最优合成工艺为:PPP与总脂肪酸的摩尔比1:14.27,OA与LA摩尔比为1:0.76,脂肪酶添加量12.70%,反应温度50℃,反应4 h,此条件下产物中OPL相对含量为47.93%,2位棕榈酸(sn-2 PA)占总棕榈酸(PA)的质量分数(sn-2 PA相对含量)为71.69%。此外,固定化酶ANL-MARE与商业脂肪酶相比,表现出较好的催化合成OPL的活性。综上所述,固定化酶ANL-MARE具有催化制备OPL结构脂的重大潜力,为人乳脂替代脂的高效制备提供了新策略和理论基础。

三氯甲烷在ω-3脂肪酸甘油三酯细菌内毒素检查法中可行性探讨

目的:建立ω-3脂肪酸甘油三酯细菌内毒素检查方法。方法:将ω-3脂肪酸甘油三酯溶解于三氯甲烷,再加水漩涡振荡混匀,取上层制备供试品溶液;进行方法干扰试验的同时考察内毒素的回收率。结果:采用三氯甲烷溶解ω-3脂肪酸甘油三酯,再用水振荡萃取的方法制备供试品溶液,对细菌内毒素检查法无干扰作用。该方法的回收率在70%～84%之间,符合检测要求。结论:用三氯甲烷溶解脂溶性的该样品,然后加水制备细菌内毒素检查用供试品溶液是可行的,方法重复性和可操作性较好。其限度拟订为0.1 EU·mg^(-1)。

高效液相色谱法测定婴幼儿配方奶粉中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯

建立了婴幼儿配方乳粉中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(1,3-dioleyl-2-palmitoyl-glycerol,OPO)的检测方法。样品经氨水水解,用有机溶剂提取脂肪,氨基固相萃取柱净化,使用银离子色谱柱分离,以0.55%乙腈-正己烷为流动相洗脱,用高效液相色谱-蒸发光散射检测器检测。该方法实现了OPO和1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油三酯的基线分离,可对OPO进行准确定性定量分析;方法在25~500μg/mL质量浓度范围内线性关系良好,决定系数R2=0.999 6,检出限和定量限分别为0.30、0.90 g/kg,加标含量为1~96 g/kg的范围内,OPO的平均回收率在97.1%~104.2%之间,相对标准偏差为1.2%~2.9%,精密度和正确度等方法学指标均符合要求;还通过了实验室间的协同性验证。调查分析了我国39份市售OPO强化婴幼儿配方奶粉,OPO含量仅为标签标示量的28.4%~59.7%,这主要是因为检测方法不一致。

母乳中1,3-二不饱和脂肪酸-2-棕榈酸甘油三酯的组成及其功能特性研究进展

1,3-二不饱和脂肪酸-2-棕榈酸甘油三酯(UPU)是指甘油骨架的sn-1、sn-3位连接不饱和脂肪酸、sn-2位连接棕榈酸的一类甘油三酯的总称,其在母乳脂肪中含量最高,可为婴儿提供更加均衡的脂肪酸和甘油三酯,对婴儿生长发育有特殊的生理功能。为对开发新型母乳结构脂肪提供理论支持,系统介绍了不同国家、地区母乳脂肪中3种sn-2棕榈酸甘油三酯UPU、UPS、SPS的含量,我国成熟期母乳中UPU的组成和含量,从降低婴儿粪便硬度、促进脂肪和矿物质吸收、保护肠道健康,提供更多种类、比例更稳定均衡的脂肪酸等方面,论述了UPU的功能作用及其消化和吸收特性,另外对比了市售营养强化剂OPO与母乳中UPU组成的差异,通过分析提出LC-MS方法更适合婴儿配方奶粉中OPO含量的测定。

