大蒜精油抑制白细胞介素-1α诱导的单核细胞-内皮细胞粘附及机理探讨

目的：观察大蒜精油（ＥＧＯ）对白细胞介素－１α（ＩＬ－１α）诱导的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）上血管细胞粘附分子－１（ＶＣＡＭ－１）表达及单核细胞粘附率的影响。方法：胰酶消化法分离ＨＵＶＥＣ，用Ｕ９３７单核细胞与之联合培养，分别加入ＩＬ－１α和ＥＧＯ加ＩＬ－１α孵育，计算单核细胞－内皮细胞粘附率，ＶＣＡＭ－１免疫荧光染色，粘附细胞仪（ＡＣＡＳ５７０）测定平均荧光值。结果：单独培养及联合培养的情况下，ＥＧＯ均对ＩＬ－１α诱导的ＨＵＶＥＣ上ＶＣＡＭ－１表达具有明显的抑制作用，并能显著下调ＩＬ－１α作用下单核细胞内皮细胞的粘附。结论：ＥＧＯ具有抗单核细胞与血管内皮细胞粘附的作用，其机理可能是通过抑制内皮细胞表面粘附分子的表达。

大蒜果聚糖∶果聚糖1-果糖基转移酶的酶学特性

大蒜中主要干物质为多糖,其中主要糖类为果聚糖,具有多种保健作用。本文研究了大蒜中果聚糖∶果聚糖1-果糖基转移酶(Fructan∶fructan 1-fructosyltransferase,1-FFT)的酶学特性,为阐明大蒜在采后贮藏、保鲜及深加工过程中果聚糖含量的变化提供依据。结果表明:当以1-蔗果三糖为底物时,1-FFT仅催化生成蔗果四糖,且无其它结构的四糖生成;大蒜1-FFT主要存在于40%~50%硫酸铵部分;其最适p H为6.0,在p H 5.5~6.5条件下1 h内保持稳定;最适温度为25℃,在15~25℃条件下1 h内可保持稳定;低浓度Mn^(2+)、Mg^(2+)、Fe^(3+)促进1-FFT活力,Cu^(2+)、Zn^(2+)、Ag^+抑制1-FFT活力;1-FFT活力随底物浓度升高而增大,其米氏常数Km=0.6977 mol/L,最大反应速率Vmax=116.23μg/h。大蒜1-FFT活力受p H、温度、不同金属离子及底物浓度影响,调节以上因素有助于调控大蒜果聚糖代谢、保持大蒜品质及延长大蒜贮藏期。

Suppressive action of garlic oil on growth and differentiation of human gastric cancer cell line BGC-823

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黑蒜提取液对胰腺癌Panc-1细胞生长与抗氧化分子机制的实验研究

目的探讨黑蒜提取液(aged black garlic extract,ABGE)对Panc-1细胞生长与抗氧化能力的影响。方法将不同浓度的ABGE(0.2、1.0、1.8 mg/ml)作用于Panc-1细胞,采用CCK-8法分别于24 h、48 h、72 h测定Panc-1细胞株的生长能力;RT-PCR检测ABGE干预后Panc-1细胞VEGFm RNA以及MMP-9m RNA表达变化;ELISA法检测Panc-1细胞上清液中相关蛋白VEGF、SOD的表达情况。结果 CCK-8结果显示,黑蒜提取液对Panc-1细胞株的生长活性具有明显的抑制作用,且具有时间剂量依赖关系;RT-PCR结果显示,黑蒜提取液能明显地上调VEGFm RNA以及下调MMP-9m RNA的表达;ELISA法结果显示,随黑蒜提取液浓度的增加,Panc-1细胞上清液中VEGF蛋白的表达水平下降、SOD蛋白表达增加。结论黑蒜提取液能显著抑制Panc-1细胞的生长能力,其抗氧化能力可能是与下调VEGF蛋白表达、MMP-9以及上调SOD表达有关。

