单核细胞趋化因子-1对小鼠3T3-L1脂肪细胞B族Ⅰ型清道夫受体表达的影响

目的:观察单核细胞趋化因子-1(MCP-1)对小鼠3T3-L1脂肪细胞B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BI)膜蛋白表达的影响。方法:3T3-L1前脂肪细胞应用"鸡尾酒"法:0.5 mmol/L 1-甲基-3-异丁基黄嘌呤、1 umol/L地塞米松和10 mg/L胰岛素诱导分化成熟,油红O染色法鉴定;将诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞应用MCP-1按照不同浓度及时间进行干预,分为浓度梯度组:分别加入MCP-1 0 ng/mL、20 ng/mL、40 ng/mL、80 ng/mL,各作用48 h;时间梯度组:分别加入MCP-1 40ng/mL各作用0 h、24 h、48 h、72 h。流式细胞仪分别测定各组细胞表面SR-BI表达。结果:(1)3T3-L1前脂肪细胞诱导分化至第9～10 d,油红O染色示90%以上可见明显脂滴,分化为成熟脂肪细胞。(2)流式细胞仪浓度梯度组结果示:与MCP-1 0 ng/mL组相比,20 ng/mL、40 ng/mL、80 ng/mL组细胞表面SR-BI表达均下降,差异均有统计学意义(P均<0.01);流式细胞仪时间梯度组结果示:与MCP-10h组相比,48 h和72 h组细胞表面SR-BI表达亦均下降,差异亦均有统计学意义(P均<0.01)。结论:MCP-1干预3T3-L1脂肪细胞后,SR-BI细胞表面SR-BI的表达呈浓度依赖性和时间依赖性减少,MCP-1抑制3T3-L1脂肪细胞SR-BI细胞表面SR-BI的表达。

2型糖尿病并发冠心病患者血清FSTL1与cTnT、BNP浓度和冠状动脉病变程度的关系

目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)并发冠状动脉粥样硬化性心脏病冠心病(coronary heart disease,CHD)患者血清卵泡抑素样蛋白-1(follistatin-like protein-1,FSTL1)、肌钙蛋白T(troponin T,c TnT)、血清B型钠尿肽(B-type natriuretic peptide,BNP)的浓度变化与冠状动脉病变程度的关系。方法选取盐城市第一人民医院2016年1月至2018年6月确诊的单纯T2DM患者90例作为T2DM组、T2DM并发CHD患者90例作为并发组、同期健康体检对象90名作为对照组。检测3组受试者的血清FSTL1、cTnT、BNP浓度,分析并发组不同冠状动脉病变支数亚组的患者血清FSTL1、c TnT、BNP浓度差异;分别采用简单线性相关及多元线性回归法分析血清FSTL1、cTnT、BNP浓度与Gensini评分的关系。结果并发组和T2DM组三酰甘油(triacylglycerol,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、空腹血糖(fasting blood glucose,FPG)浓度均高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)浓度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。并发组血清TG、TC、LDL-C、FPG浓度均高于T2DM组,HDL-C浓度低于T2DM组,差异有统计学意义(P<0.05)。并发组和T2DM组血清FSTL1、c TnT、BNP浓度及Gensini评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);并发组的血清FSTL1、cTnT、BNP浓度及Gensini评分均高于T2DM组,差异有统计学意义(P<0.05)。T2DM并发CHD组患者中,三支病变亚组、双支病变亚组的血清FSTL1、cTnT、BNP浓度高于单支病变亚组,差异有统计学意义(P<0.05);三支病变亚组的血清FSTL1、c TnT、BNP浓度高于双支病变亚组,差异有统计学意义(P<0.05)。T2DM并发CHD组患者血清FSTL1、c TnT、BNP浓度与Gensini评分呈显著的正相关关系(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示血清FSTL1、c TnT、TG、BNP浓度升高、HDL-C浓度降低是T2DM并发CHD组患者冠状动脉病变程度加重的独立危险因素(P<0.05)。结论T2DM并发CHD患者血清FSTL1、cTnT、BNP浓度升高与冠状动脉病变程度加重关系密切。

