纳米银和乙烯利预处理调控伊藤牡丹‘巴茨拉’切花瓶插品质

【目的】分析‘巴茨拉’伊藤牡丹调控切花乙烯致衰的生理效应,以期为牡丹切花保鲜的调控技术提供理论依据。【方法】分别用外源20μg·L-1纳米银(NS)、5和20μL·L-1乙烯利(CEPA)预处理1 h,通过瓶插法观察‘巴茨拉’切花乙烯致衰的调控。利用气相色谱法测定花瓣乙烯释放的动态变化,称重法测定花枝水分状况,分光光度法测定膜脂过氧化水平,高效液相色谱法测定能量状态,结合主成分分析法解析‘巴茨拉’切花瓶插过程中乙烯代谢、脂质过氧化和能量状态各指标之间的关系。【结果】1)‘巴茨拉’切花吸水迅速,瓶插24 h达到盛开状态,瓶插寿命较短,仅有3~4天;纳米银预处理能够显著延长瓶插寿命改善切花瓶插品质,乙烯利加速切花的衰老进程,并且有显著的剂量效应。2)瓶插6 h有短暂的乙烯跃变特征,与对照相比,纳米银预处理乙烯释放峰值降低26.5%,而乙烯利显著促进乙烯释放,5和20μL·L^(-1)乙烯利预处理分别升高了19.0%和125.5%。3)‘巴茨拉’开放衰老是花枝水分失衡与膜脂过氧化加剧的过程,纳米银能够改善花枝的水分状况、抑制丙二醛含量升高和可溶性蛋白质含量降低,乙烯利作用与纳米银作用相反。4)纳米银能够促进呼吸底物转化与积累,提高呼吸代谢关键酶活性和能荷水平;乙烯利则降低呼吸底物含量、降低呼吸代谢关键酶活性和能荷水平。【结论】‘巴茨拉’牡丹切花是乙烯超敏感类型,切花开放和衰老进程受到内源乙烯和能量代谢的共同调控,控制乙烯生物合成与能量状态应成为改善‘巴茨拉’牡丹切花品质的基本策略。

伊藤牡丹‘巴茨拉’内参基因筛选及花瓣衰老相关基因的表达分析

为筛选伊藤牡丹‘巴茨拉’的内参基因,以‘巴茨拉’切花不同发育阶段的花瓣以及不同器官的根、茎、叶柄、叶片、花托、萼片、花瓣、雄蕊和子房为试验材料,结合本课题组已有的‘巴茨拉’转录组数据,参考常规的内参基因,初步筛选出10个表达稳定且表达量高的候选内参基因(GAPDH、ACT、UBQ、β-TUB、PP2A、CYP、EF-1α、F3H、TIP41、UBC)。利用实时荧光定量PCR技术以及geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder 4种软件进行评估。结果表明, UBQ和TIP41是‘巴茨拉’切花不同发育阶段花瓣的最佳内参基因组合;β-TUB、UBQ和ACT可作为‘巴茨拉’不同器官的最佳内参基因组合。以UBQ和TIP41为双内参基因,分析了5个‘巴茨拉’切花衰老相关基因(ACS1、ACO1、ETR1、SAG12、SAG21)的表达模式,发现它们在‘巴茨拉’花瓣衰老过程中发挥重要作用。筛选出的内参基因组合为进一步研究伊藤牡丹功能基因的差异表达奠定了实验基础。