大蒜蔗糖:蔗糖1-果糖基转移酶基因As-1-SST的克隆与表达分析

植物果聚糖是一类重要的可溶性碳水化合物,其在植物中的积累可提高植物的抗逆性。为了解大蒜蔗糖:蔗糖1-果糖基转移酶的序列特征和功能,本研究采用TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)得到乐都紫皮大蒜As-1-SST基因全长序列,利用BLAST、DNAMAN、ProtParam、SWISS-MODEL、MEGA等生物信息工具分析其序列特征,通过荧光定量PCR(qRT-PCR)分析As-1-SST基因在大蒜根、假茎、叶片和鳞芽中的表达差异及其对低温和干旱胁迫的响应情况。结果表明,大蒜As-1-SST基因全长1872 bp,编码623个氨基酸,推测蛋白质分子质量为69.76 kDa,理论等电点为5.19,为不稳定亲水性蛋白;亚细胞定位预测结果显示,As-1-SST蛋白主要定位于液泡,该蛋白无信号肽,包含2个特异位点,属于糖苷水解酶32(GH32)家族。在进化关系上,大蒜As-1-SST与百合科的洋葱1-SST亲缘关系最为接近。qRT-PCR分析表明,As-1-SST基因在根中的表达量最高,其次是假茎,在鳞芽和叶片中表达水平较低,具有明显的组织特异性;不同组织As-1-SST对于低温及干旱胁迫的响应差异显著,低温胁迫显著诱导了根、假茎、叶片中As-1-SST的表达,而干旱胁迫只显著提高了鳞芽中As-1-SST的表达量,说明大蒜各组织As-1-SST对逆境信号的响应机制不同。本研究为进一步鉴定大蒜果聚糖合成酶基因的生物信息学功能和表达调控机制提供了一定的理论依据。

大蒜治疗口腔癌前病变的机理探讨

目的:探讨大蒜治疗口腔癌前病变及其机理。方法:用0.5%4-硝基喹啉氧化物涂于 Wistar 大鼠硬腭后方,每周3次,7周后建立口腔粘膜癌前病变模型。然后将大鼠随机分为治疗组和对照组。于治疗组大鼠硬腭后方涂大蒜注射液,对照组涂等量蒸馏水,每周3次,共8周。分别于第5、8周及停药后第7周分批处死动物。不同时期取腭粘膜标本进行光镜及电镜观察。结果:治疗组无1例恶化,而对照组3个时期的恶化率分别为25.0%、16.7%、14.3%。超微结构研究表明大蒜能抑制细胞的活跃增生。结论:大蒜能阻断口腔癌前病变的发展,抑制细胞活跃增生(P<0.01),但不能使癌前病变逆转为正常组织(P>0.05)。

NAT诱发蚕豆微核效应

目的 探讨NAT诱发蚕豆根尖的微核效应和大蒜的抑制作用。方法 利用蚕豆根尖微核技术 ,对不同浓度NAT诱发蚕豆根尖微核进行了研究 ,并进一步研究了大蒜的抗诱变作用。结果 高浓度NAT(0 .5～ 10mg·ml-1)组能显著诱发蚕豆根尖微核的形成 (P <0 .0 1) ,并呈明显的剂量效应 ;加入大蒜蒜汁处理蚕豆根尖 ,微核率显著降低 ,与阳性组比较有显著差异 (P <0 .0 1)。结论 大剂量NAT具有致突变作用 。

吡咯基丝氨酸乙酯的合成表征及其对大蒜绿变的作用

采用有机合成的方法得到新化合物吡咯基丝氨酸乙酯,验证其是否可以作为大蒜绿变的色素前体,并用核磁共振的方法验证了这种新化合物具有和已报导过的大蒜绿变色素前体-3,4-二甲基吡咯基缬氨酸(PP-Val)和3,4-二甲基吡咯基丙氨酸(PP-Ala)相似的结构,只是R侧链的结构不同。但实验结果表明,吡咯基丝氨酸乙酯不能使新蒜绿变,也不能和丙酮酸发生反应,表明R侧链的结构对这种吡咯基氨基酸是否能作为色素前体起着很重要的作用。

