麻疯树叶绿体ω3脂肪酸脱饱和酶基因的克隆和鉴定(英文)

根据几个已知的植物ω3脂肪酸脱饱和酶基因序列,利用RT-PCR和RACE技术从麻疯树中克隆了一条编码叶绿体ω3脂肪酸脱饱和酶的cDNA序列.对该序列的分析表明,该cDNA的编码区长1368bp,编码一个长度为455个氨基酸的蛋白质,推测的蛋白质相对分子质量(Mr)大小为52.1×103.同源分析显示,推测的氨基酸序列与其他植物叶绿体脂肪酸脱饱和酶具有很高的相似性.RT-PCR分析表明,该基因在麻疯树叶片中有着稳定的表达.此外,还通过酵母表达系统鉴定了该基因编码的酶的功能.对转基因酵母的脂肪酸组成分析发现,α亚麻酸在转基因酵母中积累.上述结果表明,该麻疯树cDNA编码了一个叶绿体ω3脂肪酸脱饱和酶.

红花ω3脂肪酸脱氢酶基因的分离及结构分析

采用RT—PCR和RACE（rapidamplificationofcDNAends）技术，从红花叶片中分离到2个质体类（1）3脂肪酸脱氢酶基因（CtFAD7和CtFAD8）的全长cDNA和1个微体类∞3脂肪酸脱氢酶基因（CtFAD3）的部分序列。将其在NCBI中进行序列比对，结果显示均与其他植物质体和微体‘1）3脂肪酸脱氢酶基因具有较高的相似性。氨基酸序列分析表明红花CtFAD3、CtFAD7和CtFAD8均含有3个富含组氨酸的保守结构域，分别为HDCGH、HXXXXXHRTHH和HVIHH，其中CtFAD7和CtFAD8的N-端分别含有56和27个氨基酸残基的质体信号肽序列。疏水性和跨膜分析表明，3个红花ω3脂肪酸脱氢酶氨基酸序列均包含4个疏水区域，分别跨膜1～3次。蛋白质二级结构预测结果表明，3个ω3脂肪酸脱氢酶蛋白主要由α螺旋和β折叠组成。通过对cDNA和DNA序列比较发现，CtFAD7和CtFAD8的DNA序列中均包含有7个内含子和8个外显子。各内含子的碱基序列和长度在物种间表现出丰富的多态性，在内含子出现的位置，均为该基因的保守区；而从第2#到7#外显子的长度和序列相似性在物种问非常保守。推测∞3脂肪酸脱氢酶基因的内含子对于保证基因在物种进化过程中功能的保守性起着关键作用。

ω3脂肪酸对脓毒症大鼠骨骼肌蛋白酶体活性的作用机制

目的探讨ω3脂肪酸对脓毒症大鼠骨骼肌蛋白酶体活性的作用机制。方法 30只SD大鼠随机分为5组:空白组、模型组、假手术组、常规TPN组和ω3脂肪酸组。模型组采用盲肠结扎穿刺术复制脓毒症模型,假手术组仅翻动盲肠,不做结扎处理。实验期间大鼠禁食不禁水,ω3脂肪酸组给予加用ω3脂肪酸的肠外制剂,TPN组未加用ω3脂肪酸外,其余成分相同。其余3组仅给予生理盐水肠外注射。在模型复制前5d即开始连续给予相应治疗。分别于造模第16和24小时检测20S蛋白酶体活性及不同亚基C2和C8亚基的活性。结果 16小时点各组伸趾长肌的20S蛋白酶体活性:空白组与假手术组间差异无显著性(P>0.05)。与空白组相比,模型组的20S蛋白酶体活性明显增加(P<0.05)。与模型组比较,TPN组活性下降,但差异无显著性(P>0.05);而ω3脂肪酸组的20S蛋白酶体活性显著下降(P<0.05)。24小时点的20S蛋白酶体活性比较:模型组、TPN组和ω3脂肪酸组的20S蛋白酶体活性均比空白组明显增加(P<0.05),3组间比较差异无显著性(P>0.05)。16小时点各组伸趾长肌的C2亚基mRNA表达水平比较:空白组与假手术组间比较差异无显著性(P>0.05)。与空白组相比,模型组的C2mRNA表达明显增加(P<0.05)。与模型组比较,TPN组C2基因转录水平下调,但差异无显著性(P>0.05);ω3脂肪酸组的C2亚基基因转录水平明显下降(P<0.05)。24小时点的各组大鼠伸趾长肌C2亚基基因转录水平变化趋势与16小时点一致。16小时点的空白组与假手术组大鼠伸趾长肌C8mRNA表达均差异无显著性(P>0.05)。与空白组相比,模型组的C8mRNA表达明显增加(P<0.05)。与模型组比较,TPN组和ω3脂肪酸组的C8基因转录水平均没有显著下降(P>0.05)。24小时点的各组大鼠伸趾长肌C8亚基基因转录水平变化趋势与16小时点一致。结论ω3脂肪酸能够降低脓毒症大鼠骨骼肌内20S蛋白酶体活性及C2亚基活性,但对16及24小时点C8亚基的基因转录水平无影响。