甘油三酯-葡萄糖指数与非肥胖型非酒精性脂肪性肝病的相关性

目的探究甘油三酯-葡萄糖指数(TyG)与非肥胖型非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的相关性及诊断预测价值。方法收集2020年5月~2023年12月于我院健康体检体质量指数(BMI)<25 kg/m^(2)的非肥胖者,根据上腹部彩超结果分为健康对照组与NAFLD组。采用限制性立方样条(RCS)探索TyG与非肥胖型NAFLD之间非线性关系,采用LASSO回归进行变量筛选,多因素Logistic回归探究TyG与非肥胖型NAFLD风险之间相关性。受试者工作特征(ROC)曲线评估TyG对非肥胖型NAFLD的诊断预测价值,并进行敏感性分析。结果最终纳入3723例非肥胖型体检者,其中NAFLD患者432例,患病率为11.6%。与健康对照组相比,非肥胖型NAFLD患者中收缩压、舒张压、总胆固醇、甘油三酯、LDL-C、血尿酸、空腹血糖与TyG指数升高,HDLC降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归结果显示,在充分校正混杂因素后,TyG每增加1个单位,非肥胖型NAFLD风险增加约2.22倍(OR=3.22,95%CI:2.53-4.12,P<0.001)。与最低四分位Q1组相比,TyG指数Q2、Q3、Q4组的NAFLD患病风险将分别增加1.52倍(OR=2.52,95%CI:1.20-5.95)、3.56倍(OR=4.56,95%CI:2.28-10.46)与8.66倍(OR=9.66,95%CI:4.83-22.18)。RCS曲线显示TyG指数与非肥胖型NAFLD风险显著相关,两者间呈近似线性关系(非线性检验P=0.019)。ROC曲线下面积为0.819,敏感性为78.0%,特异性为71.2%,具有较好的预测诊断价值。结论TyG指数与非肥胖型NAFLD发生风险显著相关,可作为健康体检人群中脂肪肝早期筛查指标。

Candida sp.99-125脂肪酶催化猪油酸解合成1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯

人乳脂是一种在甘油骨架Sn-2位上富含棕榈酸(C16∶0)的结构酯。经分析可知,猪油中棕榈酸主要分布在甘油酯的Sn-2位,可作为制备1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(OPO)的原料。以Candida sp.99-125脂肪酶作催化剂,以猪油和油酸为原料,通过正交试验对无溶剂体系中酸解合成OPO的工艺条件进行研究,得到最适反应条件:猪油与油酸的质量比为1∶2.0,酶用量为总底物质量的10%,反应温度40℃,反应时间4 h。在该反应条件下,经酸解合成的产物三甘酯中,Sn-2C16∶0的含量大于70%,占总脂肪酸中棕榈酸含量的93%以上,并含有43%以上的OPO。

气相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中的1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯

目的建立气相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(1,3-dioleyl-2-palmitoyl-glycerol,OPO)的方法。方法样品通过碱式水解处理,提取脂肪后,采用甘油三酯专用气相色谱柱进行分离,并使用氢火焰离子化检测器进行检测,结果采用外标法定量。结果OPO在0.02~1.00mg/m L质量浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数(r^(2))为0.999。检出限与定量限分别为0.119 g/100 g和0.664 g/100 g,回收率为99.1%~100.1%,相对标准偏差小于5%。应用此方法对我国市售的36批次OPO强化婴幼儿配方乳粉进行检测,OPO含量为2.39~4.89 g/100 g,占标签标示值的60.7%~102.1%。这主要因为本方法检测的是OPO含量,而标签标示的是碳数为C52的甘油三酯的量。结论该方法成功实现了OPO与其他碳数为C52、饱和度不同的甘油三酯的气相色谱法基线分离,可对OPO单体进行精确的定性和定量分析,适用于婴幼儿配方乳粉中OPO的检测。

α-亚麻酸对产蛋鸡胆固醇、甘油三酯含量和脂肪酸组成的影响

采用单因素试验设计,研究了日粮中,添加α-亚麻酸00、.5%、1.0%、2.0%、3.0%和4.0%对海兰褐产蛋鸡饲喂4周后蛋黄、卵泡和肝脏中甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)以及蛋黄脂肪酸(FA)的影响。结果表明:蛋黄中亚油酸、亚麻酸、EPA和DHA的含量与日粮中α-亚麻酸添加量呈显著直线或二次曲线增加(P<0.10);蛋黄、各种卵泡中TC均与日粮中α-亚麻酸添加量显著直线或二次曲线降低(P<0.10);蛋黄、卵泡和肝脏的TG以及肝脏的TC与ALA之间的线性和二次曲线降低均不显著(P>0.10)。可见日粮中添加α-亚麻酸能降低胆固醇,提高鸡蛋中PUFA的含量。