23-乙酰泽泻醇B对2型糖尿病小鼠血糖的影响

目的探讨23-乙酰泽泻醇B是否有治疗2型糖尿病的潜能。方法通过腹腔注射链脲佐菌素和烟酰胺建立2型糖尿病小鼠模型。灌胃罗格列酮或23-乙酰泽泻醇B 3周后,测定2型糖尿病小鼠血糖值,次日进行口服葡萄糖耐受试验(OGTT)。采用葡萄糖荧光示踪剂,测定23-乙酰泽泻醇B对葡萄糖吸收的影响。采用3T3-L1前脂肪细胞分化模型,测定其对分化的影响。结果分别每天灌胃阳性药罗格列酮10 mg·kg^(-1)、23-乙酰泽泻醇B(5、10、20 mg·kg^(-1)),连续灌胃给药3周后,降低了2型糖尿病小鼠血糖值,一定程度改善OGTT过程中胰岛素抵抗。在30 mmol·L^(-1)高糖条件下,23-乙酰泽泻醇B促进了脂肪细胞对胰岛素刺激的葡萄糖吸收;23-乙酰泽泻醇B(1、10μmol·L^(-1))促进3T3-L1前脂肪细胞的分化过程。结论 23-乙酰泽泻醇B降低2型糖尿病小鼠血糖,促进前脂肪细胞分化,促进脂肪细胞吸收葡萄糖,但作用机制仍需进一步探索。

细胞毒分子在原发结内的外周T细胞淋巴瘤非特指型中的表达及意义

目的:通过对外周T细胞淋巴瘤-非特指型(PTCL-U)患者病理组织蜡块细胞毒分子(CM)T细胞内抗原(TIA-1)和颗粒酶B(GB)的免疫组化检测,探讨CM在PTCL-U进一步分型中的作用及意义。方法:应用免疫组化的方法检测2005年1月～2008年1月51例经病理确诊的PTCL-U患者的TIA-1和GB的表达情况,并分析其与Ki-67、临床特征和治疗意义以及预后的关系。结果:本组51例患者中有33.3%(17/51)表达至少1个细胞毒分子。在CM阳性与阴性表达中,Ki-67高表达比例为88.2%vs.50.0%(P=0.0078),LDH升高比例为82.4%vs.52.9%(P=0.0406),出现B症状比例为70.6%vs.35.3%(P=0.0173),一般行为状态差(PS>2分)比例为64.7%vs.32.4%(P=0.0279);总的生存率经Log-rank检验CM阳性显著低于阴性(P=0.0015)。多因素生存分析显示,CM、一般行为状态差(PS>2分)和Ki-67高表达可以做为PTCL-U的独立预后因素。结论:细胞毒分子的表达不仅和PTCL-U预后差相关,而且作为细胞毒细胞的特异性标记在原发于结内的PTCL-U进一步分型中具有一定的作用。

用ТБВ1-108和УТБВ1-108型设备对油井井底附近地层进行热压处理的技术规范

介绍了俄罗斯油田用于油井井底热压处理增产措施的两种设备ТБВ1- 10 8和УТБВ1- 10 8,并从技术角度对设备的原理、结构及现场应用给予了详尽的阐述。

喘可治注射液治疗哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠的临床研究

目的:观察喘可治注射液治疗哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠的临床疗效并探讨对NF-κB调控下炎性反应因子的表达水平及细胞免疫功能的影响。方法:选取2018年10月至2019年7月广州中医药大学附属东莞市中医院收治的ACO急性加重期肾虚不纳型患者60例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组30例。对照组予常规西医治疗,观察组在对照组基础上加用喘可治注射液。观察2组的总有效率,治疗前后中医证侯积分、外周血WBC、EOS、血气分析指标、NF-κB、IL-6、TNF-α、sICAM-1、细胞免疫功能指标的变化。结果:观察组总有效率显著高于对照组(P<0.05),2组治疗后中医证侯积分,外周血WBC、EOS、PaO2及PaCO2较前显著改善(P<0.05),且观察组的改善更为明显(P<0.05);治疗后2组NF-κB、IL-6、TNF-α、sICAM-1均较前显著降低(P<0.05),且观察组显著低于对照组(P<0.05);治疗后观察组能显著改善外周血T淋巴细胞亚群指标(P<0.05),而对照组治疗前后外周血T淋巴细胞亚群指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:喘可治注射液符合ACO肾虚不纳型的病机,通过抑制NF-κB信号水平,调控TNF-α、IL-6以及sICAM-1的表达,减轻ACO患者炎性反应并改善患者细胞免疫功能。