大蒜内参基因筛选及AsACO基因对盐胁迫和促生菌的响应分析

【目的】筛选大蒜在盐胁迫下的稳定内参基因,并分析1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶基因(AsACO)对盐胁迫和促生菌的响应表达特性,为深入探究促生菌的促生机制及大蒜对盐胁迫的响应机制研究提供理论参考。【方法】以乐都紫皮大蒜为试材,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测5个内参基因ACT、UBC、HIS3、18S rRNA、TUB在盐胁迫下的表达稳定性,结合GeNorm、NormFinder和BestKeeper筛选出最稳定的内参基因,并分析恶臭假单胞菌UW4对盐胁迫下AsACO基因表达的影响。【结果】5个候选内参基因引物的特异性强、无引物二聚体。GeNorm分析得出候选内参基因稳定性排名为18S rRNA=TUB>HIS3>UBC>ACT,NormFinder分析得出内参基因稳定性排名为18S rRNA>HIS3>TUB>UBC>ACT,BestKeeper分析得出内参基因稳定性排名为UBC>HIS3>18S rRNA>TUB>ACT,最终以几何平均数综合分析得出18S rRNA为最稳定的内参基因。以18S rRNA为内参基因,检测出AsACO基因表达具有明显的组织特异性,在叶片中的相对表达量明显高于根。整个处理过程中,盐胁迫明显诱导AsACO基因在不同处理时间及不同组织中表达上调,根和叶片中AsACO基因的相对表达量分别在2 d和12 h时达最高,较正常培养(CK)分别显著升高124.43%和238.34%(P<0.05,下同),与盐胁迫处理相比,盐胁迫+浇施恶臭假单胞菌UW4处理显著降低AsACO基因在不同处理时间根和叶片中的相对表达量,其中在2 d和12 h时降幅较大,分别降低了112.08%和343.34%。【结论】18S rRNA是盐胁迫下大蒜中最稳定的内参基因。盐胁迫可诱导大蒜根和叶片中AsACO基因的上调表达,从而间接促进ACO和乙烯水平升高,加速由乙烯调控的细胞衰老,甚至死亡,但盐胁迫下恶臭假单胞UW4具有抑制AsACO基因表达的作用,以减少ACO和乙烯的合成,从而延缓大蒜细胞衰老,提高逆境耐受性。

大蒜治疗口腔癌前病变的电子探针显微分析

目的 :探讨微量元素在大蒜治疗口腔癌前病变中的作用。方法 :先用 4 硝基喹啉氧化物 ( 4 nitroquinoline 1 oxide ,4NQO)建立大鼠口腔癌前病变模型 ,然后用大蒜液治疗。于治疗第 5 ,8周及停药后 7周分批处死动物 ,取腭粘膜病变部位上皮组织行电子探针显微分析。结果 :治疗期间大蒜能提高治疗组上皮细胞核铜及核内外硒、钼水平 ;降低胞浆及核内外锌浓度 ;停药后上皮细胞内上述 4种元素含量在两组间差异无显著性。结论 :大蒜能通过提高细胞核铜及核内外硒和钼含量 ,降低细胞核内外锌的浓度 。

Study of the Mechanism of Essential Garlic Oil Inhibiting Interleukin1 Induced Monocyte Adhesion to Endothelial Cells

To observe the effects of essential garlic oil (EGO) on vascular cell adhesive molecule-1 (VCAM-1) expression of endothelial cells and monocyte-endothelial cell adhesion rate induced by interleukin-1α (IL-1α). Methods: Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) were isolated by trypsin digestion method and co-cultured with IL-1α or EGO+IL-1α in the absence or presence of U937 monocyte. Monocyte-endothelial cell adhesion rate was examined with reverted microscope. VCAM-1 expression of endothelial cells was measured by ACAS 570 confocal microscope, and the data were presented as mean fluorescent intensity. Results: EGO significantly inhibited IL-1α-induced endothelial expression of VCAM-1, and thus markedly decreased monocyte-endothelial cell adhesion rate. Conclusion: EGO has the effect on antagonizing adhesion of monocyte and vascular endothelial cell, which might be due to its inhibition on adhesive molecular expression on the surface of endothelial cells.

Hepatic Protective Effects of <i>S</i>-Allyl-L-Cysteine (SAC) in Rats with Carbon Tetrachloride (CCl₄) Induced Liver Injury

