酶法富集分离ω-3PUFAs的研究进展

多元不饱和脂肪酸(ω-3PUFAs)是具有多种生理活性的功能因子,对人体健康有重要作用。由于ω-3PUFAs大多来源于深海鱼油或藻类油脂,含量远不能达到营养品甚至药用的要求,有效富集ω-3PUFAs已成为近年来的研究热点。文章综述了利用脂肪酶选择性催化进行ω-3PUFAs富集的有关研究进展,对酶促油脂选择性水解反应,选择性转酯反应和选择性酯化反应以及不同方法组合进行ω-3PUFAs富集的反应机理以及应用进行了综述,进而对酶法生产高含量ω-3PUFAs的应用前景进行了展望。

不同ω-3PUFAs组成对高脂诱导的C57BL/6J小鼠脂质代谢作用

研究以C57BL/6J小鼠为实验对象,以高脂饲料组为对照组(CG组),用不同组成的ω-3PUFA(ALA、DHA、DHA:EPA=2:1、DHA:EPA=1:1、DHA:EPA=1:2)对其进行干预,观察ω-3PUFA对高脂诱导的C57BL/6J小鼠脂质代谢作用。观察小鼠生长状况,并与CG组相比,ω-3PUFA干预组体重均有非常显著下降(P<0.01),实验末CG组平均体重最大为29.75g,DHA组最小仅有25.59g。与CG组相比,ω-3PUFA各干预组血清中TC显著下降(P<0.05),TG、LDL-C均有不同程度下降,HDL-C则有所升高,均有非常显著差异(P<0.01);干预效果ALA组最佳,在各不同比率DHA/EPA干预组中DHA效果最佳。结果表明,DHA对体重控制效果最佳;对高脂诱导的C57BL/6J小鼠脂质代谢的干预效果ALA组最佳,在各不同比率DHA/EPA干预组中DHA效果最佳。

ω-3PUFAs对LPS诱导急性肺损伤大鼠前炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的影响

目的分析ω-3PUFAs对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠(acute lung injury,ALI)TNF-α、IL-1β和IL-6分泌的影响。方法 60只Sprague-Dawley幼年大鼠按随机数字分为Control组(生理盐水+生理盐水)、LPS组(生理盐水+脂多糖)和Omega(10%脂肪乳尤文+脂多糖)组。各组分别采用生理盐水或尤文脂肪乳剂处理7d;并均在取标本前8h时于气管内滴入生理盐水或脂多糖,建立ALI大鼠模型;观察各组大鼠肺组织的病理改变,测定肺泡灌洗液TNF-α、IL-1β、IL-6的表达。结果 1)ALI模型组大鼠肺组织病理切片均可见明显炎症细胞浸润和出血;2)ALI模型组肺系数、病理评分均高于Control组(P均<0.05);3)BALF中Omega组TNF-α、IL-1β和IL-6蛋白水平低于LPS组,差异具有统计学意义(P均<0.05)。结论ω-3PUFAs能够通过降低TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌而减轻ALI大鼠炎症反应,减轻肺部损伤。

ω-3PUFAs对精神分裂症模型大鼠认知功能的影响

目的探讨ω-3PUFAs对MK-801诱导的精神分裂症（sz）大鼠认知功能损伤的拮抗作用及其机制。方法使用MK-801诱导大鼠精神分裂症模型；通过Morris水迷宫检测大鼠认知功能变化；应用Brdu染色检测大鼠海马新生神经元数量；通过Westonblot检测大鼠海马CREB、p-CREB、BDNF、TrkB、p-TrkB水平。结果MK-801引起大鼠精神分裂症样的认知功能障碍[水迷宫逃避潜伏期Ctr组为（6．51±3．10）s，Mod组为（15．27±6．20）s；穿过平台次数Ctr组（4．63±1．06）次，Mod组（2．00±1．15）次]、海马新生神经元数目减少（单位面积新生神经元数目相对水平Mod／Ctr为0．656±0．066）以及CREB／BDNF／TrkB通路损伤（灰度值相对水平Mod／Ctr：CREB为0．393±0．065，p-CREB为0．591±0．015。BDNF为0．716±0．115，TrkB为0．787±0．029，p-TrkB为0．586±0．013）；ω-3PUFAs通过增加CREB和TrkB水平及其磷酸化修饰、上调其活性而改善CREB／BDNF／TrkB通路（灰度值相对水平Pre／Ctr：CREB为1．139±0．111，p-CREB为0．845±0．243，BDNF为0．864±0．133，TrkB为0．916±0．022，p-TrkB为0．952±0．047）、恢复海马神经元数目（单位面积新生神经元数目相对水平Pre／Ctr为1．183±0．101），从而减轻精神分裂症大鼠认知功能障碍[水迷宫逃避潜伏期Pre组为（7．44±4．55）s；穿过平台次数Pre组为（3．86±1．68）次]。结论ω-3PUFAs可缓解MK-801造成的精神分裂症样认知功能损伤。