基于网络药理学探讨黄芪-葛根药对对T2DM模型大鼠PI3K/Akt/FoxO1信号通路的调节作用

目的:基于网络药理学及实验验证探讨黄芪-葛根(芪葛)药对治疗2型糖尿病(T2DM)的作用机制。方法:借助中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)平台筛选黄芪、葛根的有效成分及靶点;于各疾病数据库中检索T2DM的相关靶点,提取药物与疾病的共同靶点,利用STRING数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析并构建PPI网络图,并利用Cytoscape 3.7.1软件对关键靶点进行网络拓扑学分析。再利用DAVID在线工具对核心靶点进行基因本体(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析以探究其可能的分子机制。以高脂饲料喂养同链脲佐菌素尾静脉注射联合的方式建立糖尿病大鼠模型,分为正常组、模型组、二甲双胍组、芪葛药对高、中、低剂量组,灌胃4周后检测各组大鼠血清空腹血糖,空腹胰岛素(FINS),天冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),糖原,白细胞介素(IL)-6,肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝脏组织中胰岛素受体底物(IRS)-2,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),叉头框蛋白O1(FoxO1)蛋白的表达。结果:网络药理学方法筛选出芪葛药对治疗T2DM核心靶点131个,Akt1,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)1,TNF-α,IL-6等较为关键;KEGG富集分析预测该药对主要通过PI3K/Akt信号通路,TNF信号通路,FoxO信号通路等发挥降糖作用。与模型组比较,芪葛药对高、中剂量组空腹血糖及FINS水平均降低,糖原水平显著升高(P<0.05,P<0.01);芪葛药对高、中、低剂量组AST,ALT,TG,LDL-C显著降低(P<0.05,P<0.01);芪葛药对高、低剂量组TC水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,芪葛药对高、中剂量组IL-6,TNF-α水平显著降低(P<0.05,P<0.01);芪葛药对高剂量组IRS-2,Akt,p-Akt,PI3K,p-PI3K蛋白表达升高,FoxO1蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:芪葛药对在治疗T2DM上具有多成分-多靶点-多途径的特点,可能通过IL-6,TNF-α等靶点调控PI3K/Akt/FoxO1信号通路影响胰岛素抵抗、糖原合成、糖异生、葡萄糖转运、炎症及免疫反应等过程对糖尿病进行治疗。

桑叶调节PI3K/Akt/PPARα/CPT-1通路改善2型糖尿病大鼠肝脏糖脂代谢紊乱机制

目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/过氧化物酶体增殖物激活受体α/肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(PI3K/Akt/PPARα/CPT-1)信号通路探讨桑叶水提物对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏糖脂代谢紊乱的作用及其机制。方法:高脂喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)方法制备T2DM模型,按血糖、体质量将造模成功大鼠随机分为模型组、二甲双胍(0.2 g·kg^(-1))组和桑叶水提物(含生药4.0 g·kg^(-1))组,连续给药8周,每周相同时间测定空腹血糖。苏木素-伊红(HE)染色、油红O染色观察肝脏组织形态学和脂肪变化;生化分析法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨基酸氨基转移酶(AST)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、Akt、PPAR-α、CPT-1蛋白表达。结果:给药8周后,与正常组比较,模型组大鼠血糖显著升高(P<0.01);与模型组比较,桑叶水提物组大鼠血糖显著降低(P<0.01)。HE染色显示,正常组大鼠肝组织结构完整,肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列;模型组大鼠肝细胞损伤明显;与模型组比较,桑叶水提物组大鼠空泡变性程度显著降低,未见小胆管增生等病变。油红O染色显示,正常组大鼠肝细胞无明显脂肪变性、坏死,肝细胞几乎无脂滴;模型组大鼠肝内脂滴较正常组明显增加;桑叶给药可明显减少大鼠肝脏脂滴。模型组大鼠TC、TG、LDL-C、AST、ALT水平较正常组显著升高(P<0.01);桑叶水提物组大鼠TC、TG、LDL-C、AST、ALT水平较模型组明显降低(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组大鼠p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、PPARα和CPT-1的蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,桑叶水提物能明显增加p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、PPARα和CPT-1的蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:桑叶水提物可改善T2DM大鼠肝脏糖代谢紊乱,降糖机制可能与调控PI3K/Akt/PPAR-α/CPT-1信号通路有关。