食用油脂中3-MCPD脂肪酸酯和缩水甘油脂肪酸酯分析方法研究进展

随着对油脂中3–MCPD脂肪酸酯(ME)和缩水甘油脂肪酸酯(GE)研究和检测技术的不断更新,在精炼棕榈油中发现了ME存在,且在大多数食用油脂中发现了GE存在。ME和GE作为两类食用油脂加工过程中产生的污染物,对人体可能存在致癌性。目前对ME和GE的检测有直接方法和间接方法 2种,直接方法主要是对油样处理或不处理后直接用LC–MS、LC–MS/MS、LC–TOF–MS、GC–MS等进行检测;间接方法是将ME和GE醇解为3–MCPD和缩水甘油酯,苯硼酸或七氟丁酰咪唑衍生化后用GC–MS或GC–MS/MS检测。该文对现有的ME和GE检测方法的样品处理过程、仪器条件、结果等加以比较和分析探讨。

PNPLA3基因高表达对非酒精性脂肪性肝病模型细胞增殖和甘油三酯的影响

目的探讨patatin样磷脂酶域3(PNPLA3)高表达对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型细胞增殖和甘油三酯(TG)的影响。方法将人肝癌细胞(SMMC-7721细胞)分为对照组、模型组、PNPLA3过表达组、PNPLA3过表达空载组。模型组:经游离脂肪酸诱导建立NAFLD细胞模型,PNPLA3过表达组、PNPLA3过表达空载组:在造模后经慢病毒原液感染、嘌呤霉素筛选获得。用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)、MTT比色法和TG测试技术检测细胞中PNPLA3表达情况、细胞存活率和胞内TG含量。结果qRT-PCR结果显示,模型组PNPLA3基因的表达量高于对照组(P<0.01),PNPLA3过表达组PNPLA3基因表达量高于模型组(P<0.01)。MTT结果显示,模型组细胞相对存活率高于对照组(P<0.05),PNPLA3过表达组细胞相对存活率高于模型组(P<0.01)。TG检测结果显示:模型组TG含量高于对照组(P<0.01),PNPLA3过表达组中胞内TG含量高于模型组(P<0.05)。结论成功构建PNPLA3过表达NAFLD稳转株,PNPLA3的过量表达有助于细胞脂质堆积并增强细胞相对存活率。

中链脂肪酸对高甘油三酯血症合并不同水平HDL-C患者体重和体脂的影响

目的探讨中链脂肪酸食用油对高甘油三酯血症合并不同水平高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)患者体重和体脂的影响。方法将112例高甘油三酯血症患者随机分为中长链脂肪酸(MLCT)食用油组和长链脂肪酸(LCT)食用油组,并指导每日运动量、能量和食用油摄入量(25-30g/d),分别在研究开始及8周后进行人体测量、人体成分分析、腹部脐水平CT扫描测定,组内以HDL-C水平(<1.04mmol/L、1.1-1.55mmol/L、≥1.55mmol/L)分为三层,比较上述指标差异。结果 8周后MLCT组(不同HDL-C水平)与研究前比较均能够显著降低体重和体脂(P<0.05),而LCT组(不同HDL-C水平)无统计学差异;8周后MLCT组与LCT组相比:HDL-C<1.04mmol/L患者除腹部脂肪面积差值P<0.05,其他指标无统计学意义;HDL-C 1.04-1.54mmol/L患者体重差值、BMI差值、腹部脂肪面积差值均P<0.05,其他指标无统计学意义;HDL-C≥1.55mmol/L者体重差值、BMI差值、腰围差值、腰臀比差值、体内脂肪重差值、体内脂肪百分比差值、腹部脂肪面积差值、腹腔内脂肪面积差值均P<0.05。结论合理食用MLCT食用油可以降低高甘油三酯血症合并不同水平HDL-C患者的体重和体脂,其中HDL-C水平正常或较高的高甘油三酯血症患者体重和体脂降低程度更明显。

牛乳脂肪甘油三酯中sn-2位脂肪酸组成的分析

用胰脂酶专一水解掉牛乳脂肪甘油三酯sn-1和sn-3位置上的脂肪酸得到sn-2单甘油酯和游离脂肪酸,再通过高效液相-蒸发光散射检测法分离出sn-2位单甘油酯,甲酯化后,用GC-MS对sn-2脂肪酸组成进行分析。结果表明石家庄地区夏季牛乳脂肪sn-2位脂肪酸主要有六种,分别为:月桂酸2.57%、豆蔻酸7.68%、棕榈酸34.74%、亚油酸11.56%、油酸22.53%、硬酯酸15.21%。