ω-3 PUFAs在调节结直肠癌发生发展中的研究进展

ω-3多不饱和脂肪酸是一类具有生物活性的多不饱和脂肪酸,对结直肠癌发生发展具有抑制作用。ω-3多不饱和脂肪酸首先改变膜流动性影响细胞功能,其次影响细胞信号转导通路中重要蛋白的活性并且调节肿瘤微环境中炎症介质和免疫细胞的功能和活性,另外改变肿瘤转移过程中的几种重要分子,从抑制细胞过度增殖,促进凋亡,提高抗肿瘤免疫和抑制肿瘤转移几个方面对结直肠癌起抑制作用。

ω-3 PUFAs在新生儿胎粪吸入综合征治疗中的临床疗效观察以及其对免疫功能及细胞因子的影响

目的:分析ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFA)在新生儿胎粪吸入综合征(MAS)治疗中的临床疗效。方法:选取我院MAS患儿50例(2017年5月-2019年1月),脂肪酸类型不同分为ω-3 PUFA组(n=25)与ω-6 PUFAs组(n=25)。ω-6 PUFAs组实施ω-6多不饱和脂肪酸(ω-6 PUFAs)营养支持,ω-3 PUFA组实施ω-3 PUFA营养支持。对比2组疗效、多脏器功能障碍综合征(MODS)发生率、治疗前后免疫功能[CD4/CD8、白细胞(WBC)计数]及细胞因子[核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)]水平。结果:ω-3 PUFA组显著好转率高于ω-6 PUFAs组(P<0.05);ω-3 PUFA组治疗14天后血清WBC计数较ω-6 PUFAs组少,CD4/CD8较ω-6 PUFAs组高(P<0.05);ω-3 PUFA组治疗14天后血清TNF-α、IL-1β、NF-κB水平较ω-6 PUFAs组低(P<0.05);2组MODS发生率对比无显著差异(P>0.05)。结论:ω-3PUFAs治疗MAS,疗效显著,能有效调节免疫功能,抑制炎性因子释放,且MODS少,安全性高。

ω-3PUFA在蛋黄中的富集效应及对蛋品质的影响

试验共设4个组,对照组含3%菜油,试验组分别含2%菜油+1%鱼油、1%菜油+2%鱼油和3%鱼油,研究日粮不同水平ω-3PUFA在蛋黄中的富集效应及对蛋品质的影响。各试验组ω-3PUFA在蛋黄中的沉积量随鱼油添加时间延长而显著提高(P<0.01),第8周ALA、EPA和DHA沉积量分别达到2.96%、3.2%和2.9%,以2%鱼油添加组升高幅度最大。蛋黄中TC含量下降,第8周各组蛋黄中胆固醇含量比第2周分别降低2.30%、4.38%、1.24%和1.88%,同期各组内差异不显著。各试验组蛋黄TG含量变化不大,MDA含量均不同程度有所提高。此外,添加鱼油提高了蛋壳强度和蛋壳厚度,蛋重下降。

富ω-3PUFA鸭蛋生产中抗氧化剂的筛选与应用

在鱼油为-ω3PUFA源的商品绍鸭日粮中,分别添加不同种类抗氧化剂维生素E(50 mg.kg-1)、二氢吡啶(200 mg.kg-1)及其复合型,研究其对绍鸭产蛋性能和蛋品质的影响。结果表明,在-ω3PUFA日粮中添加不同单一型抗氧化剂维生素E、二氢吡啶及其复合型,对蛋鸭产蛋性能及蛋的常规蛋品质无显著影响;添加不同单一型抗氧化剂维生素E、二氢吡啶及其复合型,均能显著提高蛋黄中DHA、EPA、ALA的沉积量,且以维生素E的脂质保护效果最优。研究表明,在高-ω3PUFA日粮中定量添加二氢吡啶,可显著降低蛋黄中胆固醇和脂质过氧化物的含量,提高鸭蛋的安全性。综合本次试验,运用鱼油日粮定向生产富-ω3PUFA营养蛋,单一型维生素E的脂质抗氧化保护效果优于二氢吡啶及其复合添加型。