HTLV-1 Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控机制的研究

目的：探讨成人T淋巴细胞白血病病毒1型（ HTLV-1病毒） Tax蛋白阳性T细胞TaxP中早期生长反应基因-1（EGR-1）表达调控的机制。方法构建不同长度的EGR-1调控序列报告基因，将其转染TaxP细胞，加入NF-κB抑制剂BAY 11-7082或同等体积的二甲基亚砜（DMSO），24 h后收集细胞检测荧光素酶活性；TaxP细胞上清中加入BAY 11-7082或同等体积的DMSO，24 h后免疫印迹检测EGR-1蛋白表达；将Tax及其突变体M22和M47分别转染293 T细胞，24 h后免疫印迹检测EGR-1蛋白表达。结果成功构建了不同长度及突变体的EGR-1调控序列荧光素酶报告基因；荧光素酶报告基因检测显示：相对于E1、E2而言， E3、DelE、MutE的荧光素酶活性明显降低，加入BAY 11-7082后，E1、E2的荧光素酶活性明显降低（P＜0．01），而E3、DelE、MutE无明显变化；同样地，免疫印迹检测显示加入BAY 10-7082后，EGR-1蛋白表达明显降低；相对于野生型和M47，转染M22突变体后，293 T细胞EGR-1蛋白表达明显降低。结论 NF-κB是Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控的关键核因子。

胰岛素信号传导系统与2型糖尿病关系的研究

2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus T2DM)是一种多基因遗传因素,环境因素综合作用引起的内分泌代谢性疾病,久病可多只多器官受损,例如:糖尿病眼病和肾脏疾病、神经受损、糖尿病心脏并、血管受损等多组织的慢性退行性病理改变,最终引起多器官功能缺陷至衰竭。2型糖尿病病理缺陷主要体现在胰岛素分泌相对不足及胰岛素的抗性,其中胰岛素抵抗(IR)是其核心始动因子[1]。近期有研究报道,造成胰岛素抵抗的重要原因是胰岛素信号传导系统的异常。所以,进一步探讨胰岛素信号传导异常系统在2型糖尿病中的作用及其分子机制,对于2型糖尿病的发生、发展、转归与治疗具有重要意义。

芪苈强心胶囊联合环磷腺苷葡胺治疗慢性心衰的临床研究

目的探讨芪苈强心胶囊联合环磷腺苷葡胺治疗慢性心力衰竭的临床疗效。方法选择衡水市第五人民医院内科2013年2月—2015年2月收治的慢性心力衰竭患者82例,随机分为治疗组和对照组,每组各41例。对照组在常规治疗的基础上静脉滴注环磷腺苷葡胺注射液120 mg,1次/d。治疗组在对照组的基础上服用芪苈强心胶囊,4粒/次,3次/d。两组疗程均为2个月。比较两组的临床疗效、6分钟步行距离(6MWD)、左室射血分数(LVEF)以及心衰生化指标肌钙蛋白T(c Tn T)、氨基末端B型脑利钠肽前体(NT-pro BNP)、血清类胰岛素生长因子-1(IGF-1)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)和同型半胱氨酸(Hcy)。结果治疗组总有效率(95.12%)明显高于对照组(80.48%),两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组的6MWD、LVEF显著高于同组治疗前,且治疗组高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组的c Tn T、NT-pro BNP、hs-CRP、Hcy显著低于同组治疗前,IGF-1显著高于治疗前,且比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,治疗组的c Tn T、NT-pro BNP、hs-CRP、Hcy显著低于对照组,IGF-1显著高于对照组,且比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论芪苈强心胶囊联合环磷腺苷葡胺治疗慢性心衰具有较好的临床疗效,且能够改善慢性心衰的观察指标。