ω3脂肪酸对脓毒症大鼠胰岛素敏感性影响的实验研究

目的探讨ω3脂肪酸对脓毒症胰岛素敏感性的作用。方法 30只SD大鼠随机分5组,即空白组、假手术组、模型组、ω3脂肪酸组和TPN(Total Parenteral Nutrition,TPN)组。空白组不做处理,模型组采用盲肠结扎穿刺(CLP)方法复制脓毒症模型,假手术组仅翻动盲肠,不做结扎处理,ω3脂肪酸组是加用ω3脂肪酸的肠外制剂,采用尾静脉注射给药,TPN组常规肠外制剂组。空白组、假手术组和模型组仅给予生理盐水尾静脉注射。试验期间,大鼠禁食不禁水。连续给予各组相应治疗6 d后,与第7 d 8:00对模型组、ω3脂肪酸组和TPN组进行动物造模,并继续观察16 h。常规测定各组大鼠治疗前后的体质量、空腹血糖和治疗后各组大鼠的空腹血清胰岛素水平,计算胰岛素敏感指数(ISI)。结果与空白组比较,模型组的空腹血糖和空腹胰岛素水平明显增加,ISI升高明显(P<0.05)。与模型组相比,ω3脂肪酸组的空腹血糖、空腹胰岛素水平均下降明显(P<0.05),ISI下降明显(P<0.05)。结论ω3脂肪酸能显著降低脓毒症大鼠胰岛素抵抗,增加胰岛素敏感性。

缺刻缘绿藻ω3脂肪酸去饱和酶基因的特性及在氮饥饿过程中相对转录量的分析

根据莱茵衣藻和普通小球藻ω3脂肪酸去饱和酶氨基酸序列(GenBank登录号分别为ABL09485和BAB78717)的保守区(TMFWALF和HHDIGTH)设计简并引物,以缺刻缘绿藻H4301总RNA为模板,通过反转录PCR和cDNA末端快速克隆技术(RACE),克隆了缺刻缘绿藻ω3脂肪酸去饱和酶基因的cDNA全长序列(GenBank登录号:EU658930),它与莱茵衣藻的这个基因具有69%相似性。该基因cDNA序列长2330bp,其中5'-非翻译区长107bp;3'-非翻译区912bp,且具有明显的poly(A)尾巴;开放阅读框1311bp,编码一个436个氨基酸的蛋白质,分子量为49.06ku,等电点7.85;该基因编码的蛋白为膜结合蛋白,含有2个疏水区域和3个保守的组氨酸簇基序。将该基因的cDNA序列与其DNA序列比对后,发现该基因在其编码区存在6个内含子,剪切位点均符合"GT-AG"规则。实时荧光定量PCR结果显示,在氮饥饿培养过程中,缺刻缘绿藻ω3脂肪酸去饱和酶基因的相对转录量在4h时可能因休克显著提高(P<0.05),然后开始下调,12h开始显著下降(P<0.05),并在20h降到最低(约为完全培养基的11.6%),此后保持在低水平(为完全培养基的23.2%)波动(P<0.01)。脂肪酸组分的气相色谱结果表明,在氮饥饿培养过程中,花生四烯酸占总脂肪酸的百分含量逐步提高,而作为多不饱和脂肪酸ω3合成途径的产物,如α-亚麻酸和十六碳三烯酸(16∶3ω3)的百分含量在40h或96h后都显著降低(P<0.05)。这些结果表明缺刻缘绿藻ω3脂肪酸去饱和酶基因在氮饥饿过程中的相对低转录量,导致ω3合成途径相关产物百分含量的降低,确保了该藻沿着ω6途径来合成与积累花生四烯酸以提高其百分含量。另外,十六碳二烯酸(16∶2ω6)、亚油酸及花生四烯酸都可能是该克隆基因所编码ω3脂肪酸去饱和酶的反应底物。