日粮ω-6/ω-3 PUFA比例对生长期扬州鹅肉品质的影响

本试验旨在研究多不饱和脂肪酸比例对扬州鹅生长阶段肉品质的影响。在饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸1∶1∶1的前提下,通过调节日粮中不同的ω-6/ω-3多不饱和脂肪酸比例,设置3∶1、6∶1、9∶1、12∶1四组进行扬州鹅饲养试验。结果表明:(1)ω-6/ω-3比例对雏鹅的不同生长阶段腿肌的嫩度、42日龄滴水损失均无显著差异性影响(P>0.05);(2)56日龄时12∶1组腿肌pH值显著高于比例为3∶1(P<0.05),12∶1的胸肌pH值显著高于3∶1组(P<0.05),而在此日龄内其他比例间及其他日龄不同比例间均无显著差异性(P>0.05);(3)在42日龄时12∶1组肌肉失水率显著高于9∶1和3∶1,在70日龄时12∶1显著高于3∶1(P<0.05)。结论:ω-6/ω-3PUFA比例对不同生长阶段扬州鹅肌肉品质有一定的影响,以12∶1组各阶段肌肉pH值和失水率较高,但对肌肉嫩度的影响不大。

PLIN2调控宁乡猪原代肾成纤维细胞ω-3 PUFA组成的研究

为研究PLIN2基因对中国本土猪宁乡猪长链omega-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFA)的调控作用,利用CRISPR/Cas9技术敲除宁乡猪原代肾成纤维细胞PLIN2基因,获得PLIN2纯合敲除细胞系,检测其脂肪酸含量及组成变化。结果显示:与野生型细胞相比,PLIN2^(-/-)细胞的多不饱和脂肪酸总含量增加55.92%,ω-3 PUFA含量增加112.02%,多不饱和脂肪酸含量在总脂肪酸中的占比由27.78%增加至34.40%。因此,PLIN2基因对宁乡猪原代肾成纤维细胞多不饱和脂肪酸和ω-3PUFA的形成具有正向调控作用。本研究为揭示PLIN2调控脂肪酸的分子机理提供了重要参考,并为猪肉品质改良的生物育种提供了候选靶点。

ω-3多不饱和脂肪酸对运动疲劳大鼠心肌细胞代谢、抗氧化能力及血清IL-4、IL-6、INF-γ的影响

探讨了ω-3PUFAs对大鼠心肌细胞代谢及血清T-SOD、MDA、血乳酸、LDH、IL-4、IL-6、INF-γ干预作用。将SD大鼠分为安静对照(Rc)组、运动对照(Mc)组、低剂量ω-3PUFAs灌胃(G1)组、中剂量ω-3PUFAs灌胃(G2)组和高剂量ω-PUFAs灌胃(G3)组。对SD大鼠进行8周递增负荷跑台运动复合ω-3PUFAs干预实验。结果表明:实验组大鼠心肌细胞高能磷酸化合物含量高于Mc组;实验组血清T-SOD活力呈现上升趋势;实验组MDA含量呈现下降趋势,G1组与Mc组比较具有显著差异(P<0.05),G2、G3组与Mc组比较具有极显著差异(P<0.01);实验组血乳酸水平呈现下降趋势,G1、G2组与Mc组比较具有显著差异(P<0.05),G3组与Mc组比较具有极显著差异(P<0.01);实验组LDH含量呈现上升现象,且LDH含量与ω-3PUFAs剂量呈正相关;实验组大鼠血清IL-4、IL-6、INF-γ水平低于Mc组。不同剂量ω-3PUFAs对大鼠心肌细胞代谢、抗氧化能力及血清IL-4、IL-6、INF-γ具有干预作用。

日粮ω-6/ω-3PUFA比例对生长鹅免疫器官指数的影响

本研究以扬州鹅为试验对象,初步探讨不同比例ω-6/ω-3PUFA日粮对鹅免疫器官(胸腺、法氏囊、脾脏)生长发育的影响。选择160羽同一批出雏、体质健壮、体重接近的3周龄扬州鹅苗,随机分成四组,分别饲喂ω-6/ω-3PUFA比例为3∶1、6∶1、9∶1、12∶1的日粮,在42、56、70日龄分别进行屠宰和免疫器官的分离、称重。试验结果表明:不同比例的ω-6/ω-3PUFA日粮对扬州鹅各生长阶段免疫器官的重量和指数有不同影响,其中ω-6/ω-3PUFA比例为6∶1组42日龄的胸腺指数高于其他比例组(P<0.05),法氏囊指数也高于其他组;56、70日龄的胸腺、法氏囊、脾脏等指数以3∶1组较高;而各阶段扬州鹅的胸腺、法氏囊、脾脏等指数在9∶1和12∶1组间均无显著差异(P>0.05)。结论:日粮ω-6/ω-3PUFA比例在6∶1时可显著促进42日龄前扬州鹅免疫器官的发育,而3∶1的比例对42日龄后免疫器官的影响较为明显。