S-allyl-L-cysteine (SAC) is an organosulfur compound derived from aged garlic extract (AGE). Studies have reported that AGE possesses bioprotective capacity, including antidiabetic, antimicrobial, antioxidant, and antitumor effects. The present study examined the protective effects of SAC against carbon tetrachloride (CCl4) induced hepatotoxicity in rats. Ten male Wistar rats aged 11 - 12 weeks were randomly divided into two groups (five rats/group) as control and SAC groups. All rats had ad libitum access to water, and the SAC group received water containing SAC intragastrically (200 mg/kg) once daily for five consecutive weeks. In the fifth experimental week, 50% CCl4 in olive oil (1 mL/kg) was administered intraperitoneally three times a week to induce liver injury in both groups. Rats were sacrificed at 24 hours after the last CCl4 injection, and liver tissues were excised for histopathological, immunohistochemical and antioxidant analyses. The rats in the SAC group did not show abnormal behavior, such as decreased water intake or food consumption, during the experimental period. Body weights in all groups did not change significantly over the experimental period. Histopathological analysis showed that the percentage of hepatic steatosis was lower in the SAC group at 12.75% ± 3.74% compared to 24.64% ± 5.29% in the control group (p < 0.05). The percentage of cytochrome P4502E1 (CYP2E1) distribution area in the SAC group was also lower at 19.61% ± 6.18% compared with 25.22% ± 6.21% in the control group (p < 0.05). These results suggest that SAC can alleviate CCl4-induced liver damage by decreasing hepatic steatosis and reducing CYP2E1 expression in rats.

黑蒜提取液抑制胰腺癌Panc-1小鼠移植瘤的转移能力及分子机制

目的:探讨黑蒜提取液(ABGE)对荷瘤小鼠Panc-1细胞在体内的生长以及转移能力的影响,并初步探讨其分子机制。方法:分别建立胰腺癌Panc-1小鼠皮下移植瘤模型以及转移瘤模型,将40只小鼠随机分为空白对照组,黑蒜低,高剂量组、阳性对照组4组,分别给予0.9%氯化钠溶液,黑蒜提取液组0.4、0.8m L(相当于生药8.0、16.0g/kg),阳性环磷酰胺,2周后摘取眼球血脱臼处死小鼠,剥离瘤体称重,计算肿瘤生长抑制率以及转移抑制率;免疫组化检测肿瘤组织Smad4以及TGF-β1的表达。结果:腹腔注射黑蒜提取液可显著抑制小鼠Panc-1细胞移植瘤生长及肺转移的发生率,肿瘤抑制率可高达63.6%(P<0.01),而肺转移抑制率可高达63.5%(P<0.01)。且黑蒜高剂量抑制Panc-1细胞转移作用优于阳性对照组;免疫组化可检测发现:黑蒜提取液组Panc-1细胞胞质中TGF-β1褐黄色颗粒较空白对照组少见,而Smad4胞浆着黄色则较空白对照组多见。结论:腹腔注射黑蒜提取液可显著抑制小鼠Panc-1细胞移植瘤生长及肺转移的发生率,上调荷Panc-1小鼠移植瘤中Smad4的表达并下调TGF-β1的表达,与TGF-β1/Smad4信号通路密切相关,以上可能是黑蒜提取液抑制胰腺癌Panc-1细胞生长和转移的重要作用机制。

Effects of garlic oil on tumoragenecity and intercellular communication in human gastric cancer cell line

Previous studies have demonstrated that garlic oil (GO) and its anti-tumor compound could inhibit DNA and RNA synthesis in human cancer cells. In order to explore the effects of garlic oil on carcinoma cells, a gastric carcinoma cell line, BGC-823 was studied at cellular and molecular levels after garlic oil treatment. Data showed that the cell differentiation and suppression of tumorigenicity were significantly induced in tumor cells after garlic oil treatment. There was a correlation between the cell-cell communication recovery and the increase of p53 and waf1/p21 gene expression in garlic oil-treated cells. This result suggested that tumor suppressor gene waf1/p21 and wt p53 might play an important role in this effect.

大蒜品种比较试验

以"金乡大蒜"、"中牟紫皮蒜"(对照)、"豫蒜一号"、"宋城白蒜"(对照)、"豫蒜二号"5个大蒜品种为试材,在河南中牟地区进行品种比较试验,以期选择适宜当地栽培的优良品种。结果表明:"豫蒜一号"、"豫蒜二号"蒜薹产量分别为3 076、2 918kg/hm2,显著高于对照品种"宋城白蒜"、"中牟紫皮蒜";"豫蒜一号"、"豫蒜二号"蒜头产量分别为16 310、16 185kg/hm2,与对照品种"宋城白蒜"、"中牟紫皮蒜"达到极显著差异。"豫蒜一号"、"豫蒜二号"蒜头大、综合性状好,叶片蜡粉多,抗性强,适宜在河南中牟县推广种植。