HPLC-ELSD与GC-MS法测定牛乳甘油三酯sn-2位脂肪酸组成

研究建立了快速、准确测定牛乳脂肪甘油三酯sn-2位脂肪酸组成的方法.利用胰脂酶专一水解甘油三酯sn-1和sn-3位置上的脂肪酸得到sn-2单甘油酯和游离脂肪酸,再通过蒸发光散射高效液相色谱分离出sn-2位单甘油酯,然后对其进行衍生,用气相色谱质谱联用仪对sn-2脂肪酸组成进行分析.结果显示用蒸发光散射高效液相色谱法分离sn-2位单甘油酯时方法的回收率达到83.3%～85.1%,该法省去了传统测定中费时费力的薄层色谱分离步骤.用气相色谱质谱联用法对产物进行分析,精密度高,结果可靠.分析结果表明,牛乳脂肪sn-2位脂肪酸由2.57%月桂酸、7.68%豆蔻酸、34.74%棕榈酸、11.56%亚油酸、22.53%油酸和15.21%硬酯酸组成.

服用ω-3多不饱和脂肪酸浓缩剂一年可降低应用辛伐他汀而持续有高甘油三酯血症冠心病患者的甘油三酯

有人报道ω-3脂肪酸(例如存在于鱼油者)可延长心肌梗死生存者的寿命.此种脂肪酸能降低血清甘油三酯,但是至今在检验其对冠脉疾病终点的试验所用的剂量,对降低甘油三酯的效应极低.

婴幼儿配方奶粉中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的测定

[目的]建立气相色谱检测婴幼儿配方奶粉中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的含量。[方法]婴幼儿配方奶粉样品经温水溶解、氨水皂化、乙醚石油醚提取油脂,正己烷溶解,采用Agilent DB-1HT毛细管柱分离,通过与标准甘油三酯溶液对比确定出峰位置,采用内标法定量。[结果]方法定量限为0.008 mg/100 g,线性范围良好。低、中、高3个标准添加水平的回收率为81.1%~98.4%,相对标准偏差在2.89%~7.88%。对婴幼儿配方羊奶粉、牛奶粉基质样品中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的含量测定RSD≤3.03%。[结论]该方法操作过程简单、分析周期短、灵敏度高、重复性好,适用于测定婴幼儿配方牛奶粉、婴幼儿配方羊奶粉中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的含量,具有理想的定量效果及应用前景。

新型固定化Aspergillus oryzae脂肪酶催化合成1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯

旨在评价自制固定化sn-1,3专一性脂肪酶Aspergillus oryzae L03(AOL)替代商业固定化脂肪酶酸解法合成1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(1,3-dioleoyl-2-palmitoylglycerol,OPO)的可行性。以棕榈硬脂和油酸为原料,在正己烷体系中,得到AOL最适反应参数为:反应温度55℃,反应时间1 h,棕榈硬脂和油酸的底物摩尔比为1∶8,正己烷与底物混合物质量比1∶6,AOL水分含量3.5%(w/w)。该条件下,OPO含量44.9%,三棕榈酸甘油酯(PPP)含量为3.23%,sn-2位棕榈酸占所有棕榈酸比例为68.86%,符合国家标准。同时,AOL和LipozymeRM IM、LipozymeTL IM两种商品酶对比,AOL的催化速率最快,1 h达到最大OPO生产峰值。经过8次循环使用,AOL具有良好的操作稳定性。研究表明,自制的新型廉价固定化酶AOL具有良好的应用前景。