ω-3多不饱和脂肪酸免疫调控作用的研究进展

本文总结了ω-3多不饱和脂肪酸调控机体免疫功能及其对信号通路的影响,揭示其作用机理,同时对其在饲料中的应用进行了总结和展望。

日粮不同水平ω-3多不饱和脂肪酸对蛋鸡脂质代谢和免疫功能的影响

试验共设4个组,对照组日粮含3%菜油,试验组分别为基础日粮含2%菜油+1%鱼油、1%菜油+2%鱼油和3%鱼油,研究不同水平ω-3多不饱和脂肪酸(-ω3PUFA)对蛋鸡机体脂质代谢、过氧化作用和免疫功能的影响。结果显示,与对照组相比,各试验组血清TC含量分别提高0.24%(P>0.05)、1.86%(P>0.05)和3.55%(P<0.05);2%和3%鱼油添加组TG含量分别降低12.52%(P>0.05)和51.18%(P<0.05);各试验组HDL-C含量分别提高55.70%、70.89%和36.71%(P>0.05);LDL-C含量分别降低20.02%、21.79%和9.07%(P>0.05);各试验组血清MDA含量和SOD活力均较对照组有所降低(P>0.05);肝脏MDA含量升高(P>0.05);1%、2%鱼油添加组肝脏SOD活力分别提高27.36%和31.24%(P>0.05)。-ω3PUFA降低了腹脂HSL活性(P>0.05),腹脂率以3%鱼油添加组为最高,较对照组提高52.96%(P<0.05)。血清IgGI、gAI、gM、C3、C4以3%鱼油添加组为最高,分别比对照组提高19.70%(P<0.05)、40.56%(P>0.05)、35.66%(P>0.05)、30.32%(P>0.05)和30.34%(P>0.05)。研究表明,-ω3PUFA可以影响机体脂类代谢,提高机体免疫功能,但同时伴随脂质过氧化物合成增加。综合各项指标,日粮中以2%鱼油添加量为宜。

ω-3多不饱和脂肪酸对严重多发伤患者早期炎症反应及预后的影响

目的研究ω—3多不饱和脂肪酸（ω-3PUFA）对严重多发伤患者早期炎症反应及预后的影响。方法2010—05—2010—11我院创伤外科收治的严重多发伤患者36例，所有患者损伤严重度评分（injuryseveritySCOre，ISS）≥16分，随机分为对照组（n=18）和试验组（ω-3PUFA组，n=18），分别于营养支持1、3、5、7d后，采用ELISA法量子点和免疫荧光标记技术分别测定两组患者外周血TNF-α、IL-2、IL-6、COX-2和单核细胞NF-κB的表达水平。记录SIRS发生率、MOF发生率、ICU停留时间、总住院时间和死亡率，进行组间比较。结果在营养支持第5、7天后，两组患者之间的炎症反应水平和预后差异具有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05），与对照组相比，试验组患者的机体炎症反应水平明显降低、免疫功能得到改善。试验组患者的预后要优于对照组。结论ω-3多不饱和脂肪酸能降低严重多发伤患者外周血相关炎症因子的表达，能够有效调节机体炎症反应和免疫功能，从而抑制创伤患者过度的炎症反应，改善其预后。

添加脂肪酸钙对肉羊生产性能和肌肉ω-3系列脂肪酸含量的影响

为了研究在肉羊日粮中添加亚麻油脂肪酸钙和鱼油脂肪酸钙后对羊肉中ω-3系列脂肪酸(ω-3PUFA)含量的影响,试验采用单因素分组设计方法,将健康、体重相近[(30.2±2.2)kg]的无角道赛特(♂)×小尾寒羊(♀)杂交一代公羊15只随机分为3组,每组5只(全部单栏饲养),1组为对照组,饲喂基础日粮;2,3组为试验组,分别在日粮中添加40 g/d亚麻油脂肪酸钙和鱼油脂肪酸钙,进行为期30 d的饲养试验。结果表明:亚麻油脂肪酸钙能显著提高羊肉中的α-亚麻酸(ALA)含量(P<0.05),也能显著提高羊肉中的二十碳五烯酸(EPA)含量(P<0.05),使二十二碳六烯酸(DHA)含量略有提高(P>0.05);鱼油脂肪酸钙显著提高了肉中ALA、EPA和DHA含量(P<0.05);添加2种脂肪酸钙均可显著提高肉中ω-3 PUFA的总量(P<0.05);添加2种脂肪酸钙组羊的平均日增重、饲料报酬也得到了显著改善(P<0.05)。

