“上师大5号”巨胚水稻幼穗再生体系的建立

本研究以"上师大5号"巨胚水稻幼穗为外植体成功建立了再生体系。分析比较了分别以15 d继代1次共继代2次和45 d连续培养2种愈伤组织诱导方法,对"上师大5号"巨胚水稻幼穗愈伤组织的诱导率、分化率和再生率的影响。结果显示,2种诱导方式愈伤组织的诱导率较为接近;15 d继代1次诱导的愈伤组织体积较大,结构较疏松,颜色较淡,优于45 d连续培养诱导的愈伤组织;15 d继代1次诱导的愈伤组织芽分化率和幼苗再生率都高于45 d连续培养诱导的愈伤组织。开展本试验,为今后以"上师大5号"为材料进行遗传转化研究奠定了基础。

“上师大5号”巨胚水稻巨胚基因分子标记的建立

巨胚水稻"上师大5号"的巨胚基因(gec)编码链与正常胚水稻相比,在+125处有一个单碱基突变。根据这个单核苷酸的差异,本研究建立了一个CAPS(AluⅠ)分子标记及检测方法。研究显示:"上师大5号"巨胚基因PCR产物经AluⅠ酶切产生4个片段,分别是18 bp、76 bp、91 bp和273 bp;正常胚水稻巨胚基因PCR产物经AluⅠ酶切产生3个片段,分别是18 bp、76 bp和364 bp。两者之间主要差异在于273 bp和364 bp两条带;"上师大5号"与正常胚水稻杂交的F1代植株巨胚基因PCR产物经AluⅠ酶切能产生5条带,大小分别是18 bp、76 bp、91 bp、273 bp和364 bp,同时具有273 bp和364 bp两个特征性条带。开展本研究可为今后以"上师大5号"巨胚水稻为亲本,采用分子标记辅助选育巨胚水稻新品种奠定了重要的基础。