甘油三酯-葡萄糖乘积指数与动脉硬化进展的回顾性队列研究

目的:胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)与动脉硬化和不良心血管病事件均存在密切关联。甘油三酯-葡萄糖(triglyceride-glucose,TyG)指数可作为评估IR的有效指标。本研究旨在探讨Ty G指数与动脉硬化进展风险的关系。方法:本研究为回顾性队列研究。选取2012年1月至2022年12月在中南大学湘雅三医院健康管理医学中心参加健康体检次数≥2且完成动脉硬化检测的成年人作为研究对象,收集其临床资料。TyG指数采用公式ln(甘油三酯×空腹血糖/2)计算。基线TyG指数分别以连续变量和四分位数的分类变量为自变量评价。动脉硬化进展采用臂踝脉搏波传导速度(brachial-ankle pulse wave velocity,baPWV)的年变化速率和新发动脉僵硬度增加为因变量评价。通过线性回归模型和Cox比例风险回归模型,探索TyG指数是否为动脉硬化进展的独立风险因素。根据年龄、性别、体重指数,以及是否合并2型糖尿病、高血压和高脂血症进行亚组分析,以确定TyG指数和动脉硬化进展之间的关联特征。结果:共纳入4971名研究对象,随访时间为(3.01±1.98)年。随访期间,baPWV的年变化速率为(24.94±81.15)cm/s,共计278例为新发动脉僵硬度增加。在全面校正混杂因素后,自变量为连续变量时,基线Ty G指数与baPWV的年变化速率(β=17.5,95%CI 9.00~25.94,P<0.001)和新发动脉僵硬度增加[风险比(hazard ratio,HR)=1.43,95%CI 1.18~1.74,P<0.001]呈独立正相关。自变量为分类变量时,与第1四分位数组相比,第2、3、4四分位数组的baPWV年变化速率依次增加,新发动脉僵硬度增加的风险也依次增高(均P<0.05)。年龄≥45岁、男性、BMI<28 kg/m2、高血压病、无高血压病、无2型糖尿病和无高脂血症亚组中,基线TyG指数(连续和分类变量)与新发动脉僵硬度增加具有明显关联(均P<0.05),各亚组均不存在显著的交互作用(均P>0.05)。结论:TyG指数与动脉硬化进展风险增加独立相关,可用作体检人群动脉硬化进展风险的评估指标。

酶法醇解-气相色谱法分析中长碳链甘油三酯sn-2脂肪酸

建立了一种测定中长碳链甘油三酯sn-2脂肪酸的分析方法。将中长碳链甘油三酯利用Novozym435酶法醇解得到2-单甘酯,采用BSTFA-TMCS(体积比99∶1)硅烷化衍生后通过气相色谱仪分析测定sn-2脂肪酸。最优测定条件为:200 mg油脂样品,脂肪酶添加量88 mg,反应温度30℃,反应时间2 h,硅烷化试剂添加量200μL,HP-5MS毛细管气相色谱柱(60 m×0.25 mm×0.25μm),柱温从100℃以5℃/min升温至180℃,再以1℃/min升温至230℃,再以5℃/min升温至300℃。该方法用于分析中长碳链甘油三酯样品准确可靠,重复性良好,RSD小于1.5%,分析长链甘油三酯样品时,结果与猪胰脂肪酶法、Novozym435法结果一致,RSD均小于5%。

分子蒸馏脱除美藤果油游离脂肪酸及其对3-氯丙醇酯和缩水甘油酯的影响

目的研究采用分子蒸馏技术脱酸处理后对美藤果油中3-氯丙醇酯(3-chloropropanolesters,3-MCPDE)和缩水甘油酯(glycidyl esters, GEs)的影响。方法在蒸馏温度、进料速率、刮膜转速等单因素实验的基础上,对美藤果油分子蒸馏脱酸工艺进行正交实验优化。结果最佳工艺条件为:蒸馏温度270℃,刮膜转速120 r/min,进料速率10 mL/min。在最优条件下美藤果油的酸价由4.7 mg/g降至1.1 mg/g,脱酸效果明显。结论分子蒸馏脱酸工艺在脱酸的同时还可以有效的脱除油中的3-氯丙醇酯和缩水甘油酯,可以为特色小品种油脂脱酸以及脱除油脂中3-氯丙醇酯和缩水甘油酯的工艺提供参考。

分子蒸馏脱除玉米油中3-氯丙醇脂肪酸酯和缩水甘油酯效果的研究

研究了分子蒸馏法脱除玉米油中3-氯丙醇脂肪酸酯(3-MCPDE)和缩水甘油酯(GE)的效果。结果表明:蒸馏温度和进油速度是影响3-MCPDE脱除效果的显著因素;在进油速度160mL/h、刮膜速率240 r/min的条件下,玉米油中3-MCPDE的含量随着蒸馏温度的升高而降低,当蒸馏温度达到230℃时,玉米油中3-MCPDE的含量即可从2. 90 mg/kg降低到0. 82 mg/kg,脱除效率达到71. 7%;在蒸馏温度210℃、刮膜速率240 r/min的条件下,玉米油中3-MCPDE的含量随着进油速度的减缓而降低,3-MCPDE的脱除效率在15. 9%~60. 3%之间;在蒸馏温度210℃、进油速度160 mL/h的条件下,刮膜速率的改变对玉米油中3-MCPDE的含量影响不显著。在所有实验中,分子蒸馏可以使玉米油中的GE含量从4. 73 mg/kg均降至0. 5 mg/kg以下,脱除效率均超过91. 8%。