ω-6/ω-3多不饱和脂肪酸比例对生长期扬州鹅血脂代谢及冠脉事件预测因子的影响

本文旨在初步探讨不同ω-6/ω-3多不饱和脂肪酸(PUFA)比例对扬州鹅血脂、血清超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,HsCRP)及可溶性CD40配体(sCD40L)的影响。试验选择160只同批出雏、体重接近的21日龄的扬州鹅,随机分成4组,每组4个重复,每个重复10只。分别饲喂ω-6/ω-3 PUFA比例为3∶1、6∶1、9∶1、12∶1的饲粮,并分别于42、56、70日龄时进行采血和血脂等指标的测定。结果表明:56、70日龄时,ω-6/ω-3 PUFA比例为6∶1组扬州鹅的血清中有较低的总甘油三酯(TG)(P<0.05)、总胆固醇(TC)(P<0.05)和低密度脂蛋白(LDL)(P<0.05),且该组的高密度脂蛋白(HDL)在4组中最高(P<0.05)。HsCRP或sCD40L水平总体上随ω-6/ω-3 PUFA比例的增加呈现上升趋势,基本都以3∶1组最低,但各处理间的差异多不显著(P>0.05)。综上所述,ω-6/ω-3 PUFA比例为6∶1组有较好的降低血脂的效应,而低ω-6/ω-3 PUFA比例(3∶1)饲粮有降低扬州鹅HsCRP和sCD40L的趋势。

饲粮ω-6/ω-3多不饱和脂肪酸比例对生长期扬州鹅外周血中白细胞亚群组成的影响

本试验旨在研究饲粮ω-6/ω-3多不饱和脂肪酸(PUFA)比例对生长期扬州鹅外周血中白细胞亚群组成的影响。选择160只健康的21日龄扬州鹅,随机分成4组[每组4个重复,每个重复10只鹅(公母各占1/2)],分别饲喂ω-6/ω-3 PUFA比例为12?1、9?1、6?1、3?1的试验饲粮,饲养至42、56、70日龄时采血制作血涂片并进行白细胞分类计数。结果表明:与12?1和9?1组相比,在各检测日龄时,6?1和3?1组的淋巴细胞百分比极显著升高(P<0.01),而异嗜性粒细胞百分比和异嗜性粒细胞/淋巴细胞比例则显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。42和70日龄时,3?1组单核细胞百分比显著高于12?1组(P<0.05)。此外,与12?1和9?1组相比,6?1和3?1组56和70日龄的嗜酸性粒细胞百分比以及各检测日龄的嗜碱性粒细胞百分比显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。由此得出,饲粮ω-6/ω-3 PUFA比例影响生长期扬州鹅外周血中白细胞亚群的组成,较低的ω-6/ω-3 PUFA比例(6?1或3?1)可降低外周血嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞百分比和异嗜性粒细胞/淋巴细胞比例,提高单核细胞百分比。

气相色谱法测定ω-3营养强化鸡蛋蛋黄中ALA、EPA和DHA含量

建立了一种气相色谱法快速、准确测定ω-3营养强化鸡蛋蛋黄中ALA、EPA和DHA含量的方法。样品经过乙酰氯甲醇甲酯化处理,采用气相色谱法测定,Agilent DB-FastFAME色谱柱分离脂肪酸甲酯,以十一烷酸甘油三酯为内标物进行定量。结果表明:鸡蛋蛋黄中ω-3 PUFA和内标物分离效果良好;ALA甲酯、EPA甲酯和DHA甲酯的色谱峰面积与其质量浓度呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99;样品的加标回收率为87.2%~101.1%,相对标准偏差为1.1%~2.6%。该方法操作方便、快速准确,适合批量测定ω-3营养强化鸡蛋蛋黄中ω-3 PUFA的含量。

ω-3多不饱和脂肪酸对鸡脂肪沉积的调控机制及添加策略的研究进展

ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFAs),特别是二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)对畜禽脂肪代谢的调控被广泛研究。在禁抗背景下,ω-3 PUFAs作为一种抑制脂肪沉积的饲料添加剂发展潜力巨大。文章综述ω-3 PUFAs的来源及其在体内的代谢以及ω-3 PUFAs对鸡早期脂肪组织发育、基因的转录与转录后调控等途径抑制脂肪沉积的可能机制,并讨论其添加策略,旨在为ω-3 PUFAs在畜禽生产中的应用提供参考。