ω3脂肪酸防治心源性猝死的争议

ω3脂肪酸对健康人群有预测心源性猝死的价值,服用ω3脂肪酸能减少心源性猝死的发生率,但其对某些疾病如充血性心力衰竭病人心源性猝死的预测价值还有争议。另外,服用ω3脂肪酸会使植入埋藏式复律除颤器病人发生缓慢型室性心动过速的机会增加,但不一定增加心源性猝死的危险。ω3脂肪酸究竟具有抗心律失常作用还是致心律失常作用?目前还存在争议。该文根据国外的最新资料对上述问题作了介绍。

Ω3脂肪酸及其益处

Ω3s和Ω6两类脂肪是人体必需的脂肪酸，可由人体合成，但必须通过饮食供应。这些脂肪酸的命名是根据第一个双键出现在分子中甲基端（Ω）开始的第三个碳或第六个碳的位置。因此，任何满足这个条件的脂肪酸都是Ω3或Ω6脂肪。

Ω3脂肪酸可使阿兹海默症的发展减缓

据美国BIOCOMPARE科技新闻网（2006／10／16）报道，一项由瑞典Karolinska研究所发表的新研究指出。补充Ω3脂肪酸可以减缓轻度阿兹海默症患者的认知能力衰减。但是，Ω3脂肪酸对于较严重的阿兹海默症并无正面影响。这项研究也是该领域中进行的第一项临床试验，研究结果发表于10月号的《神经病学》（Neurology）期刊上。

维生素B或ω3脂肪酸难以预防心血管事件的再发

有缺血性心脏病或脑卒中的患者从膳食中分别或同时摄人维生素B或ω3脂肪酸能否预防严重的心血管事件？此项随机双盲安慰剂对照试验进行了研究。2501例有心肌梗死、不稳定型心绞痛或缺血性恼卒中病史的患者人组，

ω3多不饱和脂肪酸对脓毒症大鼠骨骼肌高分解代谢的影响

目的:探讨ω3多不饱和脂肪酸对脓毒症大鼠骨骼肌高分解代谢的影响。方法:30只SD大鼠随机分组,模型组采用盲肠结扎穿刺术复制脓毒症模型,假手术组仅翻动盲肠,不做结扎处理。试验期间大鼠禁食不禁水,试验组给予加用ω3脂肪酸的肠外制剂,药物对照组除了ω3脂肪酸外,其余成分相同。其余仅给予生理盐水肠外注射。在模型复制前5d即开始连续给相应治疗。造模第16小时,无菌操作下取双侧伸趾长肌,一侧放入液氮中保存,另一侧放入孵育液中继续孵育2h,并测定湿重。高效液相色谱法测定肌肉组织中3甲基组氨酸(3-MH)含量。结果:各组一侧伸趾长肌湿重差异未见显著性(P>0.05)。与正常组比较,脓毒症组16h点伸趾长肌降解率升高明显(P<0.05)。与脓毒症组比较,ω3脂肪酸组大鼠3-MH含量均下降明显(P<0.05)。结论:脓毒症时存在骨骼肌高分解代谢,ω3脂肪酸可明显降低骨骼肌高分解代谢率。

ω3鱼油脂肪酸治疗脓毒症并肠功能障碍的疗效及其对患者免疫功能的影响

目的探讨ω3鱼油脂肪酸能否通过改善淋巴细胞免疫功能来降低肠功能障碍患者的病死率。方法选择48例存在肠功能障碍的严重脓毒症并多脏器功能障碍患者,随机将其为对照组与观察组,每组24例,对照组采用胸腺肽α1及乌司他丁等常规治疗,观察组在此基础上加用ω3鱼油脂肪酸治疗,比较两组患者的死亡率、ICU住院日、急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)、Marshall评分、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果 28 d随访中,对照组死亡10例,占41.7%,观察组死亡3例,占12.5%,两组患者病死率比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组ICU住院日短于对照组(P<0.05);观察组治疗第7 d APACHEⅡ和Marshall评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组血清CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均明显高于对照组,hs-CRP低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ω3鱼油脂肪酸可能通过改善淋巴细胞免疫功能从而降低肠功能障碍患者的病死率。

