建立一种N-ras突变检测的“凸背”引物荧光PCR新技术

目的建立一种简便、省时、有效的N-ras突变检测的＂凸背＂引物荧光PCR新技术。方法对比＂凸背＂引物荧光PCR新技术和Sanger测序法：通过对混有不同比例的N-ras基因热突变G13D（GGT〉GAT）质粒的样本进行对照检测来比较两者的灵敏度;对97例急性髓细胞白血病（AML）患者的外周血的DNA进行N-ras的G13D突变检测,统计两者的符合率。结果 ＂凸背＂引物荧光PCR新技术能检测出混有5%突变质粒型的样本,其灵敏度达5%,高于Sanger测序法的10%~20%。在97例AML患者的外周血的DNA中,＂凸背＂引物荧光PCR新方法和Sanger测序法检测到N-ras基因G13D突变分别为19例和18例,符合率达94.7%。结论 ＂凸背＂引物荧光PCR新技术比测序法更为快速、简单,有更高的灵敏度,容易实现。