ω-3多不饱和脂肪酸的作用机制及应用研究进展

介绍了ω-3多不饱和脂肪酸在免疫及抗感染、保护血管、抗肿瘤、促进生长发育方面的作用机制及应用研究进展。

ω-3脂肪酸后处理对大鼠缺血再灌注心肌抗氧化作用的影响

目的探讨ω-3脂肪酸后处理对离体大鼠缺血再灌注心肌抗氧化作用的影响。方法将60只SD大鼠随机分为4组:持续灌注组(A组)、缺血再灌注组(B组)、缺血后处理组(C组)以及ω-3脂肪酸后处理组(D组)。建立Langendorff离体大鼠心脏缺血再灌注模型,A组持续灌注150min,其余各组均平衡灌注30min,全心缺血30min,再灌注90min,C组在再灌注开始前进行4个循环的复灌20s/缺血20s,D组在再灌注开始前用ω-3脂肪酸灌注15min。灌流结束后取左心室心肌测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)水平;透射电镜下观察心肌线粒体形态结构的改变,TTC染色计算心肌梗死面积。结果与B组相比,C、D组LDH、MDA水平显著降低(P<0.05),D组SOD水平显著升高(P<0.05);C、D组的大鼠心肌线粒体损伤程度明显减轻,心肌梗死面积明显缩小(P<0.01)。结论ω-3脂肪酸后处理可提高离体大鼠心脏缺血再灌注后心肌组织SOD的水平,改善心肌抗氧化能力,减轻心肌细胞线粒体损伤。

ω-3脂肪酸对于大鼠呼吸机相关性肺损伤的预防作用及机制研究

目的研究ω-3脂肪酸对呼吸机相关性肺损伤（VILI）大鼠炎性反应的影响,探讨ω-3脂肪酸对于VILI的预防作用及其机制。方法 48只SD大鼠按随机数字表法分成对照组（C组）,VILI模型组（M组）,ω-3脂肪酸干预1、2、3、4组（I1组、I2组、I3组、I4组,制模前0.5h分别静脉注射ω-3脂肪酸60、120、180、240mg/kg）。除C组外各组均行机械通气,3h后处死大鼠。取肺组织测定肺湿/干重（W/D）比值、肺组织髓过氧化物酶（MPO）水平;收集支气管肺泡灌洗液（BALF）测定总蛋白水平;取血测定白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果与M组比较,随着ω-3脂肪酸用量增加,I1、I2、I3、I4组肺W/D比值下降（P〈0.01）;BALF中总蛋白水平、MPO水平、血TNF-α水平逐渐降低（P〈0.01）;血IL-10水平升高（P〈0.05）。结论ω-3脂肪酸可通过抗炎、抗氧化应激、减少渗出等机制发挥对肺的保护作用,还可减轻VILI,其最适剂量范围为120-180mg/kg。

Omega-3脂肪酸预防和治疗多囊卵巢综合征并发症的研究进展

多囊卵巢综合征(PCOS)被认为是最常见的女性内分泌疾病之一,除疾病本身引起的生殖功能异常外,PCOS引起的代谢紊乱及相关并发症也是影响患者生存质量的重要因素。目前的研究结果表明,虽然omega-3脂肪酸是缓解PCOS相关并发症的有效药物之一,但在饮食中如何使用omega-3脂肪酸对PCOS患者的并发症进行系统性控制仍待进一步研究。现主要综述omega-3脂肪酸对PCOS患者体质量指数(BMI)、胰岛素抵抗程度、异常炎症因子表达水平及对甾体激素水平的影响,总结omega-3脂肪酸治疗PCOS并发症的临床疗效的研究进展。

ω-3多不饱和脂肪酸和心率变异性关系的研究进展

多不饱和脂肪酸（PUFA）按照从甲基端起第个双键的位置不同,可分为ω-3,ω-6,ω-9等。ω-3系列主要包括二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）、а-亚麻酸（ALA）等。

强化ω-3多不饱和脂肪酸的肠内营养支持对高脂血症性急性胰腺炎患者免疫功能的影响

目的探讨强化ω-3多不饱和脂肪酸的肠内营养支持对高脂血症性急性胰腺炎患者免疫功能的影响。方法将80例高脂血症性急性胰腺炎患者按随机数字表法分为治疗组40例和对照组40例。2组患者均给予急性胰腺炎规范治疗,对照组给予肠外营养支持,治疗组经空肠营养管给予强化ω-3多不饱和脂肪酸的肠内营养支持。治疗后比较2组患者营养指标、体液免疫指标和细胞免疫指标、炎症反应指标的变化情况。结果2组患者给予不同营养方式治疗后,治疗第7天、14天时血清白细胞(ALB)和血清前白蛋白(PAB)水平以治疗组提高更为显著(均P<0.05)。治疗第14天时IgA,IgG,IgM,淋巴细胞总数(TLC),CD3,CD4以治疗组上升更显著(均P<0.05);同时2组患者治疗后的CRP,TNF-α,IL-6水平呈现下降趋势,治疗组下降更显著(均P<0.05)。结论强化ω-3多不饱和脂肪酸的肠内营养支持治疗高脂血症性急性胰腺炎患者能更加有效地改善患者营养状况及免疫功能,降低患者急性反应期炎症反应,从而改善预后、提高临床疗效。